专利名称：用气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法
技术领域：
本发明涉及一种气相色谱的检测方法，尤其是涉及有机溶剂残留的检测方法，具 体为用气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法。
背景技术：
药品中的残留溶剂是指在原料药、制剂生产中所使用却没有完全除去的有机溶 剂。如果药品中含有的残留有机溶剂浓度高于安全值，患者服用后会对人体产生危害。人 用药物注册技术要求国际协调会(ICH)的指导原则中，将药品生产中常用的溶剂按照危害 程度分为四类，并规定了每种溶剂的限值。我国2005版药典也适用该指导原则，对丙酮和 乙酸乙酯的限度要求分别为不高于0.5%。但是，对于有机溶剂残留的检测方法，我国2005版药典中只有指导方法并没有具 体的检测方法。此外，由于有机溶剂的种类多样，而且每种药物在合成过程中使用的种类和 数量有所不同。这就导致了针对于不同的有机溶剂种类和数量，选择不同的色谱柱和不同 的测定方法，会产生多种多样的色谱条件。目前的文献资料报道的药品食品的有机溶剂残留的检测方法，均为适用于检测含 有3种以上有机溶剂的检测。但是，例如，羧苄西林钠药物在合成过程中只使用了丙酮、乙酸乙酯这两种有机溶 剂。此外，万古霉素、红霉素、庆大霉素等抗生素药物，为生物发酵产物，其提炼工艺中所用 溶剂也只使用了丙酮、乙酸乙酯这两种有机溶剂。而针对于这些生产中只使用丙酮和乙酸 乙酯作为溶剂的药物，并没有专门的溶剂残留的检测方法。因此，对于这些药物的有机溶剂残留，急需一种快速有效的分析方法用以准确检 测出其中的有机溶剂含量，控制产品的质量，减少对人体的危害。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，针对以往没有专门针对丙酮和乙酸乙酯残留物检 测方法的问题，提供一种能够简便、快速、准确的检测药物中残留的有机溶剂含量的气相色 谱分析方法。本发明通过下列技术方案解决上述技术问题一种用气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法，其步骤具体为(一 )系统适用性实验取丙酮标准溶液、乙酸乙酯标准溶液和混合标准溶液，分 别进样，绘制图谱；(二)线性关系考察实验分别取丙酮标准溶液和乙酸乙酯标准溶液，加入纯水制 成系列标准对照品溶液，进样，以对照品峰面积为纵坐标，对照品浓度为横坐标建立线性回 归线；(三)定量限的测定实验分别取丙酮标准溶液和乙酸乙酯标准溶液，加入纯水稀 释，进样测定，以信噪比为IOdB计算丙酮和乙酸乙酯的定量限；[oo13] (四)回收率实验精密称取样品，分别加入丙酮标准溶液和乙酸乙酯标准溶液，进样，计算丙酮1乙酸乙酯的平均回收率和相对标准误差；[oo14] (五)样品的测定取样品溶液进样，再取对照品溶液作为外标进样，计算得到样品中丙酮1乙酸乙酯的含量；[oo15] 其中，上述操作在下列色谱条件下进行[oo16] 色谱柱6％一氰丙基苯基一94％一二甲基硅氧烷共聚物毛细管柱[oo17] 检测器氢火焰离子化检测器([工D)[oo18] 进样口温度140—160℃[oo19] 检测器温度230—270℃
柱温40一50℃
载气高纯氮气
溶剂水。
上述技术方案基础上，所述的进样口温度为145一150℃。
上述技术方案基础上，所述的检测器温度为245—250℃。
上述技术方案基础上，所述的柱温为42—45℃。
一种气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法的用途，该方法用于同时检测羧苄西林钠1红霉素或庆大霉素中的丙酮和乙酸乙酯残留物。
