一种免疫共沉淀试剂盒的制作方法

本实用新型涉及生物技术领域，具体涉及一种不存在抗体信号干扰目的蛋白信号的免疫共沉淀试剂盒。

背景技术：

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是基于抗体和抗原之间结合的专一性用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定蛋白质是否在生理条件下有相互作用的有效方法。

然而，传统的由于免疫沉淀实验使用目的蛋白抗体加Protein A/G-琼脂糖珠/磁珠与样品孵育，因此在最后离心获得抗体-琼脂糖珠/磁珠复合物后，离心管中主要含有抗体、目的蛋白、Protein A/G-琼脂糖珠/磁珠以及一些其它非特异性作用蛋白。其中，抗体和目的蛋白以及Protein A/G-琼脂糖珠/磁珠三者之间是以非共价健结合在一起，只有Protein A/G与琼脂糖珠/磁珠是共价结合在一起的。因此，最后经过添加含巯基乙醇的加样缓冲液以及煮沸变性并离心出去 Protein A/G-琼脂糖珠/磁珠后，离心管含有抗体和目的蛋白以及少量非特异性吸附蛋白。这样SDS-PAGE中就至少含有目的蛋白和抗体二种蛋白，由于加样缓冲液中含有巯基乙醇和高温从而导致抗体的重链与轻链之间的二硫键被破坏从而使得抗体分子变成重链分子(55KD)和轻链分子(25KD)。因此，WB显色反应中除了能检测到目的蛋白外，如果所使用的二抗与用于免疫沉淀实验的抗体分子属于同一种属的话，还能检测到重链和轻链分子。通常用于免疫沉淀的抗体量非常大(1ug)，所以当目的蛋白的大小接近重链或者轻链分子时，重链或者轻链分子的WB信号常常由于信号过强而导致影响对目的蛋白的WB结果的判断。

由此可见，传统的Co-IP方法存在抗体信号干扰目的蛋白信号的缺点，虽然可以通过选择不同种属的抗体分别进行免疫沉淀实验和WB实验，然后再选择一个种属交叉反应比较弱或者无种属交叉反应的二抗进行WB实验，减弱重链和轻链分子的WB信号，但会大大增加实验成本和实验设计复杂性。

技术实现要素：

为了解决现有技术存在的问题，本实用新型提供了一种免疫共沉淀试剂盒；包括盒盖、海绵垫和盒体，海绵垫设有试剂瓶和EP管，所述试剂瓶和EP管分别装有PBS、Wash Buffer I、Wash BufferⅡ、Cell lysis buffer、Protease Inhibitor、 Protein A/G-agarose beads、IgG、Cross-linking agent和Elution buffer，使用本实用新型，能够方便的进行免疫共沉淀试验，免除抗体信号干扰。

本实用新型的目的是提供一种排除抗体信号干扰目的蛋白信号的免疫共沉淀试剂盒，包括盒盖、海绵垫和盒体，所述盒体设有容纳腔，所述海绵垫置于所述容纳腔内；所述海绵垫设有容器孔，所述容器孔内分别设有第一试剂瓶、第二试剂瓶和EP管；所述第一试剂瓶包括PBS试剂瓶、Wash Buffer I试剂瓶和Wash BufferⅡ试剂瓶；所述第二试剂瓶包括Cell lysis buffer试剂瓶；所述EP 管包括Protease Inhibitor EP管、Protein A/G-agarose beads EP管、IgG EP管、 Cross-linking agent EP管和Elution buffer EP管。

优选地，所述第一试剂瓶包括装有60ml PBS的试剂瓶、装有 150ml Wash Buffer I的试剂瓶和装有150ml Wash BufferⅡ的试剂瓶；所述第二试剂瓶包括装有25ml Cell lysis buffer的试剂瓶；所述EP管包括装有 420μl Protease Inhibitor的EP管、装有1.05ml Protein A/G-agarose beads的EP 管、装有10μl IgG的EP管、装有108μl Cross-linking agent(50mM)的EP管和装有1.2ml Elution buffer的EP管。

为了使海绵垫安装更加平稳，优选的技术方案是，所述容纳腔的形状与所述海绵垫的外围形状相配合。

优选地，所述海绵垫为黑色。

为了使试剂瓶和EP管安装更加平稳，优选的技术方案是，所述容器孔包括第一容器孔、第二容器孔和第三容器孔，所述第一容器孔、所述第二容器孔和所述第三容器孔的形状分别与所述第一试剂瓶、所述第二试剂瓶和所述EP 管的形状相配合。

