一种石墨烯/聚苯胺纳米线阵列生物传感器的制备方法及应用，属于生物传感技术领域。
背景技术：
2012年9月发表的《降钙素原急诊临床应用的专家共识》指出：脓毒症患者的降钙素原水平明显高于非脓毒症患者，且降钙素原升高对细菌感染导致的脓毒症特异性很高，可作为诊断脓毒症和鉴别严重细菌感染的生物标志物，与单纯的临床检测标准相比，降钙素原检测可显著提高脓毒症诊断的敏感性和特异性，因此，实现血清中降钙素原浓度的快速、灵敏、精准检测，对于脓毒症的及早发现与治疗具有重要意义；目前用于检测降钙素原的方法主要是电化学生物传感器，由于电致化学发光技术结合了化学发光与电化学两种技术的优势，除了具有易于操作、可控性强、响应速度快等特点，其灵敏度也要比电化学更高，检测限也更低。基于电致化学发光技术制备的生物传感器具备了比电化学技术更强的优势，这为免疫新方法的提出提供了一种更为强有力的技术支持，本发明正是基于电致化学发光技术而提出的一种生物传感器的制备方法，旨在为弥补现有检测方法的不足，为降钙素原的早期临床检测提供一种全新的分析方法。
技术实现要素：
本发明的技术任务之一是为了弥补现有检测技术的不足，提供一种石墨烯/聚苯胺纳米线阵列生物传感器的制备方法，该方法制备过程简单、成本低、信号响应迅速，大大缩短了检测的时间，省时省力。
本发明的技术任务之二是提供所述免疫传感器的用途，该传感器能够快速检测降钙素原，具有灵敏度高、特异性强、重现性好的优点，检出限为1.2fg/ml，线性范围5fg/ml-50ng/ml，在临床检测中有着较大的潜在应用价值。
本发明的技术方案如下
1.一种石墨烯/聚苯胺纳米线阵列免疫传感器的制备方法及应用，包括以下步骤：
（1）将直径为4mm的玻碳电极依次用1.0μm、0.3μm、0.05μm氧化铝做抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴加6μl、浓度为2~4mg/ml捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，置于4°c下晾干；
（3）滴加3μl、质量分数为1~3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干；
（4）滴加6μl降钙素原的标准溶液或未知浓度的溶液，37°c下孵化0.5~2h，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干；
（5）滴加6μl、浓度为2~4mg/ml的检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干，传感器构建完毕。
2.如权利要求1所述的一种石墨烯/聚苯胺纳米线阵列免疫传感器的制备方法及应用，所述捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，制备步骤如下：
（1）向0.13~0.15g的四氯钯酸钠与0.13~0.15g的柠檬酸钠固体中，加入30~50ml的去离子水，将混合固体均匀溶解，然后，将0.5~0.7ml的硼氢化钠溶液逐滴加入混合液，最后，通过持续搅拌得到黑色的钯纳米粒子，避光储存于4°c下；
（2）将0.4~0.6g氧化石墨烯加入含有90~110ml无水二甲基甲酰胺的烧杯当中，随后，在冰水浴的条件下，取2.78~2.98g1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐加入到上悬浮液中，并且在氮气氛围下搅拌1~3h，然后加入1.8~2.0ml的1,3-二氨基丙烷在室温下搅拌过夜，最后用水和乙醇分别洗涤后干燥得到氨基化氧化石墨烯；
（3）取5~15mg氨基化氧化石墨烯分散在5~15ml盐酸溶液中，经过超声波处理15~45min，将其分散均匀，悬浊液放在冰浴中冷却至0°c，然后将0.4~0.6ml苯胺加入到氨基化氧化石墨烯中继续搅拌，并缓慢加入5~15ml溶有1.25~1.45g过硫酸钾的溶液，该反应在冰浴中持续4~6h后，加入浓度为0.1mol/l的盐酸溶液去除所有未反应的反应物，用去离子水和己烷各洗涤3次后，干燥12h，得到石墨烯/聚苯胺溶液；
（4）将1~3ml、浓度为2mg/ml的石墨烯/聚苯胺溶液与1~3ml的钯纳米粒子溶液混合，避光振荡24~48h，离心分离弃去上清液，分散到1ml超纯水中，制得钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，随后加入50~150ul、浓度为1ug/ml的捕获抗体ab1溶液振荡6~18h后，经过离心分离后分散到2ml、ph7.4的磷酸盐缓冲溶液中，得到捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液。
