一种农产品中痕量铅的检测方法
【专利摘要】本发明公开一种农产品中痕量铅的检测方法，属于食品安全检测【技术领域】。本发明利用铅与阳离子表面活性剂和偶氮染料形成有色三元络合物，通过浊点萃取进行分离富集，用光度法进行含量测定；农产品中铅利用超声波加酸消解方式进行提取，再是利用脱色处理。本发明所述方法具有操作条件温和、时间短、易实现现场操作的特点，与浊点萃取，实现农副产品重金属铅高灵敏、快速、简便的检测方法。
【专利说明】一种农产品中痕量铅的检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种农产品中痕量铅的检测方法，属于食品安全检测【技术领域】。
【背景技术】
[0002]重金属元素会对生态环境和人体健康产生影响。重金属一般以天然浓度广泛存在于自然界中，但由于人类对重金属的开采、冶炼、加工及商品制造活动日益增多，造成不少重金属如铅、镉、钴等进入大气、水及土壤中，引起严重的环境污染和人体危害，因此准确检测环境样品中的重金属元素变得日趋重要。重金属铅是一种重要的重金属元素，其本身和化合物对人体各组织均有毒性，铅中毒的危害主要表现在对神经系统、血液系统、心血管系统、骨骼系统等终身性的伤害上。由于铅是不可降解的，它在环境中持久性存在，并且产生在动物和植物的毒性作用，铅中毒的危害之严重，使得预防和检测工作变得非常之重要，实现食品特别是农副产品重金属快速检测具有十分重要的意义。
[0003]农副产品重金属测定必须先进行消解，将重金属变成离子形式。常见消解方法有酸消解法，需要高温加热；微波消解，需要高压及专用微波消解仪。消解后的重金属痕量元素的浓度通常非常低且基体干扰不能消除，因而测定前分离富集的样品前处理技术显得非常重要。传统的对金属离子的样品前处理技术主要采用液液萃取(LLE)、固相萃取(SPE)、双水相萃取(ATPS)、浊点萃取(CPE)及分散液液微萃取(DLLME)。本 申请人:之前利用分散液液微萃取(DLLME)对废水中的铜离子检测进行过较深入的研究，已经取得了不错的效果，并申请了发明专利，申请号(201110355491.8，)。
[0004]本发明一是利用超声波加酸消解方式，具有操作条件温和，时间短，易实现了现场操作的特点；二是利用两性离子表面活性剂为络合剂与重金属铅、偶氮类染料形成有色三元配合物；三是利用浊点萃取，实现农副产品重金属铅高灵敏、快速、简便的检测方法，对食品安全、人体健康有重要的意义。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种农产品中痕量铅的检测方法，在保证检测准确度和灵敏度的同时，降低检测成本，缩短检测时间。本发明所述农产品中痕量铅的检测方法，具体包括以下步骤:
(I)标准工作曲线制作
①按每IOml铅标准溶液中加入1.5^3.5mL的3_[N，N- 二甲基-[2-(2-甲基丙-2-烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐和0.5~2.0mL偶氮染料的比例在铅标准溶液中加入3-[N，N-二甲基-[2-(2-甲基丙-2-烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐和偶氮染料，然后用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液调节PH为7.5，混合均匀后形成三元配合物，在混合之前，铅标准溶液的浓度为KrSOOPgL'S-m，N-二甲基-[2-(2-甲基丙_2_烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐的浓度为1.0X10_2mol I/1，偶氮染料的浓度为1.0X10_4molL-1 ；②在步骤①得到的三元配合物中加入非离子表面活性剂和降浊点试剂，混合，加热，得到混浊乳液；
③将步骤②得到的混浊乳液，离心，分相，含铅络合物有色溶液进入表面活性剂富集相，分离表面活性剂富集相，用光度法制作铅工作曲线；
(2)样品测定
①样品处理:将待测样品干燥、打碎、准确称量，加入硝酸，放入超声浴中，35~45°C超声15~30min，离心，取上清液，备用；
②将上述制备的上清液加脱色剂，涡旋混合f2min，离心，取上清液，备用；
③重复步骤(1)中的①~③，不同在于将铅标准液换为步骤②中得到的上清液，分离表面活性剂富集相，测定吸光度，并对照步骤(1)所得的线性回归方程，计算出样品中铅的含量。
[0006]本发明步骤(1)中所述的偶氮染料为诱惑红、苋菜红、胭脂红、赤藓红中一种。
[0007]本发明步骤(1)中所述的非离子表面活性剂为Triton X110、Triton Xl 14、AE0_9、Tergitol TMN 6 中的一 种，用量为 0.4 ~lmL/25mL。
[0008]本发明步骤(1)中所述的加热温度为30~50°C，加热时间为10~20min。
[0009]本发明步骤(1)中所述的降浊点试剂为正辛醇、异辛醇、正戊醇、正癸醇、氯化钠、硫酸钠、硫酸铵、氯化铵中的一种，用量为0.25~1.5g/25ml。
[0010]本发明步骤(2)中所述的硝酸浓度为I~5 mo I L—1，用量为0.1-0.5g/10mL。
[0011]本发明步骤(2)中所述的脱色剂为活性炭、硅藻土、硅胶、活性氧化铝、壳聚糖中的一种，用量 0.1 ~0.5g/10mL。
[0012]本发明步骤(1)或(2)中所述离心时间为3~10 min,离心转速2000~5000 r/min。
[0013]除非另有说明，本发明所采用的百分数均为重量百分数。
[0014]本发明的有益效果:
