测定奥贝胆酸片溶出含量的方法与流程

技术特征：

1.一种测定奥贝胆酸片溶出含量的方法，其特征在于，测定条件包括：

(1)待测样品溶液的配制：加入衍生化试剂和催化剂对奥贝胆酸片进行衍生化后配制待测样品溶液；

(2)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以有机溶剂为流动相A，酸性水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，

其中，所述梯度洗脱条件为：

时间(min)流动相A(V％)流动相B(V％)060～8040～20360～8040～201080～10020～01280～10020～01560～8040～20

(3)检测分析：采用高效液相色谱仪对所述待测样品溶液进行检测，以便得到所述待测样品溶液中奥贝胆酸的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用磷酸将所述流动相B的pH调节为1.5～5.0，优选为3.0。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述衍生化试剂选自吡啶-苯甲酰氯、邻苯二甲醛、4-硝基苯甲酰甲基溴、4-溴甲基-7-甲氧基香豆素、对肽内酰胺苯磺酰氯和2-乙酰溴-6-甲氧基萘中的至少一种，优选为2-乙酰溴-6-甲氧基萘和4-硝基苯甲酰甲基溴。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述催化剂选自18-冠醚-6和三乙胺中的至少一种，优选18-冠醚-6。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述奥贝胆酸片的试剂量为100～500μl、温度为35～65℃、时间为30～100min，优选250ul、温度45℃、时间40min。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂为选自甲醇和乙腈中的至少一种，优选为乙腈。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱条件为：

时间/min流动相A(V％)流动相B(V％)0604036040108020

128020156040

其中，所述流动相A为有机溶剂，所述流动相B为酸性水溶液。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的流速为0.8～1.2ml/min，优选为1.0ml/min。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，检测波长为255～275nm，优选为265nm。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品溶液进样体积为10～50μl，优选为20μl。