一种组织细胞自动分离器的制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及细胞分离，特别涉及一种组织细胞自动分离器。
【背景技术】
[0002]组织细胞是进行细胞生物学、分子生物学、免疫学、遗传学、肿瘤学等生命科学研宄的重要材料，例如进行流式细胞术(flow cytometry，FCM)检测的前提即要求样品为单细胞悬液，而大多数实体组织都难以制成高质量的单细胞悬液样本，因而大大限制了 FCM对实体组织特别是实体瘤的分析和研宄。组织细胞分离器用于将机体组织如肺、肝、肿瘤等分散为单个细胞悬液，将实体组织分离为单个细胞的传统制备策略一般采用手工方法，主要有机械剪切法、酶消化法、去污剂化学处理法、针头抽吸法等。
[0003]为了以温和的、安全的、省时的、标准的自动化方法方便地从组织中分离单个细胞悬液，以及将组织块制备成匀浆，美国BD公司推出了 Medimachine组织样本制备仪，德国美天旎公司推出了 gentle MACS组织分离器。
[0004]Gentle MACS组织分离器使用专门的一次性分离管。该管的管盖上带有特殊设计的转子及定子，中心有隔膜封闭的小孔。主要有两种分离管，C管和M管。C管转子和定子的独特几何设计使其可以有效、温和地处理组织结构，得到高回收率的活细胞。M管可以处理组织块和细胞，用于分离亚细胞组分，例如核酸。这两种管的中心都有一个隔膜封闭的小孔，能保证在无菌条件下，在密闭系统中安全地处理样品。完全不需要打开试管盖，即可添加酶及其他溶液，或者取出分离出来的细胞或者匀浆溶液。
[0005]BD公司推出的产品Medimachine组织样本制备仪是采用机械剪切的方法将剪成小块的实体组织制备成单细胞或单细胞核悬液的自动化系统。样品制备过程不需加任何消化酶或去污剂等，它由Medimachine、Medicon及Filcon 3部分组成。其中Medimachine为主机，后两者为配件。Medicon为一圆形聚乙烯元件，底部设有一个固定的不锈钢网筛，上有约100个正六边形筛孔(直径约为I mm)，每个筛孔周围有6个经特殊设计的微型刀片以进行精细的组织切割，主机则可以每分钟100转的转速带动Medicon中轴的旋转片转动。Filcon为一直径1.5 cm的细胞过滤器，可按不同孔径对组织细胞混悬液进行过滤。
[0006]上述方法均需在细胞分离前以人力将组织块剪切成1.0mm3大小的微小组织块，既费力、费时，又不够均匀，还增加了污染的几率。
【发明内容】
[0007]本发明目的是:提供一种操作简便快捷的组织细胞自动分离器。
[0008]本发明的技术方案是:
一种组织细胞自动分离器，将组织细胞分离成单细胞，所述分离器包括分离管，所述分离管包括管壁及位于管壁内的管芯，所述管壁顶部封闭，底部盖有管盖，所述管芯包括定子套管和位于套管中的转子，所述管盖上设有转子接头，转子与转子接头连接，所述分离器还包括位于分离管外部的电机，所述电机通过转子接头为转子提供旋转动力。
[0009]优选的，所述管芯内从上至下依次分为阿基米德螺旋管区、细胞分离区和负压旋切区，所述阿基米德螺旋管区由定子套管和转子的螺旋杆共同组成阿基米德螺旋管，细胞分离区内装有分离棒，分离棒上有密集细小的齿状物，负压旋切区内装有旋切刀头，所述螺旋杆、分离棒和旋切刀头依次连接组成转子，旋切刀头底部连接转子接头。
[0010]优选的，所述定子套管下部对应旋切刀头区域设有若干均匀分布的孔洞。
[0011]进一步优选的，所述孔洞的直径为0.8-1.2mm。
[0012]优选的，所述转子通过转子接头与管盖的接合处密封。
[0013]优选的，所述分离管外部还设有防护保温罩。
[0014]进一步优选的，所述防护保温罩内装有温度探头和热电制冷片，所述温度探头和热电制冷片分别与一微处理器连接。
[0015]进一步优选的，所述防护保温罩内还装有一个与微处理器连接的循环风扇。
[0016]优选的，所述微处理器还连接到电机。
[0017]进一步优选的，所述微处理器上还连接一触控屏。
[0018]本发明的优点是:
1.本发明所提供的组织细胞自动分离器，使用特殊管芯的自动系统，微处理器定义特殊的应用程序(时间、速度、方向)将操作规程优化，可以方便地处理样本，使细胞分离制备过程标准化、程序化，减少人为因素的影响，变操作者依赖性为非操作者依赖性，且所需组织样本在分离前只需简单制备成数毫米大小的组织块即可，分离器可自动将其旋切成
1.0mm3大小的微小组织块，进而分离得到单细胞悬液，用于细胞分选、分析或者培养。活检及镜检组织均可适用。
[0019]2.本发明具有防护保温罩，自动控温，利于消化酶活性发挥，同时保障用户安全性，实现无菌操作。
[0020]3.本发明采用旋切式样本切割，大小均匀。
[0021]4.本发明操作温和，且简便快捷。
【附图说明】
[0022]下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述:
图1为本发明所述的组织细胞分离器的结构原理；
图2为本发明的分离管的结构示意图；
图3为图2所示的分离管结构分解图；
图4为本发明的温度探头的原理图。
【具体实施方式】
[0023]实施例:
如图1所示，本发明所揭示的将组织分离成单细胞的组织细胞自动分离器，包括分离管，分离管下方装有电机，电机速度可调，可反转，可根据所设定的程序(时间、速度、方向)进行运转。所述分离管外部还设有防护保温罩，所述防护保温罩内装有温度探头、热电制冷片和循环风扇，所述温度探头、热电制冷片和循环风扇分别与一微处理器连接，实现防护保温罩内自动控温37°C，利于消化酶活性发挥。微处理器还连接电机，控制电机的旋转，所述微处理器上还连接一触控屏，用来输入运行参数及显示运行过程中情况。
[0024]如图2和3所示，所述分离管包括管壁I及位于管壁内的管芯2，所述管壁顶部封闭，底部盖有管盖3，所述管芯2包括定子套管4和位于套管4中的转子5，所述管盖3上设有转子接头，转子与转子接头连接，所述转子通过转子接头与管盖的接合处密封，分离管下方的电机通过转子接头为转子提供旋转动