一种同时定量检测saa/pct/crp的检测装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及医学检测领域，尤其是一种同时定量检测SAA/PCT/CRP的检测装置。
【背景技术】
[0002]血清淀粉样蛋白A(SAA)是一种高度异质性的急性相反应蛋白，主要由肝细胞产生，其相对分子量约为12 000。SAA这种急性反应物在炎症反应中的浓度会比其在正常时升高1000倍，升幅高于CRP，此时它经由其N端与高密度脂蛋白(HDL)结合可以置换与HDL结合的载脂蛋白A-1 (ApoA-1)从而形成急性相时的SAA/HDL复合体，其半衰期仅为50分钟左右。研究表明，在炎症严重的情况下，SAA表达量的高低与坏死细胞和组织的数量密切相关。SAA的表达量在炎症发生的第3天出现高峰，第7天回到基线。
[0003]降钙素原(PCT)是一种蛋白质，当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高。自身免疫、过敏和病毒感染时PCT不会升高。局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致其升高。细菌内毒素在诱导过程中担任了至关重要的作用。PCT在人体内的半衰期为25-30h，稳定性好，在正常人血清中含量极低。在导致全身炎症反应综合症(SIRS)的许多情况下，诸如细菌性感染、胰腺炎、烧伤、多发伤，血中CT前肽物质的所剪切产物异常升高，其中PCT是最主要的产物，而CT无明显变化。血PCT水平与感染及损伤的严重程度呈正相关，且已成为用于脓毒症，严重脓毒症，脓毒症休克的诊断和疗效监测的有效指标。
[0004]PCT反映了全身炎症反应的活跃程度。影响PCT水平的因素包括被感染器官的大小和类型、细菌的种类、炎症的程度和免疫反应的状况。另外，PCT只是在少数患者的大型外科术后l-4d可以测到。
[0005]C 反应蛋白(C-reactive protein，CRP)，1930 年 Tillet 和 Francis 因在急性大叶性肺炎患者血清中发现能在1丐离子存在时与肺炎球菌c多糖起沉淀反应而得名，是人类重要的急性期反应蛋白，急性期浓度可升高上千倍，循环中的CRP半衰期为19小时。人类CRP是由肝脏产生，由五个相同的亚基依靠非共价键形成的环状五聚体，这一特征性结构使其归类于五聚素(一组具有免疫防御特性的钙结合蛋白)家族。
[0006]与C反应蛋白(CRP)类似，血清淀粉样蛋白A的含量浓度是反映感染性疾病早期炎症的敏感指标，有助于诊断炎症，评估其活性，监控其活动及治疗。但是，SAA检测在诊断肾移植排斥反应伴发病毒感染的患者(特别是进行免疫抑制治疗的患者)以及用肾上腺皮质激素治疗的囊性纤维化患者方面，比PCT更能够准确判断炎症的活动状态
[0007]PCT对严重细菌感染诊断有较高的诊断效能，并具有较高的灵敏度和特异度。优于CRP和SAA等感染标志物，PCT对病毒感染与细菌感染的鉴别诊断有一定的应用价值。但是，在自身免疫疾病的炎症性疾病活动期间，PCT含量无升高，但CRP含量升高。在小儿感染性疾病早期，很难鉴别是细菌感染还是病毒感染CRP即对病毒感染缺乏敏感性，而SAA在细菌和病毒感染早期均可升高。另有研究表明CRP和SAA均可预示较差的预后，比如复发或死亡，而监测感染急性期反应，SAA是比CRP即更敏感的指标
[0008]研究表明在诊断炎症相关疾病，单独使用一种指标CRP、PCT或SAA不能有效准确诊断，临床上可将SAA，PCT和CRP等感染相关指标与临床资料相结合，对感染性疾病的诊断具有重要意义。
【发明内容】
[0009]本发明所要解决的技术问题在于提供一种同时定量检测SAA/PCT/CRP的检测装置。
[0010]为解决上述技术问题，本发明的技术方案是:
[0011 ] 一种同时定量检测SAA/PCT/CRP的检测装置，包括人血清淀粉样蛋白A (SAA)检测试纸、人降钙素原(PCT)检测试纸和C-反应蛋白(CRP)检测试纸，其中，
[0012]所述人血清淀粉样蛋白A检测试纸由包被SAA抗体(T线)和平行包被羊抗鼠IgG(C线)的硝酸纤维素膜、含有胶体金标记的配对的抗人SAA抗体的胶体金垫、吸样垫、样品垫和塑料底板组成；
