专利名称：一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种检测试纸条的制备方法，尤其是涉及一种高灵敏度盐酸克伦特罗 检测试纸条的制备方法。
背景技术：
克伦特罗(Clenbuterol，CL)，又名双氯醇胺，是一种β 2受体激动剂，可有效地提 高动物的产肉性能和饲料报酬。但对人与动物的肝、肾等内脏器官有毒副作用，严重时会引 起死亡。农业部明确规定，克伦特罗等一类β 2受体激动剂被禁止作为饲料添加剂使用。酶 联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbant assay, ELISA)是目前定量检测CL的常 用方法，适合试验室操作，不便于现场(如养殖场、饲料加工厂、屠宰场、猪肉的销售市场) 的检测。胶体金试纸条比较适合现场的定性检测。目前市场上用的胶体金试纸条检测灵敏 度较差，常常出现现场漏检情况。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种检测灵敏度高、 使用简便的高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法。本发明的目的可以通过以下技术方案来实现一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法，其特征在于，该方法包括以 下步骤(1)用微量枪头将胶体金-盐酸克伦特罗单克隆抗体均勻涂布在玻璃纤维上，然 后在20-25 °C真空抽干；(2)将盐酸克伦特罗抗原及羊抗鼠IgG抗体均勻喷涂在硝酸纤维膜上作为检测线 及质控线，硝酸纤维膜置于37°C干燥2- ；(3)将硝酸纤维膜切成宽度为5_6mm的条带，置于干燥环境备用；(4)将玻璃纤维、金标记盐酸克伦特罗单抗玻璃纤维、已固化盐酸克伦特罗抗原及 羊抗鼠IgG抗体的硝酸纤维膜及硬质吸水滤纸自下而上排列并粘附于单面胶PVC板的一 侧，再将已经装配好PVC板纵向切成测试纸条即可。所述步骤(2)中的硝酸纤维膜大小为80mmX300mm。所述步骤O)中检测线设在质控线的下方。所述步骤(4)中的检测试纸条大小为5mmX80mm。与现有技术相比，本发明制备的检测试纸条检测灵敏度高，最小检测量为lppb，并 且制备方法简便。
图1为实施例1中的装配示意图；图2为实施例1中检测试纸条的示意图。
图中1为玻璃纤维、2为金标记盐酸克伦特罗单抗玻璃纤维、3为硝酸纤维膜、31为 检测线、32为质控线、4为硬质吸水滤纸、5为单面胶PVC板。
具体实施例方式下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。实施例1一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法，该方法包括以下步骤(1)用微量枪头将胶体金-盐酸克伦特罗单克隆抗体均勻涂布在大小为 80mmX 300mm的玻璃纤维2上，然后在20°C室温下真空抽干，该玻璃纤维购自上海金标生物 科技有限公司，为SB06玻璃纤维；(2)将盐酸克伦特罗抗原及羊抗鼠IgG抗体均勻喷涂在大小为SOmmX 300mm硝酸 纤维膜3上作为检测线31及质控线32，检测线31设在质控线32的下方，然后将硝酸纤维 膜3置于37°C干燥2h ；(3)用裁纸刀将硝酸纤维膜3切成宽度为5_6mm的条带，置于干燥环境备用；(4)将玻璃纤维1、金标记盐酸克伦特罗单抗玻璃纤维2、已固化盐酸克伦特罗 抗原及羊抗鼠IgG抗体的硝酸纤维膜3及硬质吸水滤纸4自下而上排列，如图1所示，然 后将其粘附于单面胶PVC板5的一侧，再用切条机将已经装配好PVC板纵向切成大小为 5mmX80mm检测试纸条即可，如图2所示。装配好的检测试纸条在检测时质控线32变红，说明试纸条质量合格，如果检测时 检测线31变色，表明待检样品中盐酸克伦特罗(CL)，如果检测时检测线31不变色，表明待 检样品中含有CL。实施例2一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法，该方法包括以下步骤(1)用微量枪头将胶体金-CL单克隆抗体均勻涂布在玻璃纤维上，然后在25°C室 温下真空抽干；(2)将盐酸克伦特罗抗原及羊抗鼠IgG抗体均勻喷涂在大小为SOmmX 300mm硝酸 纤维膜上作为检测线及质控线，检测线设在质控线的下方，然后将硝酸纤维膜置于37°C干 燥3h ；(3)将硝酸纤维膜切成5_6mm的条带，置于干燥环境备用；(4)将玻璃纤维、金标记盐酸克伦特罗单抗玻璃纤维、已固化好的盐酸克伦特罗抗 原及羊抗鼠IgG抗体的硝酸纤维膜及硬质吸水滤纸自下而上排列，然后将其粘附于单面胶 PVC板的一侧，再将已经装配好PVC板纵向切成大小为5mmX80mm检测试纸条即可。装配好的检测试纸条在检测时质控线变红，说明试纸条质量合格，如果检测时检 测线变色，表明待检样品中盐酸克伦特罗(CL)，如果检测时检测线不变色，表明待检样品中 含有CL。
权利要求
1.一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法，其特征在于，该方法包括以下 步骤(1)用微量枪头将胶体金-盐酸克伦特罗单克隆抗体均勻涂布在玻璃纤维上，然后在 20-25 °C真空抽干；(2)将盐酸克伦特罗抗原及羊抗鼠IgG抗体均勻喷涂在硝酸纤维膜上作为检测线及质 控线，硝酸纤维膜置于37°C干燥2- ；(3)将硝酸纤维膜切成宽度为5-6mm的条带，置于干燥环境备用；(4)将玻璃纤维、金标记盐酸克伦特罗单抗玻璃纤维、已固化盐酸克伦特罗抗原及羊抗 鼠IgG抗体的硝酸纤维膜及硬质吸水滤纸自下而上排列并粘附于单面胶PVC板的一侧，再 将已经装配好PVC板纵向切成测试纸条即可。
2.根据权利要求1所述的一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法，其特征 在于，所述步骤O)中的硝酸纤维膜大小为80mmX300mm。
3.根据权利要求1所述的一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法，其特征 在于，所述步骤O)中检测线设在质控线的下方。
4.根据权利要求1所述的一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法，其特征 在于，所述步骤⑷中的检测试纸条大小为5mmX80mm。
全文摘要
本发明涉及一种高灵敏度盐酸克伦特罗检测试纸条的制备方法，将胶体金-盐酸克伦特罗单克隆抗体均匀涂布在玻璃纤维上，将盐酸克伦特罗抗原及羊抗鼠IgG抗体均匀喷涂在硝酸纤维膜上作为检测线及质控线，然后将玻璃纤维、金标记盐酸克伦特罗单抗玻璃纤维、硝酸纤维膜及硬质吸水滤纸自下而上排列并粘附于单面胶PVC板侧并纵向切成纸条即可。与现有技术相比，本发明制备的检测试纸条检测灵敏度高，最小检测量为1ppb，制备方法简便。
文档编号G01N33/577GK102109524SQ20091020066
公开日2011年6月29日 申请日期2009年12月24日 优先权日2009年12月24日
发明者卢永红, 吕玉华, 夏东, 孙国荣, 杭怡琼, 涂尾龙, 薛惠琴 申请人:上海市农业科学院