(1)利用超声波加酸消解方式，具有操作条件温和，时间短，易实现了现场操作的特点；二是；三是利用浊点萃取，实现农副产品重金属铅高灵敏、快速、简便的检测方法，富集倍数达90倍，不需要使用有机溶剂，绿色环保，检测限可达I μ g/L ;
(2)利用两性离子表面活性剂为络合剂与重金属铅、偶氮类染料形成有色三元配合物，与铅常见共存离子Cu2+、Ni2+、Co2+、Cd2+、Mn2+等相同量时几乎无干扰，方法具有很强的选择性；
(3)利用吸附脱色技术，消除样品中有色物质对测定的干扰，大大提高了方法准确性和灵敏度；
(4)利用浊点萃取技术对Pb-络合剂-偶氮类染料形成有色三元配合物分离富集，消除了干扰，提高了检测灵敏度。
【具体实施方式】
[0015]下面结合实施例对本发明作进一步地说明，但本发明的保护范围并不限于此。
[0016]实施例1
用本实施例所述方法测定茶叶中铅的含量，具体包括以下步骤。[0017](I)标准工作曲线制作
①分别取0.10,0.5、1.0,2.0,3.00,5.00,8.0OmL Pb2+ (lOOPg/mL)铅标准液置于离心管中，加入1.0X 10_2 mo I L-1的3-[N, N- 二甲基-[2-(2-甲基丙-2-烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐2.5 ml和1.0X 10_4 mo I L-1诱惑红1.5 mL，加入三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液2mL，调节pH为7.5，稀释至25mL，混合均匀，形成红色三元配合物；
②将步骤①得到的溶液加入非离子表面活性剂TritonXllO 0.6mL及NaCl 0.5g，混合，在水浴50°C加热15min，得到混浊乳液；
③将步骤②得到的混浊乳液，4000r/min离心4min，分相，含铅络合物红色溶液进入表面活性剂富集相；
④分离表面活性剂富集相，在波长530nm下，测定吸光度，回归方程、相关系数、相对标准偏差、回收率等见表1 ;
表1标准铅的线性方程
【权利要求】
1.一种农产品中痕量铅的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤: (1)标准工作曲线制作 ①按每IOmL铅标准溶液中加入1.5^3.5mL的3_[N，N-二甲基-[2-(2-甲基丙-2-烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐和0.5^2.0mL偶氮染料的比例在铅标准溶液中加入3- [N，N- 二甲基-[2- (2-甲基丙-2-烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐和偶氮染料，然后用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液调节PH为7.5，混合均匀后形成三元配合物，在混合之前，铅标准溶液的浓度为KrSOOPgL'S-m，N-二甲基-[2-(2-甲基丙_2_烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐的浓度为1.0X10_2mol I/1，偶氮染料的浓度为1.0X10_4molL-1 ； ②在步骤①得到的三元配合物中加入非离子表面活性剂和降浊点试剂，混合，加热，得到混浊乳液； ③将步骤②得到的混浊乳液，离心，分相，含铅络合物有色溶液进入表面活性剂富集相，分离表面活性剂富集相，用光度法制作铅工作曲线； (2)样品测定 ①样品处理:将待测样品干燥、打碎、准确称量，加入硝酸，放入超声浴中，35~45°C超声15~30min，离心，取上清液，备用； ②将上述制备的上 清液加脱色剂，涡旋混合f2min，离心，取上清液，备用； ③重复步骤(1)中的①~③，不同在于将铅标准液换为步骤(2)中②得到的上清液，分离表面活性剂富集相，测定吸光度，并对照步骤(1)所得的线性回归方程，计算出样品中铅的含量。
2.根据权利要求1所述的农产品中痕量铅的检测方法，其特征在于:步骤(1)中所述的偶氮染料为诱惑红、苋菜红、胭脂红、赤藓红中一种。
3.根据权利要求1所述的农产品中痕量铅的检测方法，其特征在于:步骤(1)中所述的非离子表面活性剂为Triton X110、Triton X114、AEO-9、Tergitol TMN 6中的一种，用量为0.4 ~lmL/25mL。
4.根据权利要求1所述的农产品中痕量铅的检测方法，其特征在于:步骤(1)中所述的加热温度为30~50°C，加热时间为10~20min。
5.根据权利要求1所述的农产品中痕量铅的检测方法，其特征在于:步骤(1)中所述的降浊点试剂为正辛醇、异辛醇、正戊醇、正癸醇、氯化钠、硫酸钠、硫酸铵、氯化铵中的一种，用量为 0.25 ~1.5g/25mL。
6.根据权利要求1所述的农产品中痕量铅的检测方法，其特征在于:步骤(2)中所述的硝酸浓度为1~5 mo I L—1，用量为0.1~0.5g/10mL。
7.根据权利要求1所述的农产品中痕量铅的检测方法，其特征在于:步骤(2)中所述的脱色剂为活性炭、硅藻土、硅胶、活性氧化铝、壳聚糖中的一种，用量0.1~0.5g/10mL。
8.根据权利要求1所述的农产品中痕量铅的检测方法，其特征在于:步骤(1)或(2)中所述离心时间为3~10 min,离心转速2000~5000 r/min。
【文档编号】G01N1/28GK104007107SQ201410201025
【公开日】2014年8月27日 申请日期:2014年5月14日 优先权日:2014年5月14日
【发明者】杨亚玲, 焦扬 申请人:昆明理工大学