3.如权利要求1所述的一种石墨烯/聚苯胺纳米线阵列免疫传感器的制备方法及应用，所述检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，制备步骤如下：
（1）将浓度为0.01~0.03mol/l五水合四氯化锡、浓度为0.001~0.003mol/l六水合硝酸铈，0.05~0.07mol/l硫代乙酰胺，0.4~0.6g溴化十六烷基三甲铵完全溶解于乙醇和蒸馏水的混合物，将混合物转移至200ml聚四氟乙烯内衬的高温反应釜中，温度保持在180°c，反应24~48h，随后冷却至室温。所得到的固体离心洗涤多次后，在60°c的真空干燥箱中干燥12~36h，然后在500°c，氩气保护下烧结2~4h，得到铈掺杂二硫化锡固体;
（2）称取1~3mg的铈掺杂二硫化锡分散到0.5~1.5ml去离子水中，配成溶液，紧接着加入5~15μl、浓度为5mmol/l鲁米诺，振荡6~18h后，通过离心分离获得沉淀物，最终，将其重新分散到1ml去离子水中，得到的目标溶液铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液;
（3）在上述溶液中，加入100~300μl、浓度为10mg/ml的检测抗体ab2溶液，在4°c下振荡孵化6~18h，离心后分散到1mlph7.4的磷酸盐缓冲溶液中得到检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，置于4°c下储存备用。
4.如权利要求1所述的制备方法制备的电致化学发光传感器用于检测降钙素原的应用。
5.如权利要求4所述的用于检测降钙素原的应用，步骤如下：
（1）参数设置：超微弱电致化学发光仪的光电倍增管高压设置为800v，电化学工作站循环伏安扫描电位范围设置为0~0.7v，扫描速率设置为0.1v/s；
（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以权利要求1制备的传感器为工作电极，将孵化一系列标准浓度降钙素原的传感器浸入10ml含35~65mmol/l过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.2fg/ml，线性范围为5fg/ml-50ng/ml；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算得到该试剂样品中的降钙素原浓度。
本发明的有益成果
（1）首次以钯功能化石墨烯/聚苯胺纳米线阵列作为传感器基底，该阵列结构具有高度有序的三维结构，具有很大的比表面积，可以为固载捕获抗体提供大量的结合位点，同时结合石墨烯与聚苯胺优秀的导电性，该阵列可以形成三维结构的电子运输网络，加快了传感基底的电子传递，有利于提高传感器的导电性；
（2）首次以羧基化铈掺杂二硫化锡纳米片作为信标物固载发光分子鲁米诺，超氧根自由基的产生是鲁米诺发光的主要原因，二硫化锡对过氧化氢分解成超氧根自由基具有良好的催化作用，而铈元素的掺杂则可以进一步加快过氧化氢的快速分解，从而得到更多的超氧根自由基，显著增强鲁米诺的电致化学发光激发；
（3）本发明基于电致化学发光技术，首次提出了一种基于石墨烯/聚苯胺纳米线阵列免疫传感器的制备方法，该方法具有制备简单、成本低、响应速度快的优点，弥补了现有检测技术的不足，利用该方法制备的免疫传感器用于降钙素原的检测，具有灵敏度高、重现好、便携的优点，其检出限可达1.2fg/ml，线性范围宽至5fg/ml-50ng/ml，为降钙素原的早期临床检测提供一种全新的分析方法。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1一种石墨烯/聚苯胺纳米线阵列免疫传感器的制备方法及应用，包括以下步骤：
（1）将直径为4mm的玻碳电极依次用1.0μm、0.3μm、0.05μm氧化铝做抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴加6μl、浓度为2mg/ml捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，置于4°c下晾干；
（3）滴加3μl、质量分数为1%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干；
（4）滴加6μl降钙素原的标准溶液或未知浓度的溶液，37°c下孵化0.5h，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干；
（5）滴加6μl、浓度为2mg/ml的检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干，传感器构建完毕。
实施例2一种石墨烯/聚苯胺纳米线阵列免疫传感器的制备方法及应用，包括以下步骤：