本发明的优点在于，一1采用气相色谱法检测同时检测乙酸乙酯和丙酮含量，灵敏度高，重复性好，精确度高；二1本发明的色谱条件中没有使用程序升温，选择水作为溶剂，并采用直接进样的方法，处理简单，操作方便，大大提高了检测速度。三1本发明方法适合水溶性药物中乙酸乙酯和丙酮残留的检测，尤其适合于生产过程中只使用乙酸乙酯1丙酮作为溶剂的羧苄西林钠1红霉素1庆大霉素等药物中二者的检测。
图l为丙酮系统适应性实验气相色谱图
图2为乙酸乙酯系统适应性实验气相色谱图
图3为丙酮和乙酸乙酯系统适应性实验气相色谱图
图4为丙酮检测限实验气相色谱图
图5为乙酸乙酯检测限实验气相色谱图
图6为丙酮线性实验气相色谱图l
图7为丙酮线性实验气相色谱图2
图8为丙酮线性实验气相色谱图3
图9为丙酮线性实验气相色谱图4
图lo为丙酮线性实验气相色谱图5
图11为丙酮线性实验气相色谱图6
图12为乙酸乙酯线性实验气相色谱图li-0040-I 图13为乙酸乙酯线性实验气相色谱图2i-0041] 图14为乙酸乙酯线性实验气相色谱图3i-0042] 图15为乙酸乙酯线性实验气相色谱图4
图16为乙酸乙酯线性实验气相色谱图5图17为乙酸乙酯线性实验气相色谱图6图18为羧苄西林钠样品残留溶剂测定实验气相色谱19为万古霉素样品残留溶剂测定实验气相色谱20为庆大霉素样品残留溶剂测定实验气相色谱图
具体实施例方式实施例11、仪器与试药Aglent6890气相色谱仪；所用试剂均为色谱纯；羧苄西林钠原料药(批号试 0803001,由上海新先锋药业有限公司提供)。2、色谱条件色谱柱6% -氰丙基苯基-94% -二甲基硅氧烷共聚物毛细管柱；检测器氢火焰 离子化检测器(FID)；进样口温度为150°C ；检测器温度为250°C ；柱温45°C ；高纯N2为载 气；以水为溶剂；进样量luL。3、溶液配制1)精密称取0. 0500g丙酮对照品、0. 0500g乙酸乙酯对照品，各自以纯水溶解并定 容于IOOml容量瓶中，分别制备成0. 500mg/ml丙酮、0. 500mg/ml乙酸乙酯标准溶液；2)精密称取0. 0500g丙酮对照品和0. 0500g乙酸乙酯对照品，以纯水溶解并定容 于IOOml容量瓶中，制成含有0. 500mg/ml丙酮、0. 500mg/ml乙酸乙酯的混合标准溶液；3)精密称量样品0. 4000g,以纯水溶解并定容于IOml容量瓶中，制成样品溶液；4、系统适用性实验(浓度)取丙酮对照品溶液、乙酸乙酯对照品溶液和混合标准 溶液，分别进样，绘制图谱。在上述色谱条件下两组份可以得到较好的分离，丙酮、乙酸乙酯 的保留时间分别为2. lmin、2. 9min，理论板数均大于5000。二者的分离度大于1. 5，符合中 国药典2005年版的规定。5、线性关系考察实验取丙酮对照品溶液、乙酸乙酯对照品溶液，依次做倍比稀释 制备成系列标准对照品溶液。丙酮和乙酸乙酯各6个浓度，连续进样2次。以对照品峰面积为纵坐标，对照品浓 度为横坐标建立线性回归线。丙酮的回归方程为y = 191. 5χ-3. 5306，相关系数为0. 9999，线性范围为 0. 01422-0. 4550mg/ml。乙酸乙酯的回归方程为y = 848. 87χ_6· 3536，相关系数0. 9991，线 性范围为 0. 01469-0. 4700mg/ml。6、定量限的测定实验分别取丙酮标准溶液和乙酸乙酯标准溶液，加入纯水稀释 至0. 001mg/ml和0. 00ang/ml，进样测定，以S/N = IOdB计算丙酮和乙酸乙酯的定量限。在 上述色谱条件下丙酮、乙酸乙酯的定量限分别为^g、5ng ；7、回收率实验精密称取样品0. 4000g,纯水溶解并定溶于IOml容量瓶，作为样品 液；精密称取丙酮0. 0500g、乙酸乙酯0. 0500g各自溶解于IOOml水溶液中，作为储备液备用。分别取对照品溶液、样品溶液进样两次。精密称取样品0.4000g，分别加入丙酮、
