一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂的制作方法
【专利摘要】本发明涉及缺血修饰白蛋白检测【技术领域】，特别涉及一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂，包括试剂1和试剂2，试剂1中含有0.1-1%的烷基糖苷APG1214和0.1-1%的Emulgen709。在R1试剂中加入两种特殊的非离子表面活性剂烷基糖苷APG1214和Emulgen709，不仅显著改善测定的性能，而且对维护体系的透明，防止出现白色浑浊，效果明显，相比之前所用的吐温-80、Tritonx-100、聚氧乙烯月桂醚等有更好的效果，显著提高了检测试剂的抗肝素干扰能力。
【专利说明】一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂
[0001]【技术领域】
本发明涉及缺血修饰白蛋白检测【技术领域】，特别涉及一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂。
[0002]【背景技术】
缺血修饰白蛋白(IMA)是急性冠脉综合征(ACS)诊断的生物标志。ACS具有发病急、变化快、临床表现与危险性不均一等特征，早期诊断困难。传统的生物标志物只有在心肌发生坏死时才升高，但这时已给患者带来了不可逆的病理损害。因此，急需一种可以反映心肌缺血的早期敏感强的生化指标用于早期诊断，而IMA是近年来的研究热点，为ACS早期诊断的研究开辟了新的道路。
[0003]IMA检测是以心肌缺血可引起人血清白蛋白(human serum albumin, HSA)N末端发生变化及其与Co2+结合迅速减少为前提，采用白蛋白一钴结合实验测定白蛋白与外源性Co2+嵫合的能力。测定时将已知量的Co2+加入到血清标本中，待白蛋白与Co2+充分结合后，再利用二硫苏糖醇(DTT)与Co2+的显色反应，定量检测剩余的、游离态的Co2+，通过比色来间接测定IMA的含量。
[0004]在前期很多采用蛋白-钴结合实验法研制的测定试剂中，对于使用肝素处理的临床样本，无法正常检测，经实验验证和相关国内外文献显示，在使用普通IMA检测试剂，检测肝素样本，与非肝素的血清样本检测结果相关性极差，准确性难以保障，给常规的临床检测带来很大不便。它主要有以下几个问题:反应曲线差；相关性差；准确度差等。
[0005]
【发明内容】
为了解决以上检测肝素样本中出现的反应曲线差、相关性差、准确度差的问题，本发明提供了一种抗肝素干扰能力强、具有很好的反应曲线、相关性和准确度的抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂。
[0006]本发明是通过以下方式实现的:
一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂，包括试剂I和试剂2，其中，
试剂I中含有0.1-1%的烷基糖苷APG1214和0.1-1%的Emulgen709。
[0007]烷基糖苷APG1214是一种烷基碳数为12_14的烷基多糖苷，是一种非离子表面活性剂。
[0008]Emulgen709是一种聚氧乙烯烧基醚。
[0009]一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂，包括试剂I和试剂2，其中，
试剂I中各组分重量百分含量如下:
去离子水86.9-88.7%,
缓冲液10%，
CoCl2.6H200.1%,
防腐剂1%，
烷基糖苷 APG12140.1-1%,
Emulgen7090.1-1% ； 调整pH值到7.5-7.8 ；
试剂2中各组分重量百分含量如下:
去离子水88%，
缓冲液10%，
二硫苏糖醇1%，
防腐剂1%，
调整pH值到5.9-6.4。
[0010]所述的缺血修饰白蛋白检测试剂，优选所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液，试剂IpH值为7.5，试剂2pH值为5.9 ；
优选所述防腐剂为NaN3。
[0011]本发明的目的提供一种抗肝素的缺血修饰白蛋白检测试剂，为临床监测提供方便:本发明采用液体双试剂用白蛋白-钴结合实验法测定测试血清中的缺血修饰白蛋白含量。在Rl试剂中加入两种特殊的非离子表面活性剂烷基糖苷APG1214和Emulgen709，在保障准确度和试剂的稳定性的前提下，不仅显著改善测定的性能，防止出现白色浑浊，效果明显，而且对维护体系的透明及提高试剂的抗干扰性能都有良好效果，为临床肝素血清样本中IMA的检测提供很大方便。
[0012]本发明的有益效果:
1)采用双试剂，Rl和R2两种试剂都同时使用缓冲范围广的三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲体系，并将Co2+储存在pH值为7.5-7.8的中性环境中，因为中性环境下DTT有较强的还原性，但是DTT随着pH值得降低还原性会有很大的降低，因此将DTT储存在pH为5.9-6.4的试剂R2中以保障其稳定系；