（1）将直径为4mm的玻碳电极依次用1.0μm、0.3μm、0.05μm氧化铝做抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴加6μl、浓度为3mg/ml捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，置于4°c下晾干；
（3）滴加3μl、质量分数为2%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干；
（4）滴加6μl降钙素原的标准溶液或未知浓度的溶液，37°c下孵化1.5h，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干；
（5）滴加6μl、浓度为3mg/ml的检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干，传感器构建完毕。
实施例3一种石墨烯/聚苯胺纳米线阵列免疫传感器的制备方法及应用，包括以下步骤：
（1）将直径为4mm的玻碳电极依次用1.0μm、0.3μm、0.05μm氧化铝做抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴加6μl、浓度为4mg/ml捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，置于4°c下晾干；
（3）滴加3μl、质量分数为3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干；
（4）滴加6μl降钙素原的标准溶液或未知浓度的溶液，37°c下孵化2h，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干；
（5）滴加6μl、浓度为4mg/ml的检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，用ph7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，置于4°c晾干，传感器构建完毕。
实施例4捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，制备步骤如下：
（1）向0.13g的四氯钯酸钠与0.13g的柠檬酸钠固体中，加入30ml的去离子水，将混合固体均匀溶解，然后，将0.5ml的硼氢化钠溶液逐滴加入混合液，最后，通过持续搅拌得到黑色的钯纳米粒子，避光储存于4°c下；
（2）将0.4g氧化石墨烯加入含有90ml无水二甲基甲酰胺的烧杯当中，随后，在冰水浴的条件下，取2.78g1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐加入到上悬浮液中，并且在氮气氛围下搅拌1h，然后加入1.8ml的1,3-二氨基丙烷在室温下搅拌过夜，最后用水和乙醇分别洗涤后干燥得到氨基化氧化石墨烯；
（3）取5mg氨基化氧化石墨烯分散在5ml盐酸溶液中，经过超声波处理15min，将其分散均匀，悬浊液放在冰浴中冷却至0°c，然后将0.4ml苯胺加入到氨基化氧化石墨烯中继续搅拌，并缓慢加入5ml溶有1.25g过硫酸钾的溶液，该反应在冰浴中持续4h后，加入浓度为0.1mol/l的盐酸溶液去除所有未反应的反应物，用去离子水和己烷各洗涤3次后，干燥12h，得到石墨烯/聚苯胺溶液；
（4）将1ml、浓度为2mg/ml的石墨烯/聚苯胺溶液与1ml的钯纳米粒子溶液混合，避光振荡24h，离心分离弃去上清液，分散到1ml超纯水中，制得钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，随后加入50ul、浓度为1ug/ml的捕获抗体ab1溶液振荡6h后，经过离心分离后分散到2ml、ph7.4的磷酸盐缓冲溶液中，得到捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液。
实施例5捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，其特征在于，制备步骤如下：
（1）向0.14g的四氯钯酸钠与0.14g的柠檬酸钠固体中，加入40ml的去离子水，将混合固体均匀溶解，然后，将0.6ml的硼氢化钠溶液逐滴加入混合液，最后，通过持续搅拌得到黑色的钯纳米粒子，避光储存于4°c下；
（2）将0.5g氧化石墨烯加入含有100ml无水二甲基甲酰胺的烧杯当中，随后，在冰水浴的条件下，取2.88g1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐加入到上悬浮液中，并且在氮气氛围下搅拌2h，然后加入1.9ml的1,3-二氨基丙烷在室温下搅拌过夜，最后用水和乙醇分别洗涤后干燥得到氨基化氧化石墨烯；
