1.一种定性检测乳糜的试剂盒,其特征在于,包括试剂部分、耗材部分和说明书;所述试剂部分包括萃取液、染色剂、阴性对照液和阳性对照液;所述萃取液为正己烷。
2.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述耗材部分包括滴管、1.5ml离心管和玻片。
3.根据权利要求1或2所述试剂盒,其特征在于,所述染色剂为苏丹Ⅲ醋酸乙醇溶液;所述阳性对照液为脂肪乳注射液;所述阴性对照液为生理盐水。
4.根据权利要求1-3任一所述试剂盒,其特征在于,所述说明书记载有定性检测乳糜的方法,具体包括以下步骤:
(1)、萃取:取400μl萃取液于1.5ml离心管中,加入样本500-1000μl,混合振摇,静置3-8min后,1500-2500r/min离心3-8min。
(2)、染色:用滴管吸取萃取液与样本的界面层液体100μl,于玻片上涂片,立即加染色剂100μl进行染色;或涂片后晾干,再加入染色剂100μl进行染色;或进行试管染色;
(3)、观察:用40倍或100倍的显微镜观察玻片上是否有橘红色球状脂肪颗粒,镜下全片无橘红色脂肪颗粒,即为乳糜阴性;
镜下仅偶见橘红色脂肪颗粒,即为乳糜阳性;
镜下有较多且大小不等的橘红色脂肪颗粒,即为乳糜强阳性;
步骤(2)中优选试管染色,具体为:吸取正己烷与样本的界面层液体100μl于1.5ml离心管中,加入100μl染色剂,混合均匀后开盖放置5-10min挥发掉萃取液,用一次性滴管取2-3滴置于玻片上。
5.一种定性检测乳糜的方法,其特征在于,以正己烷为萃取液将样本中的脂肪颗粒萃取到上层的萃取液中;优选的,萃取后再静置3-8min后,1500-2500r/min离心3-8min。
6.根据权利要求5所述方法,其特征在于,取400μl萃取液于1.5ml离心管中,加入样本500-1000μl,混合振摇,将样本中的脂肪颗粒萃取到上层的萃取液中。
7.根据权利要求5或6所述方法,其特征在于,萃取后吸取正己烷与样本的界面层液体100μl于1.5ml离心管中,加入100μl染色剂,混合均匀后开盖放置5-10min挥发掉萃取液,用一次性滴管取2-3滴置于玻片上。
8.一种定性检测乳糜的方法,其特征在于,使用权利要求1-4任一所述试剂盒,包括以下步骤:
(1)、萃取:取400μl萃取液于1.5ml离心管中,加入样本500-1000μl,混合振摇,将样本中的脂肪颗粒萃取到上层的萃取液中,静置3-8min后,1500-2500r/min离心3-8min;
(2)、染色:吸取萃取液与样本的界面层液体100μl,于玻片上涂片,立即加染色剂100μl进行染色;或涂片后晾干,再加入染色剂100μl进行染色;或进行试管染色;
(3)、观察:用40倍或100倍的显微镜观察玻片上是否有橘红色球状脂肪颗粒,
镜下全片无橘红色脂肪颗粒,即为乳糜阴性;
镜下仅偶见橘红色脂肪颗粒,即为乳糜阳性;
镜下有较多且大小不等的橘红色脂肪颗粒,即为乳糜强阳性。
9.根据权利要求8所述方法,其特征在于,步骤(2)所述试管染色,具体为:吸取正己烷与样本的界面层液体100μl于1.5ml离心管中,加入100μl染色剂,混合均匀后开盖放置5-10min挥发掉萃取液,用一次性滴管取2-3滴置于玻片上。
10.根据权利要求8或9所述方法,其特征在于,所述染色剂为苏丹Ⅲ醋酸乙醇溶液,其配制过程为:5%(v/v)乙醇100ml,冰醋酸90ml,苏丹Ⅲ粉末1.5-2.5g,先将乙醇与冰醋酸混合,倾入苏丹Ⅲ粉末,充分溶解,即可。