一种保健酒中总皂苷含量的测定方法与流程

技术特征：

1.一种保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：校准溶液的制备和显色

S101水解：往乙腈和盐酸的混合溶剂中加入人参皂苷Re甲醇溶液，混匀后于恒温水浴条件下进行水解；

S102萃取：水解产物冷却后加入二氯甲烷和去离子水，水洗分离去掉水层，经氮吹仪吹干有机相层；

S103校准溶液配制：将萃取吹干后的产物用乙腈溶解和定容，得到人参皂苷苷元校准溶液；

S104测定吸光度：取人参皂苷苷元校准溶液加入到香草醛硫酸显色中间溶液中，显色体系中人参皂苷苷元校准溶液的浓度记为C_标，测定人参皂苷苷元校准溶液的吸光度值，该吸光度值记为A_标；

S2：酒样溶液的制备和显色

S201皂苷的提取：将保健酒酒样挥干乙醇和水，所得固体用水溶解，将该溶液进行固相萃取和洗脱，收集洗脱液，除去溶剂，所得固体用甲醇溶解，获得酒样皂苷甲醇溶液；

S202水解：往乙腈和盐酸的混合溶剂中加入酒样皂苷甲醇溶液，混匀后于恒温水浴条件下进行水解；

S203萃取：将水解产物冷却后加入二氯甲烷和去离子水，水洗分离去掉水层，经氮吹仪吹干有机相层；

S204酒样溶液的配制：将萃取吹干后的产物用乙腈溶解并定容至V₁mL，得到酒样苷元乙腈溶液；

S205测定吸光度：吸取V₂mL酒样苷元乙腈溶液加入到V₃mL的香草醛硫酸显色中间溶液中，测定酒样苷元乙腈溶液的吸光度，该吸光度值记为A_样；

S3：酒样中总皂苷的含量计算

计算公式为：

式中，X表示酒样中总皂苷的含量，单位为mg/100mL；A_标表示紫外分光光度计测定的校准溶液的吸光度值；A_样表示紫外分光光度计测定的样品吸光度值；C_标表示显色体系中校准溶液的浓度，单位为μg/mL；946.55为人参皂苷Re的摩尔分子量，单位为g/mol；476.73为人参皂苷水解成苷元的摩尔分子量，单位为g/mol。

2.根据权利要求1所述的保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，步骤S101和S202的水解过程中，恒温水浴温度为70～90℃，时间为1～5小时。

3.根据权利要求1所述的保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，步骤S101和S202的水解过程中，乙腈和盐酸的体积比为1:1。

4.根据权利要求1所述的保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，步骤S101和S202的水解过程中使用的盐酸还可以用硫酸或硝酸代替。

5.根据权利要求1所述的保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述步骤S104的测定吸光度过程中，取人参皂苷苷元校准溶液加入到香草醛硫酸显色中间溶液中，涡旋混匀，得到校准显色组；同时吸取乙腈加入到香草醛硫酸显色中间溶液中，涡旋混匀，得到溶剂空白显色组；所得校准显色组和溶剂空白显色组水浴加热后迅速放入冰水中冷却，后检测溶液在最大吸收波长下的吸光度值。

6.根据权利要求1所述的保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述步骤S201皂苷的提取过程中，将保健酒酒样水浴挥干乙醇和水，所得固体用水溶解，将该溶液加入经激活的萃取小柱中萃取，然后用去离子水洗涤，保持1～2滴/秒的速度洗涤，再用甲醇进行洗脱，收集洗脱液，除去甲醇和水，所得固体用甲醇溶解，获得酒样皂苷甲醇溶液。

7.根据权利要求1所述的保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述步骤S205的测定吸光度过程中，取酒样苷元乙腈溶液加入到的香草醛硫酸显色中间溶液中，混合均匀，所得混合物水浴加热后迅速放入冰水中冷却，后检测溶液在最大吸收波长下的吸光度值。

8.根据权利要求1至7任意一项所述的保健酒中总皂苷含量的测定方法，其特征在于，测定过程中所使用到的甲醇还可以替换为水饱和正丁醇。