能同时检测酱香型白酒中6种人工合成甜味剂的方法
【技术领域】
[0001] 本发明专利设及一种能同时检测酱香型白酒中6种人工合成甜味剂的方法，属于 人工合成甜味剂的检测领域。
【背景技术】
[0002] 白酒是我国的传统消费品，历史悠久，源远流长，具有庞大的消费群体。贵州素有 酒乡之称，白酒的发展在贵州经济中占有重要的位置。酿酒工业，特别是发展白酒工业，对 促进贵州经济的发展具有举足轻重的地位和作用。
[0003] 甜味剂是一类重要的食品添加剂，但近几年有研究发现糖精钢、甜蜜素等一些人 工甜味剂具有潜在致癌、致崎、损害肾功能的副作用。随着食品毒理学研究的不断发展，对 食品添加剂提出更加严格的卫生要求。国家强制性标准GB2760-2011《食品添加剂使用卫 生标准》规定了白酒中严禁添加任何的甜味剂。当前，在酒类产品生产中，对甜味剂的使用 也存在不少问题，如；1、在发酵酒中违法添加非自生发酵产物，如糖精钢、甜蜜素等甜味剂； 2、各企业原材料进货检验把关不严，造成白酒中被动添加人工甜味剂的问题十分突出。
[0004] 因此，人工甜味剂在生产中的合法使用，不仅关系到产品的品质，更关系到消费者 的安全与健康。目前针对白酒中甜味剂检测方法较多，最普遍的是液相色谱-紫外检测法， 另外还有离子色谱法、液相色谱-蒸发光散射检测法。上述几种方法主要是针对单一甜味 剂或者对两种甜味剂进行测定，检测灵敏度也有待提高，而且由于甜蜜素与=氯庶糖的紫 外吸收较弱，不适宜使用紫外检测器，使得多种甜味剂同时检测受到限制。也有利用液相色 谱-飞行时间质谱联用检测多种甜味剂的报道，但飞行时间质谱属于高分辨质谱，造价高 昂，不宜在我国普遍推广。
【发明内容】
[0005] 本发明要解决的技术问题是，提供一种效率高、省时、高效的能同时检测酱香型白 酒中6种人工合成甜味剂的方法，可W克服现有技术的不足。
[0006] 本发明的技术方案是：能同时检测酱香型白酒中6种人工合成甜味剂的方法包括 W下步骤： a、 取标准品甜蜜素、糖精钢、安塞蜜、阿斯己甜、S氯庶糖和纽甜分别配制成1.OOmg/ml 的标准储备液，于-4°C冰箱中储存备用； b、 将步骤a中的6类标准储备液分别取于容量瓶，用空白稀释液配制成5(K)ng/ml，200 ng/ml，100ng/ml，50ng/ml，20ng/ml，10ng/ml的标准溶液，过 0. 45]im滤膜，待上机； C、在b步骤基础上，采用Ci8柱分离，W0. 1%甲酸水溶液-甲醇为流动相，梯度洗脱，W保留时间和质荷比对分离出的组分进行定性，用峰面积进行定量得到6种甜味剂的回归方 程及相关系数；并将回归方程及相关系数输入计算机； d、分别取酿酒原料、大曲和成品酒10.OOg，纯水稀释定容至100ml，祸旋提取后，静置 后取清液过0. 45ym滤膜，待分析； e、取d步骤中待分析检测样品，采用Ci8柱分离，W0. 1%甲酸水溶液-甲醇为流动相， 梯度洗脱，W保留时间和质荷比对分离出的组分进行定性，用峰面积进行定量得出步骤d 样品中的安赛蜜、糖精钢、甜蜜素、阿斯己甜、纽甜及S氯庶糖的数值。
[0007] 上述的能检测酱香型型白酒中6种人工合成甜味剂的方法是，步骤C和步骤e中 的监测分析分为S段进行，分别为0-2. 30分钟、2. 31-3. 30分钟、3. 31-4. 5分钟。
[000引与现有技术比较，本发明建立了酱香型白酒中安赛蜜、糖精钢、甜蜜素、阿斯己甜、 纽甜及=氯庶糖6种人工合成甜味剂的高效液相串联质谱同时检测的方法。该方法快速、 高效、准确，可同时测定6种甜味剂，检测限10yg/kg，能够在4. 5min内完成样品的分析。 白酒样品只需直接稀释，即可进样检测，前处理简单。该方法便于广大白酒企业对原材料把 关和成品检验，W及监管部口抽查时使用。
【具体实施方式】
