一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物分析领域中的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高 效液相检测方法。
【背景技术】
[0002] 左卡尼汀（Levocarnitine)，又名左旋肉碱，其化学名为（R)-3-羧基-2-羟基-N， N，N-三甲基-1-丙胺氢氧化物，内盐，是一种国际公认安全无害的营养剂。其盐类常用的有 左卡尼汀盐酸盐、左卡尼汀酒石酸盐等。左卡尼汀是哺乳动物能量代谢中必需的体内天然 物质，其主要功能是促进脂类代谢。它既能将长链脂肪酸带进线粒体基质，并促进其氧化分 解，为细胞提供能量，又能将线粒体内产生的短链脂酰基输出。本品的补充可缓解因其体内 缺乏引起的脂肪代谢紊乱、骨骼肌和心肌等组织的功能障碍。卡尼汀有一个手性中心，有两 种光学异构体，即左旋体和右旋体，具有生物活性为左旋体，即左卡尼汀，右旋体为右卡尼 汀。为保证本品的质量及其安全性，需建立检测方法对右卡尼汀的含量进行控制。目前，关 于左卡尼汀及其盐类中右卡尼汀的含量的高效液相检测方法，为将本品衍生后，用C18柱 进行色谱分离，检测器为荧光检测器，方法比较复杂且耗时长。因此，研制开发一种简单、省 时、适于实时监测左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检测方法一直是亟待 解决的新课题。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相 检测方法，该方法采用环糊精及其衍生物键合硅胶手性固定相作为色谱柱的填充剂分离左 卡尼汀、右卡尼汀及左卡尼汀杂质A，用紫外检测器进行检测。通过该方法检测左卡尼汀及 其盐类产品中右卡尼汀含量，右卡尼汀与左卡尼汀之间、左卡尼汀与左卡尼汀杂质A之间 均能达良好分离，方法重复性、灵敏度、耐用性等均能符合要求，且操作简单、省时快速，适 用于左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀的含量控制。
[0004] 本发明的目的是这样实现的：一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效 液相检测方法，该检测方法包括如下步骤： (1) 色谱条件： 色谱柱：环糊精及其衍生物为填充剂的手性色谱柱； 检测器：紫外检测器； 流动相：由三乙胺-醋酸水溶液和乙腈配制的混合溶液； (2) 系统适用性溶液的制备： 精密称取左卡尼汀对照品、右卡尼汀对照品、左卡尼汀杂质A对照品各适量，加水溶解 并稀释； (3) 供试品溶液及对照溶液的制备： 精密称取样品适量，加水溶解并稀释，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，用 水稀释，作为对照溶液； (4)测定方法： 取系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录图谱，色谱峰按右卡尼汀、左卡尼汀、左卡尼 汀杂质A次序依次流出，上述三种成分色谱峰之间分离度均应大于1. 5 ;精密量取供试品溶 液与对照溶液，注入液相色谱仪，记录图谱，分别计算供试品液中右卡尼汀的峰面积和对照 溶液中左卡尼汀的峰面积， 右卡尼汀1
【主权项】
1. 一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检测方法，其特征在于：该 检测方法包括如下步骤： (1) 色谱条件： 色谱柱：环糊精及其衍生物为填充剂的手性色谱柱； 检测器：紫外检测器； 流动相：由三乙胺-醋酸水溶液和乙腈配制的混合溶液； (2) 系统适用性溶液的制备： 精密称取左卡尼汀对照品、右卡尼汀对照品、左卡尼汀杂质A对照品各适量，加水溶解 并稀释； (3) 供试品溶液及对照溶液的制备： 精密称取样品适量，加水溶解并稀释，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，用 水稀释，作为对照溶液； (4) 测定方法： 取系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录图谱，色谱峰按右卡尼汀、左卡尼汀、左卡尼 汀杂质A次序依次流出，上述三种成分色谱峰之间分离度均应大于1. 5 ;精密量取供试品溶 液与对照溶液，注入液相色谱仪，记录图谱，分别计算供试品液中右卡尼汀的峰面积和对照 溶液中左卡尼汀的峰面积， 右卡尼打
