用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒的制作方法
【专利摘要】本实用新型公开了一种用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒，包括盒盖和盒体，在盒盖内侧设置有用于放置一次性器械耗材的收纳袋，盒体内水平设置有隔板，隔板上设置有3个独立的插孔，放置洗涤液的250mL洗涤瓶、放置消化酶的30mL消化酶瓶和放置原代细胞培养基的250mL培养基瓶分别插在3个独立的插孔中，所述盒盖和盒体的一侧铰接形成翻盖结构。本实用新型使用方便，省去准备时间，洗涤液可以降低细菌污染率，采用细胞消化酶得到的细胞纯度高，收获细胞数更多增殖更快，一般7天即可完成原代细胞培养。
【专利说明】
用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒
技术领域
[0001]本实用新型涉及一种分离间充质干细胞的试剂盒，尤其是一种用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒。
【背景技术】
[0002]吸脂(Liposuct1n)，为医书中的抽取脂肪，吸脂手术是利用器械通过皮肤小切口伸入皮下脂肪层将脂肪碎块吸出以达到吸收脂肪的目，适用于体态整形。
[0003]吸脂手术属于外科体形雕塑手术中的一种，原理是通过负压吸引的方法把身体某一部位多余的脂肪给吸出来，以达到局部迅速瘦体的目的。全身吸脂的常见部位有:面部、双下巴、颈部、肩背、四肢、手脚、上下腹部、侧腰、上臀、臀部缩小及提臀等。
[0004]传统的吸脂美容已经越来越普遍，脂肪乳糜是抽脂术废弃物。但是目前越来越多的研究将脂肪分离间充质干细胞用于临床研究。传统的脂肪乳糜中的间充质干细胞分离方法已经比较成熟，但是分离过程所用试剂需要前期配制和准备工作，而且过程比较复杂，所需要的试剂耗材较多，分离耗时较长且原代生长缓慢，处理过程易污染。
【实用新型内容】
[0005]本实用新型所要解决的技术问题是，提供一种提高分离速度，并且缩短分离前期试剂配制和准备工作所耗时间，明显降低标本污染率的用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒。
[0006]为了解决上述技术问题，本实用新型采用的技术方案是:一种用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒，包括盒盖和盒体，在盒盖内侧设置有用于放置一次性器械耗材的收纳袋，盒体内水平设置有隔板，隔板上设置有3个独立的插孔，放置洗涤液的250mL洗涤瓶、放置消化酶的30mL消化酶瓶和放置原代细胞培养基的250mL培养基瓶分别插在3个独立的插孔中，一次性器械耗材的收纳袋分为两个区域，一个区域中装有一次性无菌镊子2把、一次性无菌平皿I个、一次性无菌10um细胞筛网I个，另一区域装有一次性50mL无菌离心管2个、一次性250mL无菌离心管2个、一次性1ml无菌刻度吸管5支。
[0007]所述盒盖和盒体的一侧铰接形成翻盖结构。
[0008]本实用新型的有益效果是:使用方便，省去准备时间，洗涤液可以降低细菌污染率，采用细胞消化酶得到的细胞纯度高，收获细胞数更多增殖更快，一般7天即可完成原代细胞培养。传代后，一般2-3天细胞密度即可达到80%，为利用脂肪乳糜中的间充质干细胞进行进一步科学研究提供了丰富的来源。
【附图说明】
[0009]图1是本实用新型的用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒的结构示意图。
【具体实施方式】
[0010]下面结合附图和【具体实施方式】对本实用新型作进一步详细说明:
