同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种可同时测定食品或保健品中多种水溶性维生素含量的方法。
【背景技术】
[0002] 维生素是维持人体正常物质代谢和某些特殊生理功能不可缺少的低分子有机化 合物，多数是辅基和酶的组成部分。维生素根据其物理性质可分为脂溶性维生素和水溶性 维生素。水溶性维生素包括B族维生素（VB 1JB2JB3JB6JB1^)Jc,泛酸等。人体每天 需要摄取不同的维生素来参与人体的正常生理代谢过程，而这些维生素主要来源于食物。 但是人体摄取的维生素太多和太少都有可能引起身体的不适，严重的还会引起病变。例如， 能促进食欲的维生素 VB9 (叶酸），不仅存在于绿色蔬菜中，也存在于肝脏和肾脏中，肠道中 细菌也能合成。VB9缺乏会引起骨髓巨红细胞成熟受损，引起巨红细胞贫血，白血球减少症， 还会导致孕妇妊娠中毒、早产等。因此，测定食品和饮料中维生素含量具有十分重要的意 义。
[0003] 食品中多种维生素含量的检测方法已有一些报道，但多数是对基体较为简单，维 生素种类少的食品进行检测。在液相色谱中，为了提高检测的灵敏度，也采用多种检测器并 用。韩雅珊等同时检测四种维生素（VB 1JB2JB5JB6)，在检测波长为254nm下测定VB 1JB2 和VB5，而在荧光（EX295/EX395nm)条件下测定VB6。廖国东等人采用胶束液相色谱分离测 定婴儿食品中的水溶性维生素，使用十二烷基磺酸钠的水溶液为流动相，加入三乙胺等有 机改性剂，考察了 6种水溶性维生素 （VBp VB2、VB6、VC、PP)的最佳分离条件，与其他相关 报道相比，该方法结果比较满意，但分析的维生素种类仍然较少。
[0004] 高效液相色谱法由于能进行快速、灵敏准确的测定，并能与其他分析技术联用等 优点，已经成为了目前最常用的分析手段，如中国专利申请201210584541. 4中揭示的一种 检测水溶性维生素的方法，虽然能同时测定维生素&、B2、B3、B 6四种维生素，但测试种类仍 然较少。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于解决上述技术问题，提出一种同时测定食品或保健品当中多种 水溶性维生素含量的方法。
[0006] 本发明的技术方案是：一种同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的 方法，所述食品或保健品包括片剂、粉剂、胶囊、软胶囊、冲剂、口服液、饮品形式。
[0007] 具体包括如下步骤：
[0008] 步骤一、标准液的制备
[0009] 按照以下参数进行各种维生素标准液的制备
【主权项】
1. 同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法，其特征在于：具体包括 如下步骤： 步骤一、标准液的制备 分别配制水溶性维生素 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB1^标准样品溶液，进而按一 定比例提取各标准样品溶液，然后定量加入已知浓度的H3PO4溶液，配制成多组混合标样； 步骤二、待测液的制备 取含有多种水溶性维生素的食品或保健品样品，在样品中加入提取溶剂，进行蜗旋、超 声，再加入稀释溶剂，再超声离心，最后用稀释溶剂稀释后通过过滤膜进行过滤；其中， 所述提取溶剂按以下步骤制备获得：称取硫氰酸铵置于离心管中，加入二甲基亚砜和 冰醋酸，超声使其溶解； 所述稀释溶剂按以下步骤制备获得：称取硫酸钠置于离心管中，加入冰醋酸和去离子 水，超声使其溶解； 步骤三、利用串联有紫外检测器和荧光检测器、柱温箱、二元梯度泵、自动进样器组成 的高效液相色谱仪，以乙腈-磷酸溶液为流动相梯度洗脱分离各种维生素，对步骤一和步 骤二制得的各混合标样和待测液当中的各种水溶性维生素的含量进行检测； 步骤四、根据步骤三的检测结果，依据多组混合标样的检测数据进行线性回归，得到 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB1^线性回归方程，进而依据这些线性回归方程以及待测 液的检测数据，分析计算待测液中水溶性维生素 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB12含量，从 而推知所测食品或保健品样品当中各种水溶性维生素的含量。
2. 如权利要求1所述的同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法，其 特征在于：步骤三当中，色谱条件如下： 色谱柱：Phenomenex Luna C18, 5. 0 μ m，4. 6mmX 250mm 内径； 流动相：流动相A :0. 1% H3PO4，流动相B :80%乙腈； 流速：〇· 8-lml/min ; 柱温：30°C ; 进样量：20 μ 1 ; 洗脱时间：〇~5min，100%A ;5~13min，线性下降至70%Α ;13~25min，保持在70% A0
3. 如权利要求1或2所述的同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方 法，其特征在于：波长经过优化，水溶性维生素的最优紫外吸收波长最终确定为=VB^eOnm, VB3280nm，VC 230nm，VB5210nm，VB9210nm，VB12210nm，VB 2210nm;VB6的荧光检测波长为 Ex 290nm/Em 395nm。
4. 如权利要求1或2所述的同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方 法，其特征在于：步骤二待测液的配制过程中，使用0. 45 μ m的滤膜进行过滤。
5. 如权利要求1所述的同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法，其 特征在于：步骤一中样品标准液的配制按照以下参数进行制备，
然后，分别吸取 0.6ml VBpOJml VB2,0.2ml VB3,0.4ml VB5,0.4ml VB9,0.1ml VB6， 0.1ml VC，0.1 ml VB12置于5ml离心管中，加入1.9ml 0.85% H3PO4,配成混合标样，再将配 制好的混合标样溶液用0. 85% H3PO4四倍稀释成4个不同浓度的混合标样。
6. 如权利要求1所述的同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法，其 特征在于：所述食品或保健品为复合维生素片，所述步骤二中待测液的制备过程中，先将复 合维生素片研磨成粉末，然后加入提取溶剂，继而再进行后续处理。
7. 如权利要求1所述的同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法，其 特征在于：所述食品或保健品包括片剂、粉剂、胶囊、软胶囊、冲剂、口服液、饮品。
【专利摘要】本发明揭示了一种同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法，具体步骤包括：分别制备样品混合标准溶液和待测液，利用高效液相色谱仪，以乙腈-磷酸溶液为流动相梯度洗脱分离各种维生素，对各混合标样和待测液进行检测，然后依据多组混合标样的检测数据进行线性回归，进而依据这些线性回归方程以及待测液的检测数据，分析计算待测液中水溶性维生素VB1，VB2，VB3，VC，VB5，VB6，VB9，VB12的含量，从而推知所测食品或保健品样品当中各种水溶性维生素的含量本发明能一次性同时完成8种水溶性维生素的检测分析，能够有效改善多种维生素的分离效率，可以测定基质较为复杂的样品。
【IPC分类】G01N30-88
【公开号】CN104730190
【申请号】CN201510096034
【发明人】张盟, 李鹏高, 张先勇
【申请人】苏州源泽生物技术有限公司
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年3月4日