纺织品中羊绒的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及纺织品检测技术领域，进一步涉及纺织品中羊绒的检测，具体涉及纺 织品中羊绒的定量检测方法。
【背景技术】
[0002] 山羊绒属于稀有的特种动物纤维，素有"纤维钻石"和"软黄金"之称。中国是世 界最大的羊绒生产国，羊绒产量占世界总量的75%左右。中国也是世界第一大羊绒输出国， 羊绒及其制品年出口总额超过15亿美元，同时国内的羊绒制品市场也十分广阔。
[0003] 在巨大的经济利益驱使下，行业内掺杂使假和假冒伪劣等现象反复出现，这些都 严重妨碍了羊绒产业的健康、良性、可持续性发展。现今市场上对羊绒类纺织纤维产品的混 合掺假多为以羊毛等低价值原料掺入珍稀的山羊绒原料中，制成的织物在形貌和手感上都 极难分辨。
[0004] 目前对羊绒产品的质量检验方法以物理性的显微观察法为主，由检验人员对纤维 的细度、异型纤维率、含杂率、长度、强度、伸长度等进行检验（参见《关于山羊绒国家质量 标准的制定意见》）。这类检测方法需要检验人员接触过大量的羊绒样品，积累数十年的实 践经验，主观性强。除了最常用的光学显微镜检测法，国外研究者也尝试过使用扫描电镜观 察纺织纤维的表面形态和精细结构，但这种方法实验成本高、操作繁琐，而且无法区分与羊 绒纤维形、结构非常近似的其他种类纤维，其中就以羊毛的混淆作用最为突出。另外，研究 者也通过分析纤维材料中的脂质分子、DNA序列差异或者制备特异性识别羊绒的抗体来鉴 别羊绒成分，这类探索性的方法往往受到生产过程中多种化学处理（比如漂白、染色）的干 扰，使得结果出现偏差。
[0005] 除了纺织品中羊绒成分的定性检测（纺织品中是否含有羊绒）之外，确定其中羊 绒含量对产品品质评价更为重要。为了获得纺织品中的羊绒含量，首要的技术问题是确定 一种有效的检测目标，由于纺织品中广泛存在其他蛋白成分，尤其存在诸如羊毛等与羊绒 微观结构较为类似的蛋白，如果检测目标选择不合适则很容易影响检测结果。此外，标志物 的检测信号与羊绒实际含量间的对应关系是否稳定、实验操作难度乃至实验结果的重现性 等技术问题都有待突破。尽管现有技术的研究者做过诸多尝试，但截至目前尚缺乏一种针 对纺织品中羊绒含量的有效检测方法。
【发明内容】
[0006] 本发明旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种纺织品中羊绒的检测方法，以解 决现有技术中难以确定纺织品中是否含有羊绒的技术问题。
[0007] 本发明解决的另一技术问题是难以确定纺织品中羊绒含量。
[0008] 本发明解决的再一技术问题是纺织品中羊绒含量检测操作较繁琐。
[0009] 为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：
[0010] 一种纺织品中羊绒的检测方法，包括以下步骤： toon]1)自待测样品中提取总蛋白质；
[0012] 2)检测步骤1)所述的总蛋白质中序列为SEQIDN01的肽段含量。
[0013] 优选的，还包括步骤3):利用与步骤2)相同的检测方法确定纺织品中羊绒含量与 序列为SEQIDN01的肽段含量之间对应关系标准曲线，而后利用该标准曲线和步骤2)所 检测得到的序列为SEQIDN01的肽段含量确定出待测样品中羊绒含量。
[0014] 另一种纺织品中羊绒的检测方法，包括以下步骤：
[0015] 1)自待测样品中提取总蛋白质；
[0016] 2)检测步骤1)所述的总蛋白质中序列为SEQIDN02的肽段含量。
[0017] 优选的，还包括步骤3):利用与步骤2)相同的检测方法确定纺织品中羊绒含量与 序列为SEQIDN02的肽段含量之间对应关系标准曲线，而后利用该标准曲线和步骤2)所 检测得到的序列为SEQIDN02的肽段含量确定出待测样品中羊绒含量。
[0018] 在以上任一项技术方案基础上优选的，步骤1)包括以下步骤：将待测样品分别通 过乙醇、氯仿-甲醇溶液浸泡；收集固形物干燥，加入蛋白提取溶液提取；弃沉淀、取上清液 待用。
[0019] 在以上任一项技术方案基础上优选的，步骤2)包括以下步骤：对步骤1)得到的总 蛋白进行胰酶酶解；而后通过生物质谱分析酶解产物中序列为SEQIDN01的肽段含量或序 列为SEQIDN02的肽段含量。在此基础上进一步优选的，步骤2)所述胰酶酶解包括以下 步骤：将步骤1)得到的总蛋白溶解后加入二硫苏糖醇孵育，而后加入巯基封闭试剂，最后 加入胰蛋白酶于35~39°C下孵育，将酶解后的蛋白脱盐、干燥，即得到酶解产物。进一步优 选的，所述巯基封闭试剂是碘乙酰胺；加入碘乙酰胺后在室温条件下避光孵育。