X0.5% 其中：=供试品溶液中右卡尼汀的峰面积； A左卡尼汀=对照溶液中左卡尼汀的峰面积。
2. 根据权利要求1所述的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检 测方法，其特征在于：所述色谱柱的填充剂选自环糊精键合硅胶、环糊精衍生物键 合硅胶，所述环糊精衍生物键合硅胶选自乙酰化的环糊精键合硅胶、二甲基化的 3 -环糊精键合硅胶、3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯衍生化的的0 -环糊精键合硅胶、2,6-二 硝基-4-三氟甲基苯甲醚衍生化的的环糊精键合硅胶、（S)-羟丙基醚衍生化的的 3 -环糊精键合硅胶、（R，S)-羟丙基醚衍生化的的0 -环糊精键合硅胶、高效（R，S)-羟丙 基醚衍生化的的环糊精键合硅胶。
3. 根据权利要求1所述的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检 测方法，其特征在于：所述填充剂的粒径为3. 5-10ym。
4. 根据权利要求1所述的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检 测方法，其特征在于：所述三乙胺-醋酸水溶液中三乙胺的体积浓度为〇. 05-0.6%，pH为 4. 0-6. 5 ;所述三乙胺-醋酸水溶液的配制方法为量取三乙胺试剂，加水稀释制成体积浓度 为0. 05-0.6%的溶液，用醋酸水溶液调节pH为4. 0-6. 5。
5. 根据权利要求1所述的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检 测方法，其特征在于：所述流动相中三乙胺-醋酸水溶液与乙腈的体积比为15-35: 85-65。
6. 根据权利要求1所述的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检 测方法，其特征在于：所述流动相的流速为〇.8-1.2ml/分钟，所述系统适用性溶液、供试品 溶液、对照溶液的进样量为10-100y1，所述紫外检测器的检测波长为205nm，所述色谱柱 的柱温为10-30°C。
7. 根据权利要求1所述的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检 测方法，其特征在于：所述盐类选自盐酸盐、酒石酸盐、富马酸盐，所述左卡尼汀及其盐类 产品选自左卡尼汀及其盐类原料药、左卡尼汀及其盐类药物组合物，所述药物组合物选自 口服剂型、注射剂型，所述口服剂型选自片剂、胶囊剂、口服溶液剂，所述注射剂型选自注射 液、注射用无菌粉末。
8. 根据权利要求1所述的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相 检测方法，其特征在于：所述系统适用性溶液详细制备方法为精密称取左卡尼汀对照品约 200mg，右卡尼汀对照品约2mg，置同一10ml容量瓶中；另取左卡尼汀杂质A对照品约2mg， 精密称定，置200ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为左卡尼汀杂质A对照品溶液；精 密量取左卡尼汀杂质A对照品溶液1.0ml置上述10ml容量瓶中，加水超声溶解并稀释至刻 度。
9. 根据权利要求1所述的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量 的高效液相检测方法，其特征在于：所述左卡尼汀杂质A的英文化学名称为 (E)-or(Z)-4-(trimethylammonio)but-2-enoate〇
【专利摘要】一种应用于药物检测领域中的一种左卡尼汀及其盐类产品中右卡尼汀含量的高效液相检测方法，该方法采用手性固定相高效液相色谱法,手性固定相选用环糊精及其衍生物键合硅胶填料，使得左卡尼汀、右卡尼汀、左卡尼汀杂质A三种成分的分离效果好、方法重复性及耐用性好；流动相选用三乙胺-醋酸水溶液与乙腈体系,该流动相对手性色谱柱基本无损伤，色谱峰保留时间重复性好，峰型对称。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104698101
【申请号】CN201510111998
【发明人】王虹, 王洁, 黄文姝, 刘心, 董爱军, 岳静, 刘佳
【申请人】东北制药集团股份有限公司
【公开日】2015年6月10日
【申请日】2015年3月16日