本发明涉及电化学领域，特别是涉及一种基于无酶过氧化氢传感器的过氧化氢浓度检测方法。
背景技术：
过氧化氢具有氧化、漂白、消毒和杀菌等多种功效，可任意比例与水混溶，是一种强氧化剂，水溶液俗称双氧水，为无色透明液体。其水溶液适用于医用伤口消毒及环境消毒和食品消毒。
对过氧化氢含量的快速准确检测在食品、制药、生物和环境分析中具有非常重要的意义。目前用于检测过氧化氢的方法很多，如滴定法、分光光度法以及电化学方法等。其中，电化学方法，特别是酶电化学生物传感器，由于其方法简单、灵敏度高等特点而被广泛应用于过氧化氢的测定。但由于酶容易受外界各种因素影响而失活，从而导致酶电化学生物传感器在检测过氧化氢浓度时稳定性和再生性较差，适用范围窄。
技术实现要素：
为解决上述问题，本发明提供一种重现性好、响应时间短、检测限低、灵敏度高、线性范围宽、稳定性好、成本低的基于无酶过氧化氢传感器的过氧化氢浓度检测方法。
本发明所采用的技术方案是：基于无酶过氧化氢传感器的过氧化氢浓度检测方法，包括以下步骤，①使用三电极体系，通过循环伏安法将铁氰化钐电沉积在工作电极表面，得到铁氰化钐修饰电极；②将铁氰化钐修饰电极浸泡到硝酸银溶液中，通过置换反应获得银/铁氰化钐复合纳米材料修饰电极，即无酶过氧化氢传感器；③以PBS为检测底液，以步骤②中所得的无酶过氧化氢传感器为工作电极，采用时间-电流法对过氧化氢溶液浓度进行检测。
对上述技术方案的进一步改进为，步骤①中，三电极体系为，玻碳电极为工作电极，甘汞电极为参比电极，铂电极为辅助电极，电沉积时电解质溶液的组成为0.2mol/L KCl、5mmol/L SmCl3、5mmol/L铁氰化钾。
对上述技术方案的进一步改进为，步骤①中，电沉积时电位为-0.2V～0.8V，扫描速率为30mV/s～70mV/s，扫描圈数为15圈～25圈。
对上述技术方案的进一步改进为，步骤②中，硝酸银溶液浓度为0.005mol/L～0.015mol/L，置换反应时间为3h～5h。
对上述技术方案的进一步改进为，步骤③中，检测电位为-0.5V～-0.1V，检测底液PBS浓度为0.2M
本发明的有益效果为：
1、本发明的基于无酶过氧化氢传感器的过氧化氢浓度检测方法，通过银/铁氰化钐复合材料修饰玻碳电极在无酶的条件下与过氧化氢分子间的电化学反应对过氧化氢浓度进行检测，克服了原有酶电极受温度、湿度等环境因素影响而精确度不高、寿命短、重现性差的问题，提高了过氧化氢的检测精度。同时，由于玻碳电极是采用银/铁氰化钐复合材料进行修饰，提高了电极的响应电流，从而降低了过氧化氢的检测限，过氧化氢浓度50μmol/L～250μmol/L范围内，响应电流与H2O2浓度呈良好的线性关系，线性回归方程为：I(mA)＝5.45458E-9C(μmol/L)—1.59964E-6，R2＝0.995。
2、本发明中制备的无酶过氧化氢传感器，一方面，制备方法简单，第二方面，由于在检测时不需酶，无酶过氧化氢传感器稳定性好，重现性好，具有较高的专一性和抗干扰性，第三方面，能直接用于过氧化氢的快速电化学测定，在测定过氧化氢时，检测效率高，准确度高、响应时间短、检测限低、灵敏度高、线性范围宽、稳定性好、成本低。
3、在制备无酶过氧化氢传感器时，采用循环伏安法，三电极体系中，以玻碳电极为工作电极，甘汞电极为参比电极，铂电极为辅助电极，在铁氰化钐溶液(0.2mol/L KCl、5mmol/L SmCl、5mmol/L六氰合铁(Ⅲ)酸钾(铁氰化钾))下工作。工作电位范围为-0.2V～0.8V，以50mV/s的扫描速率，连续扫描20圈。铁氰化钐在玻碳电极表面形成的机理为：在-0.2V～0.8V电位范围内循环伏安法扫描的过程中，Fe(CN)63-在玻碳电极的表面被还原成Fe(CN)64-，然后与溶液中的Sm3+离子反应生成SmHCF沉积在玻碳电极表面，形成铁氰化钐修饰电极，该修饰电极化学性质稳定，专一性和抗干扰性好，且采用此工作电位和扫描速率，能加快铁氰化钐在玻碳电极表面的沉积。
4、配置不同浓度的硝酸银溶液，超声10分钟后，将已经用铁氰化钐修饰过的玻碳电极，浸泡到配置好的不同浓度的硝酸银溶液中，将银置换到修饰过铁氰化钐的玻碳电极上，其中，硝酸银溶液为0.005mol/L～0.015mol/L，置换反应时间为3h～5h，采用此浓度范围的硝酸银溶液，配合此范围的反应时间，置换效果最好，所得的银/铁氰化钐复合材料SEM表征最理想，特别是选用0.01mol/L的硝酸银溶液、置换反应4h，所得的银/铁氰化钐复合材料SEM表征最理想。这主要是因为当硝酸银溶液浓度过低时，溶液中银离子浓度低，铁氰化钐修饰电极中的铁置换程度不够，当硝酸银溶液浓度过高时，溶液中银离子浓度高，铁氰化钐修饰电极中的铁置换过度，无法形成稳定的银/铁氰化钐复合材料修饰玻碳电极，造成电极表面SEM表征不理想。
