一种养殖水体氨氮快速检测试剂盒的制作方法

文档序号:11384615阅读:330来源:国知局

本发明属于水体检测领域,具体涉及一种养殖水体氨氮快速检测试剂盒。



背景技术:

养殖水体中的氨氮含量是水产养殖过程中水质检测的一个重要指标,水体中的氨氮(nh3-n)主要以游离氨(nh3)或铵盐(nh4+)的形式存在;水体中的氨氮主要是由水体中微生物分解的养殖动物的排泄物、水体中的有机肥、残饵等产生的氨氮;水体中的反硝化细菌在缺氧的情况下,也可通过反硝化作用把亚硝酸盐等分解成氨氮。如果水体中的氨氮含量过高,会引起养殖动物机体组织损伤,降低氧气在组织间的输送;会增加鱼类鳃的通透性,不利于其对外界的正常物质交换;会影响养殖生物的摄食效率,导致生产缓慢,免疫力下降容易患病,会导致水体中有毒物质的不断积累,直接危害到养殖动物的生长和生存,严重时会造成其中毒死亡。

市面上现有的氨氮检测试剂盒在检测水样的过程中,有时因水样中含有过多的金属离子如钙离子、镁离子、铁离子、锰离子等与试剂发生反应生成白色沉淀或浑浊,以致无法显色;严重影响到水体中氨氮含量的检测。常用的用来掩蔽这些金属离子的表面活性剂如酒石酸钾钠因质量等多种原因不能够完全彻底的掩蔽水样中的金属离子;或者是由于氯化汞试剂不纯引起的化学试剂质量的改变,影响了氨氮检测过程中的显色观察。

因此,随着水产养殖业的迅猛发展,减少养殖户的养殖风险,急需有一种新的快速、准确、稳定的氨氮检测试剂,方便养殖户现场对养殖水体中的氨氮含量进行一个快速精准的判断。



技术实现要素:

为了解决上述问题,本发明提供一种养殖水体氨氮快速检测试剂盒。

本发明提供的养殖水体氨氮快速检测试剂盒,其含有氨氮测试剂ⅰ、氨氮测试剂ⅱ,比色瓶和比色卡,所述的氨氮测试剂i按重量份计由:酒石酸钾钠25-60份,表面活性剂10-45份,稳定剂1-30份,蒸馏水75-120份制成;所述氨氮测试剂ii按重量份计由:氢氧化钠5-35份,碘化汞钾5~25份,稳定剂5-35份,蒸馏水75~120份制成。

优选地,所述的氨氮测试剂i按重量份计由:酒石酸钾钠28-55份,表面活性剂12-40份,稳定剂3-25份,蒸馏水80~110份制成;所述氨氮测试剂ii按重量份计由:氢氧化钠8-32份,碘化汞钾8-24份,稳定剂8-30份,蒸馏水80~110份制成。

更优选地,所述的氨氮测试剂i按重量份计由:酒石酸钾钠30-50份,表面活性剂15-35份,稳定剂5-24份,蒸馏水85-105份制成;所述氨氮测试剂ii按重量份计由:氢氧化钠10-30份,碘化汞钾10-20份,稳定剂10-25份,蒸馏水85-105份制成。

最优选地,所述的氨氮测试剂i按重量份计由:酒石酸钾钠35-45份,表面活性剂20-30份,稳定剂10-20份,蒸馏水90~100份制成;所述氨氮测试剂ii按重量份计由:氢氧化钠12~25份,碘化汞钾12-18份,稳定剂12-20份,蒸馏水90-100份制成。

其中,所述的氨氮测试剂i和氮测试剂ii体积比优选为1:1。

其中,所述的稳定剂为乙二胺四乙酸二钠、单乙醇胺、三乙醇胺、聚乙烯醇、硫脲中的一种或多种。

其中,所述表面活性剂为六偏磷酸钠、乙酸钠、苹果酸钠、柠檬酸钠中的一种或多种。

本发明中,比色卡是由配置的不同浓度梯度的氨氮标准溶液 (0.005、0.01、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mg/l)分别采用分光光度计测定(3个平行)标定后,标准液在与测试剂显色制作而成。

本发明还提供利用本发明的养殖水体氨氮快速检测试剂盒进行养殖水体氨氮检测的方法,其包括如下步骤:

1)使用待测水样润洗比色瓶2~3次;

2)用吸管吸取待测水样至比色瓶中,定容至15ml。

3)加入氨氮测试剂ⅰ和氨氮测试剂ⅱ各6滴,盖好比色瓶,摇匀静止1~3min,与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的氨氮含量。