5乙酸乙酯储备液0. 5ml、lml、aiil，作为低中高三个浓度的丙酮、乙酸乙酯溶液，连续进样 3次。丙酮的平均加样回收率为94. 88%，RSD = 5.29% ；乙酸乙酯的平均加样回收率为 93. 54%,RSD = 7.67%。两种有机溶剂的平均回收率在90-110%之间，RSD符合规定，故本 法回收率较好。表1、回收率实验结果
权利要求
1.一种用气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法，其步骤具体为(一)系统适用性实验取丙酮标准溶液、乙酸乙酯标准溶液和混合标准溶液，分别进 样，绘制图谱；(二)线性关系考察实验分别取丙酮标准溶液和乙酸乙酯标准溶液，依次加入纯水做 倍比稀释制成系列标准对照品溶液，进样，以对照品峰面积为纵坐标，对照品浓度为横坐标 建立线性回归线；(三)定量限的测定实验分别取丙酮标准溶液和乙酸乙酯标准溶液，加入纯水稀释， 进样测定，以信噪比为IOdB计算丙酮和乙酸乙酯的定量限；(四)回收率实验精密称取样品，分别加入丙酮标准溶液和乙酸乙酯标准溶液，进样， 计算丙酮、乙酸乙酯的平均回收率和相对标准误差；(五)样品的测定取样品溶液进样，再取对照品溶液作为外标进样，计算得到样品中 丙酮、乙酸乙酯的含量；其中，上述操作在下列色谱条件下进行色谱柱6% -氰丙基苯基-94% -二甲基硅氧烷共聚物毛细管柱检测器氢火焰离子化检测器(FID)进样口温度140-160°C检测器温度230-270°C柱温40-50°C载气高纯氮气溶剂水。
2.根据权利要求1所述的气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法，其特 征在于，所述的进样口温度为145-150°C。
3.根据权利要求1所述的气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法，其特 征在于，所述的检测器温度为245-250°C。
4.根据权利要求1所述的气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法，其特 征在于，所述的柱温为42-45°C。
5.一种权利要求1所述的气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法的用 途，其特征在于，该方法用于同时检测羧苄西林钠、红霉素或庆大霉素中的丙酮和乙酸乙酯 残留物。
全文摘要
本发明公开一种用气相色谱同时检测药物中丙酮和乙酸乙酯残留的方法，其步骤为(一)系统适用性实验；(二)线性关系考察实验；(三)定量限的测定实验，定量限；(四)回收率实验，计算丙酮、乙酸乙酯的平均回收率和相对标准误差；(五)样品的测定，计算得到样品中丙酮、乙酸乙酯的含量；其中，上述操作条件是色谱柱6％-氰丙基苯基-94％-二甲基硅氧烷共聚物毛细管柱，检测器氢火焰离子化检测器(FID)进样口温度140-160℃，检测器温度230-270℃，柱温40-50℃载气高纯氮气，溶剂水。优点是灵敏度高、重复性好、精确度高，采用直接进样的方法，处理简单、操作方便，大大提高了检测速度。
文档编号G01N30/06GK102109499SQ20091020058
公开日2011年6月29日 申请日期2009年12月23日 优先权日2009年12月23日
发明者李晴, 胡旭华, 郑玉林, 陈张阳, 陈玉双 申请人:上海新亚药业有限公司, 上海新先锋药业有限公司