专利名称：一种丙烯酰胺快速检测卡的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种检测丙烯酰胺的器具，特别是涉及一种丙烯酰胺的快速检测卡。
背景技术：
2002年4月，瑞典斯德哥尔摩大学和瑞典国家食品管理研究人员率先报道，从油炸薯条、薯片，饼干等食品中检出了高浓度可疑致癌物-丙烯酰胺(acrylamide)，随后许多国家纷纷开始调查，都得到了与瑞典相似的结果。2005年2月，联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)联合食品添加剂专家委员会(JECFA)第64次会议根据近两年来的新资料，对食品中的丙烯酰胺进行了系统的危险性评估。丙烯酰胺是一种白色晶体样物质，相对分子质量为71. 08，室温下稳定，易溶于水，在乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂中易聚合和共聚.丙烯酰胺是生产聚丙烯酰胺的工业原料，并广泛用于染料、塑胶的合成以及用作建材和日用品中的增稠剂，而聚丙烯酰胺作为助凝剂用于污水和饮用水处理。食品中丙烯酰胺的污染与高温加工有关，研究表明面包、油炸薯条、土豆片等含淀粉碳水化合物高的食物，经120°C以上高温长时间烘烤、油炸，可检测出丙烯酰胺。动物实验证明丙烯酰胺具有神经、生殖、遗传毒性及潜在致癌性。基于其累积效应，长期暴露于低浓度的丙烯酰胺尤其是食源性摄入对机体存在潜在危害，目前，已在人体内检测到丙烯酰胺DNA加合物和蛋白质加合物。据我国调查发现，丙烯酰胺在薯类油炸食品中含量为0. 78-3. 21mg/kg,同时调查发现北京地区有67. 8%的居民丙烯酰胺摄入量超过了美国FDA的每日容许摄入量，且有明显的年龄差异，儿童丙烯酰胺的暴露水平是成人的2-3倍，因此食品中丙烯酰胺的危害应引起人们的广泛关注。本实用新型拟发明一种基于小分子物质丙烯酰胺偶联蛋白质后而具有抗原性的免疫学检测方法，采取免疫学竞争法的原理，结合胶体金(或乳胶颗粒)标记技术和免疫层析法设计的一种快速检测试剂，可快速特异地检测食品中的丙烯酰胺。反应是利用丙烯酰胺类似物的蛋白质偶联物抗原性而建立的一种检测方法，具有特异性强的优点，可避免其它检测方法的假阳性导致的误检问题。同时检测卡操作简单快速，无需特殊的仪器设备，适合现场操作。由于样本量需要少、简便快速，适用于大量样本的筛查。结果准确，灵敏度高，准确率大。
发明内容本实用新型的目的在于提供一种能检测食品中丙烯酰胺含量的检测器具，直接应用免疫学的方法检测食品中丙烯酰胺的含量，克服现有色谱法检测的操作繁琐等缺点，建立基于免疫学特异性的检测方法。本实用新型的技术方案一种丙烯酰胺快速检测卡，其为在长条扁平薄壳状的检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳表面有检测窗孔3和加样孔4 ；测试条2是由支承背板5上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫8、胶体金(或乳胶颗粒)膜7、硝酸纤维素膜6、和吸水膜9所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，支承背板一端叠置粘贴吸水膜9，另一端叠置粘贴样品垫8，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金(或乳胶颗粒)膜7 ；胶体金(或乳胶颗粒)膜为含抗丙烯酰胺抗体胶体金(或乳胶颗粒)标记的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是含N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺蛋白质偶联物的检测带10，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带11，测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。采用上述丙烯酰胺快速检测卡，检测食品中丙烯酰胺的含量，检测样品的处理方法如下A 若样品为溶液，可直接检测或简单过滤后检测B 若样品为固体，以1%的甲酸水溶液室温搅拌池后，取过滤液进行检测。当检测带10和质控带11同时显现棕红色印迹带，检测结果为阴性，表示被检测样品中丙烯酰胺含量未超标。当检测带10不显示颜色，只有质控带11显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表示被检测样品中丙烯酰胺含量超标。当检测带10和质控带11均不显色，则表明测试条已失效。本实用新型的有益效果本实用新型的优点是能检测食品中丙烯酰胺含量，易于制备且节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。
图1丙烯酰胺快速检测卡外壳及测试条在外壳内的安置图。1、外壳，2、测试条，3、检测窗孔，4、加样孔。图2测试条的硝酸纤维素膜上显示印迹示意图。6、硝酸纤维素膜，10、检测带，11、质控带。图3丙烯酰胺快速检测卡的测试条结构示意图。5、支承背板，6、硝酸纤维素膜，7、胶体金(或乳胶颗粒)膜，8、样品垫，9、吸水膜。
具体实施方式