本发明的优点和积极效果在于:

本发明所提供的新型氨氮快速检测试剂盒中,测试剂以液态形式提供,使用方便;测试剂ⅰ中加入的新的其它掩蔽剂能够协同酒石酸钾钠掩蔽水样中的金属离子,使测试剂的性质更加稳定,易于保存。测试剂ⅱ中直接使用显色基团碘化汞钾,有效防止碘化汞红色沉淀的生成,同时加入了稳定剂,解决了测试剂质量不稳定引起的试剂灵敏度降低问题,这种新型的测试剂解决了加入测试剂在检测水样过程中水质变浑浊的问题。

本发明测试剂中添加的稳定剂,可以维持测试剂理化性质、产品质量的稳定性,增加测试剂的有效保质期。加入新的测试剂后,水样不再变浑浊,显色迅速、明显,养殖户可以快速精准的了解到水样中的氨氮含量。同时本发明测试剂制备成本低,材料方便易得。有效解决了水产养殖水体中快速准确检测水中氨氮的需求,在水质检测领域具有广阔应用前景。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。

实施例1

氨氮测试剂ⅰ按重量份包括:酒石酸钾钠60份、柠檬酸钠30份,乙二胺四乙酸二钠20份,溶于120份蒸馏水,并于90℃水浴锅加热15min,冷却,即得。

氨氮测试剂ii按重量份包括:氢氧化钠35份,碘化汞钾25份,乙二胺四乙酸二钠20份,溶于120份蒸馏水,即得。

试剂盒组装:氨氮测试剂ⅰ1瓶、氨氮测试剂ⅱ1瓶,比色卡1张,比色瓶1个。

养殖水体氨氮检测具体操作步骤如下:

(1)使用待测水样润洗比色瓶2~3次;

(2)用吸管吸取待测水样至比色瓶中,定容至15ml。

(3)加入氨氮测试剂ⅰ和氨氮测试剂ⅱ各6滴,盖好比色瓶,摇匀静止1~3min,与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的氨氮含量。

实施例2

氨氮测试剂ⅰ按重量份包括:酒石酸钾钠40份、六偏磷酸钠30份,乙酸钠15份,乙二胺四乙酸二钠1份,溶于75份蒸馏水,并于90℃水浴锅加热25min,冷却,即得。

氨氮测试剂ii按重量份包括:氢氧化钠15份,碘化汞钾25份,单乙醇胺5份、三乙醇胺10份,溶于95份蒸馏水,即得。

试剂盒组装:氨氮测试剂ⅰ1瓶、氨氮测试剂ⅱ1瓶,比色卡1张,比色瓶1个。

养殖水体氨氮检测具体操作步骤如下:

(1)使用待测水样润洗比色瓶2~3次;

(2)用吸管吸取待测水样至比色瓶中,定容至15ml。

(3)按体积比加入氨氮测试剂ⅰ和氨氮测试剂ⅱ各6滴,盖好比色瓶,摇匀静止1~3min,与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的氨氮含量。

实施例3

氨氮测试剂ⅰ按重量份包括:酒石酸钾钠25份、乙酸钠30份,苹果酸钠5份,乙二胺四乙酸二钠15份,硫脲15份,溶于95份蒸馏水,并于90℃水浴锅加热30min,冷却,即得。

氨氮测试剂ii按重量份包括:氢氧化钠5份,碘化汞钾35份,聚乙烯醇15份,溶于100份蒸馏水,即得。

试剂盒组装:氨氮测试剂ⅰ1瓶、氨氮测试剂ⅱ1瓶,比色卡1张,比色瓶1个。

养殖水体氨氮检测具体操作步骤如下:

(1)使用待测水样润洗比色瓶2~3次;

(2)用吸管吸取待测水样至比色瓶中,定容至15ml。

(3)加入氨氮测试剂ⅰ和氨氮测试剂ⅱ各6滴,盖好比色瓶,摇匀静止1~3min,与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的氨氮含量。

实施例4

氨氮测试剂ⅰ按重量份包括:酒石酸钾钠50份、六偏磷酸钠15份,乙二胺四乙酸二钠15份,聚乙烯醇15份,溶于100份蒸馏水,并于90℃水浴锅加热30min,冷却,即得。

氨氮测试剂ii按重量份包括:氢氧化钠24份,碘化汞钾5份,乙二胺四乙酸二钠10份,聚乙烯醇10份,溶于100份蒸馏水,即得。

试剂盒组装:氨氮测试剂ⅰ1瓶、氨氮测试剂ⅱ1瓶,比色卡1张,比色瓶1个。

具体操作步骤如下:

