一种准确稳定的总胆固醇检测试剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及临床体外检测试剂技术领域，特别设及一种准确稳定的体外检测总胆 固醇含量的试剂。
【背景技术】
[0002] 总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和，是临床血脂分析的重要指 标，血浆胆固醇主要存在低密度脂蛋白（LDL)中，其次为高密度脂蛋白（皿L)和极低密度脂 蛋白（VLDL)，乳糜微粒（CM)中含量最少。在人体血浆中，胆固醇有两种存在形式，即胆固醇 醋和游离胆固醇两种，前者约占70%，后者占30%。
[0003] 血浆和组织中所含胆固醇经常处于交换状态，其交换率因不同组织而异，由于胆 固醇不断进、出血液，所W血浆胆固醇不仅反映胆固醇摄取与合成的情况，还反映携带胆固 醇的各种脂蛋白的合成速度，W及影响脂蛋白代谢的受体的情况。CH0的测定对于血脂疾 病的诊断具有重要的临床意义，血液胆固醇的测定可用作肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能 和冠状动脉疾病的诊断指标。血液胆固醇增高多见于肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退 等；胆固醇降低常见于贫血、肝硬化、甲亢、营养不良等。血清总胆固醇超过5. 70mmol/L可 考虑为高胆固醇血症，高胆固醇血症容易引起动脉粥样硬化，造成堵塞性屯、脑血管疾病。
[0004] 总胆固醇的测定方法目前已超过200种，可分为化学试剂比色法、酶分析法、巧光 法、气相和高效液相色谱法等五大类。由于气相和高效液相色谱法条件高，临床实验室最常 用的是化学试剂法和酶法。其中化学试剂法主要采用硫磯铁法，由于该法所用试剂有腐蚀 性，需有机溶剂抽提，并且操作步骤繁琐。目前，酶法检测血清或血浆中的总胆固醇被广泛 采用。W下是酶法测定的基本原理：
在实际研究及检测过程中，我们会发现在酶促反应的第=步，即反应（3)中，由于产物 红紫色色素的不稳定，导致总胆固醇检测结果不稳定，准确性差。目前，市场上流通的酶法 检测试剂盒普遍存在该性能缺陷。
【发明内容】
[0005] 针对上述酶法总胆固醇检测试剂盒存在的性能缺陷，本发明提供一种检测结果稳 定，重复性好的总胆固醇检测试剂盒。
[0006] 本发明是通过W下措施实现的： 一种稳定的总胆固醇检测试剂，只包含一个组分，属于单试剂，其原料含量如下：
[0007] 本发明的优点是： 本发明在原始配方的基础上加入适量的酶保护剂海藻糖和试剂稳定剂AE0-9,使得该 试剂的检测结果有了很好的准确性与稳定性。
【附图说明】
[000引图1为实施例1和实施例2的线性相关性图。
[0009] 图2为实施例1与实施例2稳定性对比图。
【具体实施方式】
[0010] 下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
[0011] 实施例1
计算；总胆固醇含量(111111〇1/〇 =(测定/min~^标准/min)XC标准。
[001引实施例2
[0013]一种稳定的总胆固醇检测试剂准确性验证 对同一高值血清样本其总胆固醇的浓度约为200mgAlL该样本用生理盐水进行稀释， 实施梯度如表2所示。
[0014]表 2
分别利用实施例1和实施例2试剂对各浓度梯度样本进行检测，结果如图1所示，实施 例2随稀释浓度呈线性变化，相关系数为r=0. 9994,说明实施例2的试剂对于各个浓度的样 本检测结果都比较准确；对比而言，实施例1的线性相关系数为r=0. 97K0. 9900,各个浓度 的检测结果的准确性差。
[0015]一种稳定的总胆固醇检测试剂稳定性验证 将实施例1、2按照常规检测试剂盒的包装规格进行分装，均放置于2-8°C环境中，连续 检测其试剂的稳定性。，分别用实施例1、实施例2的试剂对同一稳定样本进行检测，每月一 次，连续检测18个月，记录实验结果。检测结果如图2所示。
[0016] 如图2所示，两种实施例的试剂均会随着时间的推移稳定性有所衰弱，但实施例1 的稳定性在12个月W内，几乎不衰减。相比而言，实施例2试剂的稳定性在第7个月开始 衰减比较显著。说明在加入适量酶保护剂海藻糖和试剂稳定剂AEO-9后，试剂的稳定性明 显提局。
[0017]本实验结合常规酶法检测总胆固醇的原理，在原始配方的基础上，再加入适量的 酶保护剂海藻糖和试剂稳定剂AE0-9,既保护了催化物酶的活性，又稳定了最终产物，明显 增强了试剂检测的准确度和稳定性。
【主权项】
1. 一种准确稳定的总胆固醇检测试剂，其特征在于，包括以下含量的组分： MOPSO 缓冲液，pH7. 0， 50mmol/L 4-氨基安替比林 0. 1-1. Ommol/L 胆固醇酯酶 1-2KU/L 胆固醇氧化酶 1-2KU/L 过氧化物酶 1-2KU/L 3, 5-二氯-2-羟基苯磺酸钠 2_5mmol/L 氯化镁 2_5mmol/L 海藻糖 1-10 g/L 脂肪醇聚氧乙烯醚 1-10 g/L。
【专利摘要】本发明提供一种准确稳定的总胆固醇检测试剂，包括以下含量的组分：MOPSO缓冲液，50mmol/L；安替比林，0.1-1.0mmo1/L；胆固醇酯酶，1-2KU/L；胆固醇氧化酶，1-2KU/L；过氧化物酶，1-2KU/L；3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠， 2-5mmol/L；氯化镁，2-5mmol/L；海藻糖，1-10g/L；脂肪醇聚氧乙烯醚，1-10g/L；本发明提供的试剂的检测结果有很好的准确性与稳定性。
【IPC分类】G01N33/92
【公开号】CN104977418
【申请号】CN201510168644
【发明人】甘宜梧, 张永英, 李静, 赵新, 王春艳
【申请人】山东博科生物产业有限公司
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2015年4月10日