优选地，所述第一试剂瓶、所述第二试剂瓶和所述EP管均为白色。

为了实验操作方便快捷，优选的技术方案是，所述第一容器孔、所述第二容器孔和所述第三容器孔旁均标有编号，所述第一试剂瓶、所述第二试剂瓶和所述EP管上均设有标写相同编号的编号牌。

所述编号牌上标有相对应的名称及规格。

为了合理的容纳溶液，优选的技术方案是，所述第一试剂瓶为200ml试剂瓶，所述第二试剂瓶为50ml试剂瓶，所述EP管为2ml EP管。

为了盒盖能够关闭和开启，优选的技术方案是，所述盒盖盖合在所述盒体上；所述盒盖的底面上设有锁舌，所述盒体的底板上对应所述锁舌的位置设有安装孔，所述安装孔内设置有锁止装置，所述锁止装置能够与所述锁舌卡接相连，所述锁止装置的数量为两个以上。

所述盒盖包覆在所述盒体上，以增加密封性。

为了锁止装置能够实现锁止功能，优选的技术方案是，所述锁止装置包括锁扣和第一弹簧，所述第一弹簧置于所述安装孔内，且所述第一弹簧的两端始终与所述盒体和所述锁扣相抵；所述锁扣包括两个第一弹性卡爪和锁止键，两个所述第一弹性卡爪闭合能够形成空腔，所述锁舌能够置于所述空腔内，所述第一弹性卡爪在所述盒盖打开时置于所述安装孔外；所述盒体的底板侧面上设有锁止槽，所述锁止槽与所述安装孔垂直连通，所述锁止键能够卡接在所述锁止槽内。

为了限制第一弹性卡爪的相对位置，完善锁止功能，优选的技术方案是，所述锁扣还包括限位块，所述第一弹性卡爪相对设置在所述限位块的两个侧面上，所述安装孔孔口的位置设有挡檐，所述限位块顶面能够与所述挡檐的底面相抵。

为了使盒盖在关闭时更加紧固，优选的技术方案是，所述锁止装置还包括第二弹簧和锁止球，所述盒体设有开孔，所述开孔与所述安装孔相连通，所述第二弹簧置于所述开孔内；所述限位块相对的侧面设有定位孔，所述锁止球的一端与所述弹簧相连，且另一端能够置于所述定位孔内；所述第二弹簧始终处于压缩状态。

优选地，所述锁止键与所述定位孔相对设置在所述限位块的侧面上。

为了使锁止球的相对滑动更加平稳，优选的技术方案是，所述限位块的侧面上竖直设有导槽，所述导槽与所述定位孔垂直连通，所述导槽的深度小于所述定位孔的深度，所述锁止球能够在所述导槽内滑动。

所述导槽的长度大于所述盒盖打开时所述锁止键至所述锁止槽的距离。

本实用新型的有益效果为：

1、本实用新型提供一种免疫共沉淀试剂盒；包括盒盖、海绵垫和盒体，海绵垫设有试剂瓶和EP管，所述试剂瓶和EP管分别装有PBS、Wash Buffer I、 Wash BufferⅡ、Cell lysis buffer、Protease Inhibitor、Protein A/G-agarose beads、 IgG、Cross-linking agent和Elution buffer，使用本实用新型，能够方便的进行免疫共沉淀试验，免除抗体信号干扰。

2、容器孔的形状与试剂瓶和EP管的形状相配合，使试剂瓶和EP管固定平稳；容纳腔的形状与海绵垫的外围形状相配合，使海绵垫固定平稳，从而进一步使试剂瓶和EP管固定更加平稳。

3、容器孔和放置在对应容器孔内的试剂瓶和EP管上标有相同编号，使实验操作更加方便快捷。

4、盒盖上设有锁舌，盒体的底板上设有锁止装置，按压盒盖能够关闭并锁紧盒盖，按压锁止键能够打开盒盖，结构简单，操作便捷。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本实用新型结构示意图；

图2是本实用新型中盒盖的结构示意图；

图3是本实用新型中试剂瓶、EP管和海绵垫的装配图；

图4是本实用新型中盒体的结构示意图；

图5是本实用新型中锁止装置的爆炸图；

图6是本质用新型中锁扣的结构示意图。

附图标记

1-盒盖；11-锁舌；2-海绵垫；21-第一容器孔；22-第二容器孔；23-第三容器孔；3-盒体；31-锁止装置；311-锁扣；3111-第一弹性卡爪；3112-锁止键；3113- 限位块；3114-定位孔；3115-导槽；312-第一弹簧；313-锁止球；314-第二弹簧； 32-锁止槽；33-安装孔；331-挡檐；4-第一试剂瓶；5-第二试剂瓶；6-EP管。

具体实施方式

为使本实用新型的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本实用新型的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本实用新型所保护的范围。