（3）取10mg氨基化氧化石墨烯分散在10ml盐酸溶液中，经过超声波处理35min，将其分散均匀，悬浊液放在冰浴中冷却至0°c，然后将0.5ml苯胺加入到氨基化氧化石墨烯中继续搅拌，并缓慢加入10ml溶有1.35g过硫酸钾的溶液，该反应在冰浴中持续5h后，加入浓度为0.1mol/l的盐酸溶液去除所有未反应的反应物，用去离子水和己烷各洗涤3次后，干燥12h，得到石墨烯/聚苯胺溶液；
（4）将2ml、浓度为2mg/ml的石墨烯/聚苯胺溶液与2ml的钯纳米粒子溶液混合，避光振荡36h，离心分离弃去上清液，分散到1ml超纯水中，制得钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，随后加入100ul、浓度为1ug/ml的捕获抗体ab1溶液振荡12h后，经过离心分离后分散到2ml、ph7.4的磷酸盐缓冲溶液中，得到捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液。
实施例6捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，其特征在于，制备步骤如下：
（1）向0.15g的四氯钯酸钠与0.15g的柠檬酸钠固体中，加入50ml的去离子水，将混合固体均匀溶解，然后，将0.7ml的硼氢化钠溶液逐滴加入混合液，最后，通过持续搅拌得到黑色的钯纳米粒子，避光储存于4°c下；
（2）将0.6g氧化石墨烯加入含有110ml无水二甲基甲酰胺的烧杯当中，随后，在冰水浴的条件下，取2.98g1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐加入到上悬浮液中，并且在氮气氛围下搅拌3h，然后加入2.0ml的1,3-二氨基丙烷在室温下搅拌过夜，最后用水和乙醇分别洗涤后干燥得到氨基化氧化石墨烯；
（3）取15mg氨基化氧化石墨烯分散在15ml盐酸溶液中，经过超声波处理45min，将其分散均匀，悬浊液放在冰浴中冷却至0°c，然后将0.6ml苯胺加入到氨基化氧化石墨烯中继续搅拌，并缓慢加入15ml溶有1.45g过硫酸钾的溶液，该反应在冰浴中持续6h后，加入浓度为0.1mol/l的盐酸溶液去除所有未反应的反应物，用去离子水和己烷各洗涤3次后，干燥12h，得到石墨烯/聚苯胺溶液；
（4）将3ml、浓度为2mg/ml的石墨烯/聚苯胺溶液与3ml的钯纳米粒子溶液混合，避光振荡48h，离心分离弃去上清液，分散到1ml超纯水中，制得钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液，随后加入150ul、浓度为1ug/ml的捕获抗体ab1溶液振荡18h后，经过离心分离后分散到2ml、ph7.4的磷酸盐缓冲溶液中，得到捕获抗体ab1标记的钯杂化石墨烯/聚苯胺溶液。
实施例7检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，制备步骤如下：
（1）将浓度为0.01mol/l五水合四氯化锡、浓度为0.001mol/l六水合硝酸铈，0.05mol/l硫代乙酰胺，0.4g溴化十六烷基三甲铵完全溶解于乙醇和蒸馏水的混合物，将混合物转移至200ml聚四氟乙烯内衬的高温反应釜中，温度保持在180°c，反应24h，随后冷却至室温。所得到的固体离心洗涤多次后，在60°c的真空干燥箱中干燥12h，然后在500°c，氩气保护下烧结2h，得到铈掺杂二硫化锡固体;
（2）称取1mg的铈掺杂二硫化锡分散到0.5ml去离子水中，配成溶液，紧接着加入5μl、浓度为5mmol/l鲁米诺，振荡6h后，通过离心分离获得沉淀物，最终，将其重新分散到1ml去离子水中，得到的目标溶液铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液;
（3）在上述溶液中，加入100μl、浓度为10mg/ml的检测抗体ab2溶液，在4°c下振荡孵化6h，离心后分散到1mlph7.4的磷酸盐缓冲溶液中得到检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，置于4°c下储存备用。
实施例8检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，制备步骤如下：
（1）将浓度为0.02mol/l五水合四氯化锡、浓度为0.002mol/l六水合硝酸铈，0.06mol/l硫代乙酰胺，0.5g溴化十六烷基三甲铵完全溶解于乙醇和蒸馏水的混合物，将混合物转移至200ml聚四氟乙烯内衬的高温反应釜中，温度保持在180°c，反应36h，随后冷却至室温。所得到的固体离心洗涤多次后，在60°c的真空干燥箱中干燥24h，然后在500°c，氩气保护下烧结3h，得到铈掺杂二硫化锡固体;
