比较结 果示意图。
【具体实施方式】
[0032]为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图和实施例，对 本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并 不用于限定本发明。
[0033]本发明提供了一种检测KAPPA轻链含量的试剂盒。该试剂盒包括:试剂R1、试剂R2 和KAPPA轻链校准品。
[0034] 其中，试剂R1包括:第一缓冲液5~600mmol/L、第一电解质5~60g/L、表面活性剂1 ~200g/L、第一稳定剂2~50g/L、高分子加速剂1~100g/L和第一防腐剂0.5~15g/L。试剂 R1中，其余为纯化水。
[0035] 试剂R2包括:第二缓冲液5~600mmol/L、抗人KAPPA轻链抗体0.1~20%w/v、第二 电解质5~60g/L和第二防腐剂0.5~15g/L。试剂R2中，其余为纯化水。本发明中，w/v表示的 意思是单位体积的溶液中所含的溶质质量。
[0036] KAPPA轻链校准品包括:第三缓冲液10~600mmol/L、第三稳定剂2~50g/L、第三防 腐剂0.5~15g/L、抗氧化剂0.01~10g/L和KAPPA轻链抗原。KAPPA轻链校准品中，其余为纯 化水。
[0037] 优选的，试剂R1包括:第一缓冲液30~400mmol/L、第一电解质6~45g/L、表面活性 剂3~70g/L、第一稳定剂3~35g/L、高分子加速剂3~70g/L和第一防腐剂1.5~9g/L。试剂 R2包括：第二缓冲液20~450mmol/L、抗人KAPPA轻链抗体0.1~20%w/v、第二电解质6~ 50g/L和第二防腐剂1.5~98/Ι^ΚΑΡΡΑ轻链校准品包括:第三缓冲液15~100mmol/L、第三稳 定剂3~50g/L、第三防腐剂4~9g/L、抗氧化剂0.4~10g/L和KAPPA轻链抗原。
[0038] 优选的，试剂R1包括:第一缓冲液10~100mm〇l/L、第一电解质5~15g/L、表面活性 剂1~50g/L、第一稳定剂5~15g/L、高分子加速剂50~100g/L和第一防腐剂1~5g/L。试剂 R2包括：第二缓冲液10~100mmol/L、抗人KAPPA轻链抗体0.5~10%w/v、第二电解质5~ 15g/L和第二防腐剂1~58/Ι^ΚΑΡΡΑ轻链校准品包括:第三缓冲液10~100mm〇l/L、第三稳定 剂5~15g/L、第三防腐剂1~5g/L、抗氧化剂0.01~0.8g/L和KAPPA轻链抗原。
[0039] 优选的，KAPPA轻链校准品包括:第三缓冲液5~600mmol/L、第三稳定剂2~50g/L、 第三防腐剂〇 · 5~15g/L、抗氧化剂0 · 01~10g/L和KAPPA轻链抗原0~1600mg/L。
[0040] 优选的，KAPPA轻链校准品中，KAPPA轻链抗原的浓度为0~1200mg/L。
[0041]应用该试剂盒时，该KAPPA轻链校准品可以配制成高浓度单点校准品，在使用时用 生理盐水稀释成多个不同浓度的参考校准品，也可以直接制备成多个不同浓度的参考校准 品。
[0042]优选的，试剂R1中，第一缓冲液选自磷酸盐roS缓冲液、三羟甲基氨基甲烷TRIS缓 冲液、硼酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸CAPS0缓冲液、4-羟乙基哌 嗪乙磺酸HEPES缓冲液中的一种或几种。第一电解质选自氯化钠、硫酸镁、氯化镁和氯化钾 中的一种或几种。表面活性剂选自Triton系列表面活性剂、Tween系列表面活性剂、月桂醚 系列表面活性剂(例如聚氧乙烯月桂醚）、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚和聚 氧乙烯辛基苯醚中的一种或几种。第一稳定剂选自乙二胺四乙酸二钠、甘露糖醇、葡萄糖、 海藻糖和牛血清蛋白中的一种或几种。高分子加速剂选自聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚 乙二醇6000和聚乙二醇8000中的一种或几种。第一防腐剂选自叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲 酸、对羟基苯甲酸乙酯和乙基汞硫代硫酸钠中的一种或几种。
[0043]优选的，试剂R2中，第二缓冲液选自磷酸盐roS缓冲液、三羟甲基氨基甲烷TRIS缓 冲液、硼酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸CAPS0缓冲液、4-羟乙基哌 嗪乙磺酸HEPES缓冲液中的一种或几种。抗人KAPPA轻链抗体选鼠抗人、兔抗人、羊抗人、鸡 抗人和鸭抗人KAPPA轻链抗体中的一种或几种。更优选的，抗人KAPPA轻链抗体为单克隆抗 体和/或多克隆抗体。第二电解质选自氯化钠、硫酸镁、氯化镁和氯化钾中的一种或几种。第 二防腐剂选自叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯和乙基汞硫代硫酸钠中的一 种或几种。