[0013]所述人降钙素原(PCT)检测试纸由包被PCT抗体(T线)和平行包被抗鼠IgG(C线)的硝酸纤维素膜、含有胶体金标记的配对抗人PCT抗体的胶体金垫、吸样垫、样品垫和塑料底板组成；
[0014]所述C-反应蛋白检测试纸由包被CRP抗体(T线)和平行包被羊抗鼠IgG(C线)的硝酸纤维素膜、含有胶体金标记的配对的抗人CRP抗体的胶体金垫、吸样垫、样品垫和塑料底板组成；
[0015]上述各试纸(人血清淀粉样蛋白A检测试纸、人降钙素原检测试纸和C-反应蛋白检测试纸)中吸样垫、硝酸纤维素膜、胶体金垫和样品垫从塑料底板的一端依次排列至另一端。
[0016]优选的，上述同时定量检测SAA/PCT/CRP的检测装置，所述人血清淀粉样蛋白A(SAA)检测试纸和C-反应蛋白(CRP)检测试纸的样品垫是由处理液处理的无纺布于室温相对湿度不高于30% (—般在湿度为15-30% )的条件下干燥，密封保存而得到的，其中，所述处理液包括50mM Tris、0.5% Tween-20、0.1%牛血清白蛋白(BSA)、0.5%Trt1n-100 ;所述人降钙素原(PCT)检测试纸的样品垫由滤血滤纸和经红细胞单抗处理后的纤维玻纤膜组成，其中，上层为纤维玻纤膜、下层为滤血滤纸，纤维玻纤膜和滤血滤纸的边缘有l_2mm重叠，于室温相对湿度不高于30% ( 一般在湿度为15-30% )的条件下干燥，密封保存而得到的。
[0017]优选的，上述同时定量检测SAA/PCT/CRP的检测装置，所述各试纸(人血清淀粉样蛋白A检测试纸、人降钙素原检测试纸和C-反应蛋白检测试纸)的吸样垫为吸水滤纸。
[0018]优选的，上述同时定量检测SAA/PCT/CRP的检测装置，所述各试纸的硝酸纤维素膜(NC膜)是由下述方法制备得到的:
[0019]人血清淀粉样蛋白A(SAA)检测试纸的硝酸纤维素膜:将SAA抗体用含1%的0.01M pH 7.4磷酸盐缓冲液(PBS)配制成0.8-1.5mg/ml的抗体溶液，在NC膜上以
1.2-1.4ul/cm的参数用喷膜仪进行划线，包被试纸条的SAA抗体作为T线，同时将羊抗鼠IgG用含1%的0.01M pH 7.4磷酸盐缓冲液(PBS)配制成l_2mg/ml的抗体溶液，在NC膜上以1.2-1.4ul/cm的参数用喷膜仪进行划线，包被试纸条的羊抗鼠IgG作为C线，于室温相对湿度不高于30% (—般在湿度为15-30% )的条件下干燥，密封保存备用；
[0020]人降钙素原(PCT)检测试纸的硝酸纤维素膜:将PCT抗体用含1 %的0.01M pH
7.4磷酸盐缓冲液(PBS)配制成0.8-1.5mg/ml的抗体溶液，在NC膜上以1.2-1.4ul/cm的参数用喷膜仪进行划线，包被试纸条的PCT抗体作为T线，同时将羊抗鼠IgG用含1 %的0.01M pH 7.4磷酸盐缓冲液(PBS)配制成l_2mg/ml的抗体溶液，在NC膜上以1.2-1.4ul/cm的参数用喷膜仪进行划线，包被试纸条的羊抗鼠IgG作为C线，于室温相对湿度不高于30% ( 一般在湿度为15-30% )的条件下干燥，密封保存备用；
[0021]C-反应蛋白(CRP)检测试纸的硝酸纤维素膜:将CRP抗体用含1 %的0.01M pH
7.4磷酸盐缓冲液(PBS)配制成0.8-1.5mg/ml的抗体溶液，在NC膜上以1.2-1.4ul/cm的参数用喷膜仪进行划线，包被试纸条的CRP抗体作为T线，同时将羊抗鼠IgG用含1%的0.01M pH 7.4磷酸盐缓冲液(PBS)配制成l_2mg/ml的抗体溶液，在NC膜上以1.2-1.4ul/cm的参数用喷膜仪进行划线，包被各自试纸条的羊抗鼠IgG作为C线，于室温相对湿度不高于30% (—般在湿度为15-30%)的条件下干燥，密封保存备用。
[0022]优选的，上述同时定量检测SAA/PCT/CRP的检测装置，所述各试纸(人血清淀粉样蛋白A检测试纸、人降钙素原检测试纸和C-反应蛋白检测试纸)的宽度为3-4mm，长度为7cm，所述各试纸的T线(检测线)和C线(质控线)的间距为0.7cm。
[0023]优选的，上述同时定量检测SAA/PCT/CRP的检测装置，所述各试纸的胶体金垫是由下述方法制备得到的:
[0024]人血清淀粉样蛋白A(SAA)检测试纸的胶体金垫:取每100ml胶体金液放在烧杯内，用0.2M