（2）称取2mg的铈掺杂二硫化锡分散到1ml去离子水中，配成溶液，紧接着加入10μl、浓度为5mmol/l鲁米诺，振荡12h后，通过离心分离获得沉淀物，最终，将其重新分散到1ml去离子水中，得到的目标溶液铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液;
（3）在上述溶液中，加入200μl、浓度为10mg/ml的检测抗体ab2溶液，在4°c下振荡孵化12h，离心后分散到1mlph7.4的磷酸盐缓冲溶液中得到检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，置于4°c下储存备用。
实施例9检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，制备步骤如下：
（1）将浓度为0.03mol/l五水合四氯化锡、浓度为0.003mol/l六水合硝酸铈，0.07mol/l硫代乙酰胺，0.6g溴化十六烷基三甲铵完全溶解于乙醇和蒸馏水的混合物，将混合物转移至200ml聚四氟乙烯内衬的高温反应釜中，温度保持在180°c，反应48h，随后冷却至室温。所得到的固体离心洗涤多次后，在60°c的真空干燥箱中干燥36h，然后在500°c，氩气保护下烧结4h，得到铈掺杂二硫化锡固体;
（2）称取3mg的铈掺杂二硫化锡分散到1.5ml去离子水中，配成溶液，紧接着加入15μl、浓度为5mmol/l鲁米诺，振荡18h后，通过离心分离获得沉淀物，最终，将其重新分散到1ml去离子水中，得到的目标溶液铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液;
（3）在上述溶液中，加入300μl、浓度为10mg/ml的检测抗体ab2溶液，在4°c下振荡孵化18h，离心后分散到1mlph7.4的磷酸盐缓冲溶液中得到检测抗体ab2标记的铈掺杂二硫化锡-鲁米诺溶液，置于4°c下储存备用。
实施例10将免疫传感器用于检测降钙素原的应用，检测步骤如下：
（1）参数设置：超微弱电致化学发光仪的光电倍增管高压设置为800v，电化学工作站循环伏安扫描电位范围设置为0~0.7v，扫描速率设置为0.1v/s；
（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以权利要求1制备的传感器为工作电极，将孵化一系列标准浓度降钙素原的传感器浸入10ml含35mmol/l过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.2fg/ml，线性范围为5fg/ml-50ng/ml；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算得到该试剂样品中的降钙素原浓度。
实施例11将免疫传感器用于检测降钙素原的应用，检测步骤如下：
（1）参数设置：超微弱电致化学发光仪的光电倍增管高压设置为800v，电化学工作站循环伏安扫描电位范围设置为0~0.7v，扫描速率设置为0.1v/s；
（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以权利要求1制备的传感器为工作电极，将孵化一系列标准浓度降钙素原的传感器浸入10ml含55mmol/l过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.2fg/ml，线性范围为5fg/ml-50ng/ml；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算得到该试剂样品中的降钙素原浓度。
实施例12将免疫传感器用于检测降钙素原的应用，检测步骤如下：
（1）参数设置：超微弱电致化学发光仪的光电倍增管高压设置为800v，电化学工作站循环伏安扫描电位范围设置为0~0.7v，扫描速率设置为0.1v/s；
（2）测试：以银/氯化银电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，以权利要求1制备的传感器为工作电极，将孵化一系列标准浓度降钙素原的传感器浸入10ml含65mmol/l过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液中进行电致化学发光测试，得到孵化不同浓度降钙素原时对应的电致化学发光信号强度，绘制工作曲线，其检出限为1.2fg/ml，线性范围为5fg/ml-50ng/ml；
（3）将孵化未知浓度的降钙素原实际样品的电致化学发光传感器进行测试得到相应的信号强度，据此根据工作曲线计算得到该试剂样品中的降钙素原浓度。