如图1、图2和图3所示，一种免疫共沉淀试剂盒，包括盒盖1、海绵垫2 和盒体3，所述盒体3设有容纳腔，所述海绵垫2置于所述容纳腔内；所述海绵垫2设有容器孔，所述容器孔内分别设有第一试剂瓶4、第二试剂瓶5和EP管 6；所述第一试剂瓶4包括PBS试剂瓶、Wash Buffer I试剂瓶和Wash BufferⅡ试剂瓶；所述第二试剂瓶5包括Cell lysis buffer试剂瓶；所述EP管6包括 Protease InhibitorEP管、Protein A/G-agarose beads EP管、IgG EP管、 Cross-linking agent(50mM)EP管和Elution buffer EP管。

所述容纳腔的形状与所述海绵垫2的外围形状相配合。

所述容器孔包括第一容器孔21、第二容器孔22和第三容器孔23，所述第一容器孔21、所述第二容器孔22和所述第三容器孔23的形状分别与所述第一试剂瓶4、所述第二试剂瓶5和所述EP管6的形状相配合。

所述第一容器孔21、所述第二容器孔22和所述第三容器孔23旁均标有编号，且分别置于其内的所述第一试剂瓶4、所述第二试剂瓶5和所述EP管6上标有相同的编号。

所述第一试剂瓶4、所述第二试剂瓶5和所述EP管6的管壁外侧上标有与其相对应的名称及规格。

所述第一试剂瓶4为200ml试剂瓶，所述第二试剂瓶5为50ml试剂瓶，所述EP管6为2ml EP管。

如图4和图5所示，所述盒盖1盖合在所述盒体3上；所述盒盖1的底面上设有锁舌11，所述盒体3的底板上对应所述锁舌11的位置设有安装孔33，所述安装孔33内设置有锁止装置31，所述锁止装置31能够与所述锁舌11卡接相连，所述锁止装置31的数量为两个以上。

所述盒盖1包覆在所述盒体3上。

所述锁止装置31包括锁扣311和第一弹簧312，所述第一弹簧312置于所述安装孔33内，且所述第一弹簧312的两端始终与所述盒体3和所述锁扣311 相抵；所述锁扣311包括两个第一弹性卡爪3111和锁止键3112，两个所述第一弹性卡爪3111闭合能够形成空腔，所述锁舌11能够置于所述空腔内，所述第一弹性卡爪3111在所述盒盖1打开时置于所述安装孔33外；所述盒体3的底板侧面上设有锁止槽32，所述锁止槽32与所述安装孔33垂直连通，所述锁止键3112能够卡接在所述锁止槽32内。

所述锁扣311还包括限位块3113，所述第一弹性卡爪3111相对设置在所述限位块3113的两个侧面上，所述安装孔33孔口的位置设有挡檐331，所述限位块3113顶面能够与所述挡檐331的底面相抵。

所述锁止装置31还包括第二弹簧314和锁止球313，所述盒体3设有开孔，所述开孔与所述安装孔33相连通，所述第二弹簧314置于所述开孔内；所述限位块3113相对的侧面设有定位孔3114，所述锁止球313的一端与所述弹簧314 相连，另一端能够置于所述定位孔3114内；所述第二弹簧314始终处于压缩状态。

所述锁止键3112与所述定位孔3114相对设置在所述限位块3113的侧面上。

所述限位块3113的侧面上竖直设有导槽3115，所述导槽3115与所述定位孔3114垂直连通，所述导槽3115的深度小于所述定位孔3114的深度，所述锁止球313能够在所述导槽3115内滑动。

所述导槽3115的长度大于所述盒盖3打开时所述锁止键3112至所述锁止槽32的距离。

工作原理：

关闭盒盖3时，按压盒盖3，锁舌11推动第一弹性卡爪3111，第一弹性卡爪3111形成空腔，锁舌11置于空腔内一同向下滑动，锁止键3112向下滑动，锁止球3113相对于所述锁舌11向上滑动，锁止键3112滑动至锁止槽32并与锁止槽32卡接时，锁止球313置于安装孔3114内，并顶紧锁扣311，盒盖3 关闭；开启盒盖3时，按压锁止键3112并脱离锁止槽32，锁止球313滑动至导槽3115内，第一弹簧312顶紧锁扣311，并推动锁扣311向上滑动，限位块 3113的顶面与挡檐331相抵，第一弹性卡爪3111释放锁舌11，取下盒盖3，完成盒盖3的开启。

以上所述，仅为本实用新型的具体实施方式，但本实用新型的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本实用新型揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本实用新型的保护范围之内。因此，本实用新型的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。