[0044] 优选的，KAPPA轻链校准品中，第三缓冲液选自磷酸盐roS缓冲液、三羟甲基氨基甲 烷TRIS缓冲液、硼酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸CAPS0缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES缓冲液中的一种或几种。第三稳定剂选自乙二胺四乙酸二钠、甘露 糖醇、葡萄糖、海藻糖和牛血清蛋白中的一种或几种。第三防腐剂选自叠氮钠、苯酚、对羟基 苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯和乙基汞硫代硫酸钠中的一种或几种。抗氧化剂选自丁基羟基 茴香醚、二丁基羟基甲苯、苯多酚、甘草抗氧化物和硫代二丙酸二月桂酯中的一种或几种。
[0045] 更优选的，试剂R1中，第一缓冲液为磷酸盐缓冲液。第一电解质为氯化钠。表面活 性剂为聚氧乙烯辛基苯醚。第一稳定剂为乙二胺四乙酸二钠。高分子加速剂为聚乙二醇 6000。第一防腐剂为叠氮钠。
[0046] 更优选的，试剂R2中，第二缓冲液为磷酸盐缓冲液。抗人KAPPA轻链抗体为羊抗人 KAPPA轻链单克隆抗体。第二电解质为氯化钠。第二防腐剂为叠氮钠。
[0047]更优选的，KAPPA轻链校准品中，第三缓冲液为磷酸盐缓冲液。第三稳定剂为乙二 胺四乙酸二钠。第三防腐剂为叠氮钠。抗氧化剂为丁基羟基茴香醚。
[0048]本发明实施例的检测KAPPA轻链含量的试剂盒，操作简单，使用简便快速，可简洁 快速地检测样本中KAPPA轻链的含量;能够满足临床快速高通量检测样本的要求，检测效率 明显提高在临床应用上具有广阔的前景;还具有特异性强、灵敏度高、重复性好、批间差异 小、试剂稳定等优点。
[0049]本发明实施例还提供了一种上述的检测KAPPA轻链含量的试剂盒在检测KAPPA轻 链含量中的用途，可以用于简洁快速地检测样本中KAPPA轻链的含量，具有较高的准确度和 很好的特异性。该试剂盒特别适合用于检测尿液样本中KAPPA轻链的含量。
[0050]本发明实施例还提供了一种采用上述的检测KAPPA轻链含量的试剂盒检测KAPPA 轻链含量的方法。本发明方法为免疫比浊法，其是一种抗原抗体结合动态测定方法。其基本 原理是:样本中的KAPPA轻链抗原和试剂R2中的抗人KAPPA轻链抗体发生相应的抗原抗体反 应，形成不溶性的抗原-抗体复合物，使反应液产生一定的浊度。反应液中抗人KAPPA抗体过 量时，形成的免疫复合物的量随着样本中KAPPA轻链抗原量的增加而增加，反应液的浊度也 相应增加。在特定波长下测定该复合物的吸光值，与校准品标定的校准曲线比较，即可计算 出样本中的KAPPA轻链的含量。如图1所示，为本发明的检测KAPPA轻链含量的方法的流程 图。该方法包括如下的步骤：
[0051 ] 步骤S10:向待测样品中加入试剂R1，待测样品的体积为5yL，试剂R1的体积为250μ L，得到第一混合液，并得到第一混合液的吸光度0D1。
[0052] 步骤S20:向第一混合液中加入试剂R2，试剂R2的体积为50yL，得到第二混合液，并 得到第二混合液的吸光度0D2。
[0053] 步骤S30:使用KAPPA轻链校准品得到标准曲线，根据吸光度0D1和吸光度0D2在标 准曲线上得到待测样品中KAPPA轻链的含量。
[0054] 其中，标准曲线的拟合模式包括：Spline、二次方程、logit-log3p、logit-log4p、 logit_log5p或Polygonal〇
[0055]下面以具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明。
[0056] 实施例1
[0057] 该检测KAPPA轻链含量的试剂盒包括:试剂R1、试剂R2和KAPPA轻链校准品。
[0058]其中，试剂R1包括如下的成分： CAPSO缓冲液（第一缓冲液) 400mmol/L 氯化钠（第一电解质） 45g/L 聚氧乙烯壬基苯基醚（表面活性剂> 70g/L
[0059] 海藻糖（第一稳定剂） 35g/L PEG 8000 (高分子加速剂） 70g/L 叠氮钠（第一防腐剂} 9g/L
[0060] 试剂R2包括如下的成分： CAPSO缓冲液（第二缓冲液） 20rnmol/L 羊抗人KAPPA轻链多克隆抗体 5% ( w/v )
[0061] 氯化钠（第二电解质） 6g/L 叠氮钠（第二防腐剂） 1 5g/L
[0062] KAPPA轻链校准品包括如下的成分： 甘氨酸（第三缓冲液} 100mmol,/L 牛血清蛋白（第三稳定剂） 3g/L
[0063] 叠氮钠（第三防腐剂} 5g/L 二丁基羟基甲苯（抗氧化剂） l(Jg/L KAPPA轻链抗原 相应量
[0064] 按照需要的校准品浓度将相应量的KAPPA轻链抗原添加到上述其他试剂的混合液 中，混合得到KAPPA轻链校准品。该KAPPA轻链校准品可以是高浓度单点校准品，在使用时用 生理盐水稀释成5个不同浓度的参考校准品，也可以直接制备成5个不同浓度的参考校准 品。本实施例配制5个不同浓度的KAPPA轻链校准品，其KAPPA轻链抗原的浓度分别为:Omg/ L、200mg/L、400mg/L、800mg/L 和 1200mg