(1)使用待测水样润洗比色瓶2~3次;

(2)用吸管吸取待测水样至比色瓶中,定容至15ml。

(3)按体积比1:1加入氨氮测试剂ⅰ和氨氮测试剂ⅱ0.2ml,盖 好比色瓶,摇匀静止1~3min,与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的氨氮含量。

试验例1

采用本发明实施例1、实施例2、实施例3、实施例4制备的氨氮测试剂对同一浓度梯度的氨氮标准溶液进行检测效果观察。

按一定浓度梯度配制氨氮标准溶液,用本发明中的检测试剂分别对其进行溶液中的氨氮含量测定,每个浓度都进行三次检测,用该试剂盒对应的比色卡进行目视比色,比色结果测出的浓度与所配标准液浓度一致,说明本发明中的氨氮检测试剂的精确度达到要求。

表1本发明制备的氨氮检测试剂效果对比

试验结果表明,本发明4个实施例制备的氨氮检测试剂的检测效果与所配的标准液浓度保持一致,其中实施例2在4个实施例中反 应速度方面效果最佳,表明实施例2的氨氮测试剂中的表面活性剂和稳定剂在配比和功能方面具有协同作用,共同促进加快了反应的速度。

试验例2本发明氨氮测试剂稳定性及保存期的试验

加速试验:

将本发明实施例1制备的氨氮测试剂分别放在三个恒温恒湿培养箱中,箱内温度分别为4℃、25℃、40℃;湿度均为75℃,放置2周。4℃用于保持测试剂的化学特性,作为对照样;25℃用于模拟常温保存样品;40℃用于加速试验,作为环境破坏性样品。然后检测同一批养殖水样,检测结果与4℃对照,25℃、40℃氨氮检测结果一致,表明实施例1制备的氨氮测试剂测定值均在正常显色范围之内,测试剂稳定性好。

采用本发明实施例2制备的氨氮测试剂准确度及保存期的试验:

长期试验:

将同一时间配制好的一批检测试剂盒置于室温条件下避光保存。分别在2个月、4个月、6个月、8个月、10个月、12个月之后,随机抽取中5组检测试剂盒对多组水样同时进行氨氮含量测定,同时使用该时间点新配制的试剂对同一水样进行测定,保存一段时间的试剂盒与新配置的试剂对每一组水样的检测结果均表现出一致性,实验结果表明本发明中实施例3制备的氨氮测试剂在一年时间内不会发生变质,长期保存的试剂检测结果同样可以达到标准要求。

表2本发明实施例2制备的氨氮检测试剂检测水样的试验结果

实验结果表明本发明中实施例2制备的氨氮测试剂在一年时间内不会发生变质,长期保存的试剂检测结果同样可以达到标准要求。

试验例3

采用本发明实施例3制备的氨氮测试剂与其它氨氮检测试剂的检测速度效果对比观察。

第一组为实施例3制备的氨氮测试剂,第二组根据中国专利cn102393329a制备的氨氮检测试剂、第三组为根据中国专利cn102507553a制备的氨氮检测试剂,第四组为对照组采用分光光度计测定氨氮含量,对诏安某养殖场同一水样进行氨氮含量检测,记录试剂反应时间,结果见表3。

表3本发明实施例3制备的氨氮测试剂检测水样的反应时间对比

本试验结果表明,本发明实施例3制备的氨氮检测试剂,对检测 的精确度与反应速度明显优于第2组和第3组氨氮试剂的检测效果。

试验例4

采用本发明实施例4制备的氨氮盐测试剂与其它氨氮测试剂的稳定性对比效果观察。

新型氨氮检测试剂盒稳定性对比试验:使用放置同一时间段6个月、12个月的第一组为实施例4制备的氨氮测试剂,第二组根据中国专利cn102393329a制备的氨氮检测试剂、第三组为根据中国专利cn102507553a制备的氨氮检测试剂作对比,对东山某草鱼养殖场同一水样进行氨氮含量检测,记录显色颜色变化情况,结果见表4。本发明实施例4制备的氨氮测试剂颜色与标准比色卡颜色保持一致,第2组检测水样变浑浊,无法比色;第3组显色结果与比色卡颜色对比发生了变化;检测结果显示,本发明的氨氮检测试剂与比色卡颜色一致,试剂稳定性明显优于第2组和第3组氨氮检测试剂。

表4本发明实施例4制备的氨氮测试剂检测颜色变化试验结果

本试验结果表明,通过对比本发明实施例4制备的氨氮测试剂质量的稳定性及保存时间明显优于第二组和第三组氨氮检测试剂的检测效果。

以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术 领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

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