2)在Rl试剂中加入两种特殊的非离子表面活性剂烷基糖苷APG1214(重量百分比分别为0.1%-1%)和Emulgen709 (重量百分比分别为0.1%_1%)，不仅显著改善测定的性能，而且对维护体系的透明，防止出现白色浑池，效果明显，相比之前所用的吐温-80、TritonX-100、聚氧乙烯月桂醚等有更好的效果，显著提高了检测试剂的抗肝素干扰能力。
[0013]【专利附图】
【附图说明】
图1实施例1试剂检测肝素样本反应曲线，
图2实施例2试剂检测肝素样本反应曲线，
图3实施例3试剂检测肝素样本反应曲线，
图4实施例2试剂检测肝素样本反应曲线。
【具体实施方式】
[0014]实施例1: 一种现有的缺血修饰白蛋白检测试剂 试剂I中各组分重量百分含量:
去离子水88.9%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris)10%,
CoCl2.6H200.1%,
NaN31%，
将上述成分混合后即试剂I (钴离子试剂)，并用HCl或者NaOH将pH值调整到7.5 ； 试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水88%，
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris)10%,
DTT1%，
NaN31%，
将上述成分混合后即试剂2 (硫苏糖醇试剂)，并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
[0015]实施例2:本发明的抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂 试剂I中各组分重量百分含量:
去离子水88.7%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris)10%,
CoCl2.6H200.1%,
NaN31%，
烷基糖苷APG12140.1%，
Emulgen7090.1%，
将上述成分混合后即试剂I (钴离子试剂)，并用HCl或者NaOH将PH值调整到7.5 ； 试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水88%，
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris)10%,
DTT1%，
NaN31%，
将上述成分混合后即试剂2 (硫苏糖醇试剂)，并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
[0016]2)本实施例试剂的使用方法:
本实施例描述的抗肝素干扰的IMA检测试剂，首先随机抽取20个新鲜的临床样本，将每一份新鲜样本分成两组，一组放在普通的KHB离心管中，另一组放置在肝素钠(肝素钾或肝素锂)离心管中同时放在离心机中离心处理，在使用时采用具有双试剂功能的全自动生化分析仪，如东芝40全自动分析仪等，将Rl和R2按照体积2:1的比例放置到对应的试剂位上，在样品盘的对应位置放置好蒸馏水、标准品和样本，分别使用实施例1中的配方配置的IMA检测试剂和实施例2中加入非离子表面活性剂烷基糖苷APG1214和Emulgen709的IMA检测试剂同步对40个样本进行检测。操作如表1:
表I检测条件及工艺
【权利要求】
1.一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂，其特征在于包括试剂I和试剂2，其中， 试剂I中含有0.1-1%的烷基糖苷APG1214和0.1-1%的Emulgen709。
2.一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂，其特征在于包括试剂I和试剂2，其中， 试剂I中各组分重量百分含量如下: 去离子水86.9-88.7%,缓冲液10%， CoCl2.6H200.1%,防腐剂1%， 烷基糖苷 APG12140.1-1%, Emulgen7090.1-1% ； 调整pH值到7.5 ； 试剂2中各组分重量百分含量如下:去离子水88%，缓冲液10%，二硫苏糖醇1%，防腐剂1%， 调整pH值到5.9。
3.根据权利要求2所述的缺血修饰白蛋白检测试剂，其特征在于所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液，试剂I PH值为7.5，试剂2 pH值为5.9。
4.根据权利要求2所述的缺血修饰白蛋白检测试剂，其特征在于所述防腐剂为NaN3。
【文档编号】G01N33/68GK103558398SQ201310537923
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月4日 优先权日:2013年11月4日
【发明者】谭柏清, 罗维晓, 甘宜梧 申请人:山东博科生物产业有限公司