[0009] 实施例，1实验部分 1.1试剂与仪器 超高效液相色谱串联质谱仪（WaterS公司UPLC高效液相色谱仪串联Quattro PremierXE质谱仪）；縱祸振荡器（IKA); 甲酸，甲醇，己膳均为色谱纯，己酸锭(分析纯)，超纯水； 空白稀释液；考虑到白酒中己醇浓度较高，配置标准溶液时取空白样品50.OOg于 500ml容量瓶中，用纯水稀释至刻度作为标准稀释液，W降低样品的的基质效应。
[0010] 标准品；甜蜜素（sodium巧clamate)，糖精钢（sodiumsaccharim)，购 于SUPEILCO;安塞蜜（potassiumacesulfame)，阿斯己甜（aspartame)，S氯庶糖 (sucralose)，购于DrE虹enstorferGmbH;纽甜（neotame)，购于USP。将上述标准品分别 配制成1.OOmg/ml(少量水溶解，甲醇定容）的标准储备液于-4°C冰箱中储存备用。
[0011] 标准混合液；分别吸取标准储备液于容量瓶，用空白稀释液配制成5(K)ng/ml，200 ng/ml，100ng/ml，50ng/ml，20ng/ml，10ng/ml的标准溶液，过 0. 45]im滤膜，待上机。
[0012] 仪器参数条件： 液相条件： 色谱柱：B邸。8，100X2.Imm, 1.7ym进样量；l〇.OOyL 流动相；A; 0. 1%甲酸水溶液B;甲醇 柱温；35 + 1。C 洗脱方式：梯度洗脱，见表1 表1梯度洗脱
【主权项】
1. 一种能同时检测酱香型白酒中6种人工合成甜味剂的方法，其特征在于：该方法包 括以下步骤： a、 取标准品甜蜜素、糖精钠、安塞蜜、阿斯巴甜、三氯蔗糖和纽甜分别配制成1.0 Omg/ml 的标准储备液，于-4°C冰箱中储存备用； b、 将步骤a中的6类标准储备液分别取于容量瓶，用空白稀释液配制成500ng/ml，200 ng/ml，100 ng/ml，50 ng/ml，20 ng/ml，10 ng/ml 的标准溶液，过 0.45ym 滤膜，待上机； c、 在b步骤基础上，采用C18柱分离，以0. 1%甲酸水溶液-甲醇为流动相，梯度洗脱，以 保留时间和质荷比对分离出的组分进行定性，用峰面积进行定量得到6种甜味剂的回归方 程及相关系数；并将回归方程及相关系数输入计算机； d、 分别取酿酒原料、大曲和成品酒10. 00g，纯水稀释定容至100ml，涡旋提取后，静置 后取清液过0. 45 y m滤膜，待分析； e、 取d步骤中待分析检测样品，采用C18柱分离，以0. 1%甲酸水溶液-甲醇为流动相， 梯度洗脱，以保留时间和质荷比对分离出的组分进行定性，用峰面积进行定量得出步骤d 样品中的安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、纽甜及三氯蔗糖的数值。
2. 根据权利要求1所述的能同时检测酱香型白酒中6种人工合成甜味剂的方法，其特 征在于：步骤c和步骤e中的监测分析分为三段进行，分别为0-2. 30分钟、2. 31-3. 30分钟、 3. 30-4. 5 分钟。
【专利摘要】本发明公开了一种能同时检测酱香型白酒中6种人工合成甜味剂的方法，它是将样品直接稀释，过0.45μm滤膜上机分析。采用C18柱分离，以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相，梯度洗脱，以保留时间和质荷比对分离出的组分进行定性，用峰面积进行定量。结果表明，6种甜味剂的质量浓度与其峰面积在一定范围内呈良好线性关系，10-200ng/ml范围内相关系数为0.9915-0.9943，20-500ng/ml范围内相关系数为0.9961-0.9983，检出限均为10μg/kg，相对标准偏差2.1%-7.9%。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104880516
【申请号】CN201510153612
【发明人】余磊, 朱明 , 张桂玲, 曾加, 赵杰, 严学芬, 杨秀群
【申请人】贵阳学院
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2015年4月2日