1.00mg a.i./ 1)，剧毒化枯〇<0.10〇111邑曰.1./1)。
[0047] 在本试验条件下，21%嚷虫嗦悬浮剂对潘类急性活动抑制的毒性等级为"中毒"。 [004引实施例2:
[0049] (1)农药储备液的配制：
[(K)加]称取30%己挫醇悬浮剂0.0833g，用Elendt M4培养液溶解并定容至lOOmL容量瓶 中，配制成浓度为250mg a.i./L的农药储备液。
[0051 ] (2)试验液的配制：
[0052] Elemlt M4培养液的制备:将Elendt M4培养液进行空气曝气累曝气处理24hW上， 检测Elemlt M4培养液的pH为7.23，硬度为182mg/L，溶解氧为6.99mg/L。
[0053] 实验组:依次移取 0.100、〇. 200、0.400、0.800、1.600、3.200mL 步骤（1)中的农药储 备液分别用Elendt M4培养液定容至250mL容量瓶中，得到浓度为0.100、0.200、0.400、 0.800、1.60、3.20mg a. i . /L的试验药液。实验组设4个重复。
[0054] 空白对照组(CKi):WElerKlt M4培养液作为试验液。
[0055] (3)染毒
[0056] 挑选来源于同一母系的孤雌繁殖5代，出生时间在化~24h的非头胎健康幼潘，随 机加入到上述步骤(2)的试验液中。每烧杯5只潘，进行培养，培养过程控制水溫为20°C、每 日光照下培养16h，黑暗培养化、溶解氧浓度不低于3.Omg/L。大型潘在染毒过程中不喂食。
[0057] 在染毒开始后，于第24h、4她测定并记录烧杯中试验液的溫度、pH值、溶氧量等。于 染毒后24h、4她观察并记录大型潘的抑制数。判断所述大型潘抑制的标准为轻晃烧杯，潘在 15s内不游动视为活动抑制，但允许附肢微弱摆动。
[005引表4为30 %己挫醇悬浮剂对大型潘对大型潘急性毒性活动抑制试验数据记录结 果。表5为试验期间各浓度组的水溫，pH值，溶解氧的检测结果。
[0059] 表4:30%己挫醇悬浮剂对大型潘急性毒性试验数据记录表
[0060]
[0061] 在处理过程中，大型潘出现了游动不积极，原地打转，附肢和触角微弱摆动等生物 抑制效应，浓度越高时间越久，症状也会更加的严重。
[0062] 表5:水缸中生活用水的水溫、pH值、溶解氧的检测结果表
[0063]
[0064]
[0065] 实验组2至4的化、溫度、溶解氧含量等均在实验组1和实验组5组成的范围内。
[0066] (4)数据处理
[0067] 采用统计软件SPSS12.0，W处理浓度的对数值为自变量X，W (校正)死亡率的机率 值为因变量y，建立毒力回归方程。计算30%己挫醇悬浮剂对大型潘的抑制浓度ECso和95% 置信限，具体计算结果参见表3。
[0068] 表6:30%己挫醇悬浮剂对大型潘急性毒性试验结果表
[0069]
[0070] (5)结果评价
[0071] 根据ECso值判断农药毒级。毒性分级标准为：低毒化C5〇>10.0mg a.i./L)，中毒 (l.OOmg a.i./L<EC已〇<10.0mg a.i./L)，高毒（O.lOOmg a.i./L<EC已〇<1.00mg a.i./ 1)，剧毒化枯〇<0.10〇111邑曰.1./1)。
[0072] 在本试验条件下，30%己挫醇悬浮剂对潘类急性活动抑制的毒性等级为"高毒"。
[0073] W上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制。虽 然本发明已W较佳实施例掲示如上，然而并非用W限定本发明。任何熟悉本领域的技术人 员，在不脱离本发明的精神实质和技术方案的情况下，都可利用上述掲示的方法和技术内 容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此， 凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对W上实施例所做的任何简单 修改、等同替换、等效变化及修饰，均仍属于本发明技术方案保护的范围内。
【主权项】
1. 一种大型潘测定农药悬浮剂毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 将农药悬浮剂用ElendtM4培养液溶解制成农药储备液； (2) 将所述农药储备液与ElendtM4培养液混合配制成梯度浓度的混合液，将所述混合 液做为大型潘的生活用水，持续培养48h，培养过程中，每隔24h时记录大型潘的生物效应参 数和所述混合液的理化参数； (3) 根据大型潘的生物效应参数和农药储备液的理化参数计算农药对半数抑制浓度 EC50，判断农药悬浮剂的毒性。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述大型潘为来源于同一 母系的孤雌繁殖3代以上，出生时间小于24h的非头胎健康幼潘。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤(2)进行的过程中，所述大型潘 不喂食。4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述ElendtM4培养液为空 气曝气栗曝气处理24h以上的ElendtM4培养液。5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述ElendtM4培养液的pH为6.0~9.0，硬 度为140~250mg/L，溶解氧2 3mg/L。6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)进行的过程中，所述大型潘不 离开水，转移时用滴管转移。7. 根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述生物效 应参数为大型潘的抑制率;所述理化参数为混合液的水温、pH值、溶解氧含量。8. 根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述培养过 程控制水温为18°C~22°C、每日光照16h、溶解氧浓度不低于3.0mg/L。9. 根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述农药悬浮剂的毒性的判 断标准为:EC5〇>10.0mga.i./L表示低毒，l.OOmga.i./L<EC5〇《10.0mga.i./L表示中 毒，O.lOOmga.i./L<EC5〇<1.00mga.i./L表不高毒，EC5〇<0.100mga.i./L表不剧毒。10. 根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述大型潘测定农药悬浮剂 毒性的方法还设有空白对照组;所述空白对照组以ElendtM4培养液为大型潘的生活用水。
【专利摘要】本发明公开了一种大型溞测定农药悬浮剂毒性的方法，包括以下步骤：将农药悬浮剂用Elendt？M4培养液溶解制成农药储备液；将农药储备液与Elendt？M4培养液混合配制成梯度浓度的混合液，将混合液做为大型溞的生活用水，持续培养48h，培养过程中，每隔24h时记录大型溞的生物效应参数和所述混合液的理化参数；根据大型溞的生物效应参数和农药储备液的理化参数计算农药对半数抑制浓度EC50，判断农药悬浮剂的毒性，具有操作简便、实用性强、检测速度快，精确度高等优势。
【IPC分类】G01N33/00
【公开号】CN105486816
【申请号】CN201511008438
【发明人】刘勇, 陈昂, 张德咏, 罗香文, 严清平, 刘建宇, 罗源华
【申请人】湖南省植物保护研究所
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年12月29日