本实用新型结合具体实施例参见附图进一步说明如下实施例1一种丙烯酰胺快速检测卡，它是在检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳1的结构及测试条2的设置参见附图1，检测卡外壳1为长条扁平薄壳状外壳，长70mm，宽20mm，厚5mm，薄壳壁厚1mm，由工程塑料制成。检测卡外壳1由壳盖与壳座两半联接构成，在检测卡外壳1壳盖上有检测窗孔3和加样孔4。测试条2放置在检测卡外壳1的壳座内。测试条2是多层结构的窄条薄片，片长约60mm，片宽约4mm，厚度约2. 5mm。测试条2是多层结构底层是支承背板5，为聚氯乙烯塑料薄片，厚约0. 5mm,长60mm，宽4mm ；支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，硝酸纤维素膜厚0. 5mm,长20_25mm，宽4mm。硝酸纤维素膜6上有二条间隔开的横向显示印迹带，参见附图2，二条显示印迹带中，一条是检测带10，含N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺的蛋白质偶联物；另一条是质控带11，含抗兔抗体或抗鼠抗体。支承背板5 —端部上叠置粘贴吸水膜9，支承背板5另一端部上叠置粘贴样品垫8，吸水膜9内端与样品垫8内端各自分别与硝酸纤维素膜6—端搭接，在样品垫8与硝酸纤维素膜6的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金(或乳胶颗粒)膜7，胶体金(或乳胶颗粒)膜7是含抗丙烯酰胺单克隆抗体胶体金(或乳胶颗粒)标记物的玻璃纤维膜。胶体金(或乳胶颗粒)膜7厚0. 5-0. 8匪，长5匪，宽4匪。样品垫8厚0. 5-0. 8匪，长20匪，宽4匪。吸水膜9厚0. 5-0. 8mm,长16_20mm，宽4mm。胶体金(或乳胶颗粒)膜7、样品垫8及吸水膜9与硝酸纤维素膜搭接长度为l_2mm。吸水膜9材料是吸水纸，样品垫8材料是吸水玻璃纤维膜。本实用新型丙烯酰胺检测卡用于食品中丙烯酰胺的检测。实施例2样品的处理方法如下A 若样品为溶液，可直接检测或简单过滤后检测B 若样品为固体，以1%的甲酸水溶液室温搅拌池后，取过滤液进行检测。使用丙烯酰胺快速检测卡进行检测时，先将待检测的样品液从加样孔4中滴注入丙烯酰胺快速检测卡的样品垫8上，由于虹吸作用原理，带动待检测的样品液及胶体金(或乳胶颗粒)膜7所含的抗丙烯酰胺单克隆抗体胶体金(或乳胶颗粒)标记物一起向硝酸纤维素膜6扩散，5-10分钟内观察结果。检测卡的主要反应是免疫学的抗原和抗体反应，在硝酸纤维素膜上迁移的胶体金(或乳胶颗粒)标记的抗体，在测试带上分别与含N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺的蛋白质偶联物，以及质控带抗兔抗体或抗鼠抗体反应，形成棕红色条带。若样品中有待检丙烯酰胺存在，当样品加入后即与抗体发生反应，而不会与检测带所含的N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺的蛋白质偶联物反应，从而不显色。主要反应的结果有以下3种情况1、当检测带10和质控带11同时显现棕红色印迹带，表示检测结果为阴性，说明被检测样品中丙烯酰胺含量未超标。2、当检测带10不显示颜色，只有质控带11显现棕红色印迹，检测结果为阳性，说明被检测样品中丙烯酰胺含量超标。3、当检测带10和质控带12均不显色，则表明检测试条已失效。
权利要求1. 一种丙烯酰胺快速检测卡，其特征在于在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔(4);测试条(2)是由支承背板(5) 上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫(8)、胶体金膜或乳胶颗粒膜(7)、硝酸纤维素膜(6)、 和吸水膜(9)所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜(6)，支承背板一端叠置粘贴吸水膜(9)，另一端叠置粘贴样品垫(8)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜或乳胶颗粒膜 (7)，硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是含N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺蛋白质偶联物的检测带(10)，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带(11)，测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。
专利摘要一种丙烯酰胺快速检测卡，属于丙烯酰胺检测技术领域。本实用新型丙烯酰胺快速检测卡外壳内有测试条，由支承背板上依次粘贴样品垫、胶体金(或乳胶颗粒)膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成；胶体金(或乳胶颗粒)膜为含抗丙烯酰胺单克隆抗体胶体金(或含抗丙烯酰胺单克隆抗体乳胶颗粒)标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜横向上有两条检测带，一条为含丙烯酰胺类人工抗原的检测带，另一条为含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本实用新型优点是应用免疫学的方法直接检测食品样品中丙烯酰胺的含量。本实用新型丙烯酰胺快速检测卡易于制备，使用方便快速，结果准确。
文档编号G01N33/02GK202330398SQ201120438189
公开日2012年7月11日 申请日期2011年11月8日 优先权日2011年11月8日
发明者周坚, 王黎丽 申请人:无锡安迪生物工程有限公司