5、本发明的检测方法，抗干扰性能好，在相同的测试条件下，常见的干扰物质如抗坏血酸、多巴胺和尿酸等均不产生明显的电流响应。由于并没有采用常见的生物酶进行修饰，该无酶过氧化氢传感器电极具有非常好的稳定性，常温环境下存放20天后，电流响应可保持在90％以上。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明作进一步的说明。
基于无酶过氧化氢传感器的过氧化氢浓度检测方法
①使用三电极体系，通过循环伏安法将铁氰化钐电沉积在工作电极表面，得到铁氰化钐修饰电极；②将铁氰化钐修饰电极浸泡到硝酸银溶液中，通过置换反应获得银/铁氰化钐复合纳米材料修饰电极，即无酶过氧化氢传感器；③以PBS为检测底液，以步骤②中所得的无酶过氧化氢传感器为工作电极，采用时间-电流法对过氧化氢溶液浓度进行检测。
本实施例中，步骤①中，三电极体系为，玻碳电极为工作电极，甘汞电极为参比电极，铂电极为辅助电极，电沉积时电解质溶液的组成为0.2mol/L KCl、5mmol/L SmCl3、5mmol/L铁氰化钾，电沉积时电位为-0.5V，扫描速率为50mV/s，扫描圈数为20圈。
本实施例中，步骤②中，硝酸银溶液浓度为0.01mol/L，置换反应时间为4h。
采用本发明制备的无酶过氧化氢传感器，一方面，制备方法简单，第二方面，由于在检测时不需酶，无酶过氧化氢传感器稳定性好，重现性好，具有较高的专一性和抗干扰性。
采用循环伏安法在三电极体系中，以玻碳电极为工作电极，甘汞电极为参比电极，铂电极为辅助电极，在铁氰化钐溶液(0.2mol/L KCl；5mmol/L SmCl；5mmol/L六氰合铁(Ⅲ)酸钾(铁氰化钾))下工作。工作电位范围为-0.2V～0.8V，以50mV/s的扫描速率，连续扫描20圈。铁氰化钐在玻碳电极表面形成的机理为：在-0.5V电位范围内循环伏安法扫描的过程中，Fe(CN)63-在玻碳电极的表面被还原成Fe(CN)64-，然后与溶液中的Sm3+离子反应生成SmHCF沉积在玻碳电极表面，形成铁氰化钐修饰电极，该修饰电极化学性质稳定，专一性和抗干扰性好，且采用此工作电位和扫描速率，能加快铁氰化钐在玻碳电极表面的沉积。
配置不同浓度的硝酸银溶液，超声10分钟后，将已经用铁氰化钐修饰过的玻碳电极，浸泡到配置好的不同浓度的硝酸银溶液中，将银置换到修饰过铁氰化钐的玻碳电极上，其中，硝酸银溶液为0.005mol/L～0.015mol/L，置换反应时间为3h～5h，采用此浓度范围的硝酸银溶液，配合此范围的反应时间，置换效果最好，所得的银/铁氰化钐复合材料SEM表征最理想，特别是选用0.01mol/L的硝酸银溶液、置换反应4h，所得的银/铁氰化钐复合材料SEM表征最理想。这主要是因为当硝酸银溶液浓度过低时，溶液中银离子浓度低，铁氰化钐修饰电极中的铁置换程度不够，当硝酸银溶液浓度过高时，溶液中银离子浓度高，铁氰化钐修饰电极中的铁置换过度，无法形成稳定的银/铁氰化钐复合材料修饰玻碳电极，造成电极表面SEM表征不理想。
本实施例中，步骤③中，以PBS为检测底液，以无酶过氧化氢传感器为工作电极，采用时间-电流法对过氧化氢溶液进行检测。检测时，检测电位为-0.2V，检测底液PBS浓度为0.2M。
本检测方法，通过银/铁氰化钐复合材料修饰玻碳电极在无酶的条件下与过氧化氢分子间的电化学反应对过氧化氢浓度进行检测，克服了原有酶电极受温度、湿度等环境因素影响而精确度不高、寿命短、重现性差的问题，提高了过氧化氢的检测精度。同时，由于玻碳电极是采用银/铁氰化钐复合材料进行修饰，提高了电极的响应电流，从而降低了过氧化氢的检测限，过氧化氢浓度50μmol/L～250μmol/L范围内，响应电流与H2O2浓度呈良好的线性关系，线性回归方程为：I(mA)＝5.45458E-9C(μmol/L)—1.59964E-6，R2＝0.995。且在相同的测试条件下，常见的干扰物质如抗坏血酸、多巴胺和尿酸等均不产生明显的电流响应。将无酶过氧化氢传感器于常温环境下存放20天后，电流响应可保持在90％以上。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。