[0011]如图1所述，本实用新型的用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒，包括盒盖I和盒体2，在盒盖内侧设置有用于放置一次性器械耗材的收纳袋3，盒体2内水平设置有隔板7，隔板7上设置有3个独立的插孔，放置洗涤液的250mL洗涤瓶4、放置消化酶的30mL消化酶瓶5和放置原代细胞培养基的250mL培养基瓶6分别插在3个独立的插孔中，一次性器械耗材的收纳袋3分为两个区域，一个区域中装有一次性无菌镊子2把、一次性无菌平皿I个、一次性无菌10um细胞筛网I个，另一区域装有一次性50mL无菌离心管2个、一次性250mL无菌离心管2个、一次性1ml无菌刻度吸管5支。
[0012]所述盒盖I和盒体2的一侧铰接形成翻盖结构。
[0013]本实用新型彻底解决使用者洗刷器械后的内毒素残留问题，提供洗涤液、消化酶和培养基提高脂肪乳糜分离速度，并且缩短分离前期配液和洗刷器械所耗时间，预防标本污染。
[0014]所述250ml洗涤液含有120U/mL青霉素、120U/mL链霉素、50mg/mL溶菌酶的生理盐水溶液。
[0015]消化酶30mL为质量/体积百分比浓度为0.5 %的IV型胶原酶和10A的I型胶原酶溶液。
[0016]250mL原代细胞培养基，为含有80ng/mL EGF、80ng/mL bFGF和50ng/mLaFGF、体积分数为1 %胎牛血清的AMEM溶液。
[0017]本实用新型进行脂肪乳糜间充质干细胞快速分离的步骤如下:
[0018]步骤一:打开50ml—次性无菌离心管和一次性无菌镊子。
[0019]步骤二:打开一次性滤网，用一次性1mL刻度吸管将乳糜吸出过滤，将留下的脂肪组织放入50mL离心管。
[0020]步骤三:打开洗涤液，加入至一次性50mL离心管中，大约45mL。
[0021 ]步骤四:用一次性无菌镊子将脂肪乳糜固体组织放入步骤三中的装有洗涤液的离心管中反复颠倒洗涤。洗涤后1200r/min，5min离心，用一次性1mL无菌刻度吸管吸弃上清液，重复洗涤二次。
[0022]步骤五:将消化酶取出，将组织放入50mL离心杯中，按照每克期待组织ImL消化酶的比例，加入消化酶后，放入摇床中37 °C，140r/miη消化20?30miη。
[0023]步骤六:取出一次性细胞筛网，再将洗涤液取出，消化后，向离心管中加入40mL洗涤液洗涤后经过一次性细胞筛网过滤，将固体过滤后，将细胞悬液1200r/min，5min离心，重复离心操作一次。
[0024]步骤七:培养基取出，加入离心后沉淀物中，充分混匀后加入培养瓶中。待24小时后换液。
[0025]综上所述，本实用新型的内容并不局限在上述的实施例中，相同领域内的有识之士可以在本实用新型的技术指导思想之内可以轻易提出其他的实施例，但这种实施例都包括在本实用新型的范围之内。
【主权项】
1.一种用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒，包括盒盖(I)和盒体(2)，其特征在于，在盒盖(I)内侧设置有用于放置一次性器械耗材的收纳袋(3)，盒体(2)内水平设置有隔板(7)，隔板(7)上设置有3个独立的插孔，放置洗涤液的250mL洗涤瓶(4)、放置消化酶的30mL消化酶瓶(5)和放置原代细胞培养基的250mL培养基瓶(6)分别插在3个独立的插孔中，一次性器械耗材的收纳袋(3)分为两个区域，一个区域中装有一次性无菌镊子2把、一次性无菌平皿I个、一次性无菌10um细胞筛网I个，另一区域装有一次性50mL无菌离心管2个、一次性250mL无菌离心管2个、一次性1ml无菌刻度吸管5支。2.根据权利要求1所述的用于从脂肪乳糜中快速分离间充质干细胞的试剂盒，其特征在于，所述盒盖(I)和盒体(2)的一侧铰接形成翻盖结构。
【文档编号】C12M1/12GK205653447SQ201620391385
【公开日】2016年10月19日
【申请日】2016年5月3日 公开号201620391385.3, CN 201620391385, CN 205653447 U, CN 205653447U, CN-U-205653447, CN201620391385, CN201620391385.3, CN205653447 U, CN205653447U
【发明人】刘俊江, 鲁振宇, 韩洪起, 张冰晶, 秦臻, 徐悦
【申请人】天津普瑞赛尔生物科技有限公司