[0020] 同时，本发明还提供了一种用于上述方法的肽段，该肽段的序列如SEQIDN01所 不。
[0021] 同时，本发明还提供了一种用于上述方法的肽段，该肽段的序列如SEQIDN02所 不。
[0022] 在以上技术方案中，序列为SEQIDN01和SEQIDN02的肽段被确定为羊绒的标志 性肽段，当利用液相色谱-生物质谱方法检测发现待测物总蛋白中具有该序列的肽段时， 则证明待测物中含有羊绒成分，反之则不含有羊绒成分。进一步的，可以利用待测物总蛋白 中以上标志性肽段的含量反应其中羊绒的含量。
[0023] 其中，确定羊绒含量与标志性肽段含量之间对应关系标准曲线，可以是通过以下 方法实现的：取羊绒标准品，与其他纺织品混合成为其中含有5%、10%、20%、30%、50%、 70%等不同含量羊绒的待测物，再利用上述已知羊绒含量的待测物执行目标肽段含量检 测，从而得到羊绒含量与目标肽段含量之间的对应关系，进而可以绘制成标准曲线。
[0024] 当绘制出标准曲线以后，可以将某待测物的检测结果带入标准曲线公式求得该待 测物中的羊绒含量。在以上标准曲线的应用中，应当注意规避系统性误差。
[0025] 实验发现，本发明所确定的、序列分别为SEQIDN01和SEQIDN02的肽段具有很 好的特异性，只要上述肽段能够通过生物质谱方法检出则可以确切证明羊绒成分的存在， 实验结果不会受到其他常规纺织品成分的影响。除了定性检测之外，可以利用上述标志性 肽段的含量进行定量检测，肽段含量与羊绒含量间具有较好的线性关系，检测结果稳定、可 靠。本发明以指向性优异的标志性肽段为基础开发了针对纺织品中羊绒的检测方法，该方 法准确有效同时操作较为简便，具有突出的推广前景。
【附图说明】
[0026] 图1是本发明实施例1中标准羊绒纤维的液相色谱-生物质谱检测结果图；
[0027] 图2是本发明实施例1中标准羊绒纤维的液相色谱-生物质谱检测结果图；
[0028] 图3是本发明实施例1中标准羊毛纤维的液相色谱-生物质谱检测结果图；
[0029] 图4是本发明实施例1中标准羊毛纤维的液相色谱-生物质谱检测结果图；
[0030] 图5是本发明实施例1中标准羊绒纤维与标准羊毛纤维混合物的液相色谱-生物 质谱检测结果图；
[0031] 图6是本发明实施例2中羊绒纤维含量与SEQIDN01所示序列的肽段含量对应 关系标准曲线；
[0032] 图7是本发明实施例2中羊绒纤维含量与SEQIDN02所示序列的肽段含量对应 关系标准曲线；
[0033] 图8是本发明实施例3中代号为S1的样品的液相色谱-生物质谱检测结果图；
[0034] 图9是本发明实施例3中代号为S2的样品的液相色谱-生物质谱检测结果图；
[0035] 图10是本发明实施例3中代号为S3的样品的液相色谱-生物质谱检测结果图；
[0036] 图11是本发明实施例3中代号为S4的样品的液相色谱-生物质谱检测结果图；
[0037] 在以上附图1~11中，所有可检出的标志性肽段均标注在谱图中，未标注表示相 应的标志性肽段未被检出。
【具体实施方式】
[0038] 以下将对本发明的【具体实施方式】进行详细描述。为了避免过多不必要的细节，在 以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。
[0039] 以下实施例中所使用的近似性语言可用于定量表述，表明在不改变基本功能的情 况下可允许数量有一定的变动。因此，用"大约"、"左右"等语言所修正的数值不限于该准 确数值本身。在一些实施例中，"大约"表示允许其修正的数值在正负百分之十（10%)的 范围内变化，比如，"大约1〇〇"表示的可以是90到110之间的任何数值。此外，在"大约第 一数值到第二数值"的表述中，大约同时修正第一和第二数值两个数值。在某些情况下，近 似性语言可能与测量仪器的精度有关。
[0040] 除有定义外，以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人 员普遍理解的相同含义。
[0041] 实施例1 (本发明羊绒鉴别方法的特异性实验）
[0042] 一、材料
[0043] 标准羊绒纤维样品、标准羊毛纤维样品由天津纺织工程研究院提供。
[0044] 二、方法
[0045] 分别取羊绒纤维标准品、羊毛纤维标准品进行混合。将上述混合样品及标准羊绒 纤维样品、标准羊毛纤维样品作为受试物，提取总蛋白质并采用生物质谱分析技术检测标 志