30s，得到返蓝后的切片；
[0024](12)将步骤(11)所得返蓝后的切片，甩去多余的液体，用脱水剂和透明剂处理，得到透明化后的切片；
[0025](13)将步骤(12)所得透明化后的切片，甩去多余的液体，用封片剂进行封片，得到免疫组织化学染色切片；
[0026](14)将步骤(13)所得免疫组织化学染色切片，置于成像显微镜的载物台上采集图片，利用病理图片分析软件分析组织染色程度、统计阳性细胞数、总细胞数以及阳性细胞占总细胞数的百分比，评估待测样本的子宫内膜容受性。
[0027]在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
[0028]进一步，步骤(I)所述待测样品取自活体的人体的子宫内膜。
[0029]进一步，步骤(14)所述成像显微镜和病理图片分析软件评估子宫内膜容受性的具体操作如下:成像显微镜采集不重叠的20个视野的200倍图片;将所得8种免疫细胞的图片导入病理图片定量分析系统中进行分析。在病理图片定量分析系统中，设定细胞的大小为55?400像素，细胞核的苏木素染色强度需大于0.15，系统综合两个指标对所采集图片中总细胞进行识别并计数;组织中阳性细胞呈现醒目的棕黄色，系统将显示阳性细胞棕黄色的光密度值，系统将大于此值的所有细胞识别为阳性细胞并计数;根据阳性细胞数和总细胞数计算阳性细胞率。将待测样本的8种免疫细胞率与参考范围进行比较，进而判断待测样本的子宫内膜容受性。
[0030]其中，自然杀伤细胞率参考范围为0.97?21.15%;巨噬细胞率参考范围为0.5?2.65%，T细胞率参考范围为1.12?9.10%，辅助性T细胞率参考范围为0.10?0.50%，杀伤性T细胞率参考范围为0.81?5.45 %，调节性T细胞率参考范围为0.05?0.26 %，未成熟树突状细胞率参考范围为0.006?0.140%,成熟树突状细胞率参考范围为0.07?4.01 %。当待测样本的任一免疫细胞率超过其参考范围时，提示该待测样本的子宫内膜容受性异常。
[0031]本发明的有益效果是:
[0032]1.本发明的试剂盒，为子宫内膜容受性的评估提供更优的指标，为生殖障碍患者的分类诊断提供了依据。
[0033]2.本发明的试剂盒的使用方法，为子宫内膜多种免疫细胞的检测提供了稳定、准确的定量分析方法。
[0034]3.本发明的试剂盒，为临床医生准确全面评估患者子宫内膜容受性提供可靠依据，为制定个体化的治疗方案提供了有力保障，为提高生殖障碍患者的成功妊娠率作出巨大贡献，具有较高的临床应用价值和社会效益。
【附图说明】
[0035]图1为本发明的评估子宫内膜容受性试剂盒的检测应用。
[0036]图中，(A)为子宫内膜自然杀伤细胞染色图片，(B)为子宫内膜巨噬细胞染色图片，(C)为子宫内膜T细胞染色图片，(D)为子宫内膜辅助性T细胞染色图片，(E)为子宫内膜杀伤性T细胞染色图片，(F)为子宫内膜调节性T细胞染色图片，(G)为子宫内膜未成熟树突状细胞染色图片，(H)为子宫内膜成熟树突状细胞染色图片。
【具体实施方式】
[0037]以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0038]—种用于评估子宫内膜容受性的试剂盒，包括如下组份:阳性对照、阴性对照、一抗、二抗、洗液、固定剂、脱水剂、水化剂、包埋剂、脱蜡和透明剂、缓冲液A、缓冲液B、抗原修复剂、过氧化物酶失活剂、非特异性蛋白阻断剂、显色液、复染液、分化液、返蓝液和封片剂。
[0039]所述阳性对照为正常育龄妇女子宫内膜组织石蜡块，所述阴性对照为不含一抗的5 % BSA敷育的子宫内膜组织石蜡块。
[0040]所述一抗为抗人自然杀伤细胞表面分子CD56的抗体、抗人巨噬细胞表面分子CD68的抗体、抗人T细胞表面分子CD3的抗体、抗人辅助性T细胞表面分子CD4的抗体、抗人杀伤性T细胞表面分子CD8的抗体、抗人调节性T细胞核转录因子Foxp3的抗体、抗人未成熟树突状细胞表面分子CDla的抗体、抗人成熟树突状细胞表面分子CD83的抗体中的一种，所述二抗为辣根过氧化物酶标记的IgG抗体，所述洗液为生理盐水，所述固定剂为福尔马林，所述脱水剂为浓度为70%v/v、80%v/v、95%v/v、100%v/v的梯度酒精，所述水化剂为浓度为100%v/v、95%v/v、95%v/v、80%v/v的梯度酒精，所述包埋剂为石錯，所述脱錯和透明剂为二甲苯，所述缓冲液A为PBS，所述缓冲液B为I3BST，所述抗原修复剂为pH 9.0的ImM Tri s/Η)ΤΑ溶液，所述过氧化物酶失活剂为3 ^H2O2溶液，所述非特异性蛋白阻断剂为5 % BSA，所述显色液为DAB，所述复染剂为苏木精，所述分化液为I % v/v盐酸酒精，所述返蓝液为I % v/v氨水，所述封片剂为中性树胶。
[0041]—种用于评估子宫内膜容受性的试剂盒的使用方法，包括如下步骤:
[0042](I)将取自活体的人体的子宫内膜作为待测样品、阳性对照和阴性对照，放入20mL生理盐水中，分别除去待测样品、阳性对照和阴性对照上的血块，然后放入SmL的10%福尔马林中固定24h，分别到固定标本；
[0043](2)将步骤(I)所得固定标本，用去离子水清洗，依次放入250mL的75%酒精浸泡2h、80%酒精浸泡2h、95%酒精浸泡1.5h、100%酒精浸泡Ih进行脱水，然后依次放入250mL的二甲苯溶液浸泡20min，另一份二甲苯溶液浸泡20min，再转入另一份二甲苯溶液浸泡20min进行透明化，然后转入石蜡中进行包埋，包埋后置于冷台，待石蜡凝固后，分别形成待测样本组织块、阳性对照组织块和阴性对照组织块；
[0044](3)将步骤(2)所得待测样本组织块、阳性对照组织块和阴性对照组织块，置于切片机上进行连续切片，切片厚度为4μπι，每个组织块切得8张切片，共24张切片，置于37°C水中摊开，然后分别平铺于载玻片上，置于60°C干燥I小时，得到干燥后的切片；
[0045](4)将步骤(3)所得干燥后的切片，放入染色缸中按照以下顺序进行脱蜡:250mL 二甲苯中浸泡I Omin，另一份250mL 二甲苯中浸泡5min，无水酒精与二甲苯等体积混合溶液中浸泡3min，脱蜡后按以下步骤进行水化:100%酒精浸泡2min，95 %酒精浸泡2min，另一份95 %酒精浸泡2min，80 %酒精浸泡2min，然后PBS冲洗3min，得到水化后的切片；
[0046](5)将步骤⑷所得水化后的切片，用去多余的液体，用10yL的3%H202敷育15min，然后用PBS进行冲洗，每次3min，洗3次，得到内源性过氧化物酶灭活后的切片；
[0047](6)将步骤(5)所得内源性过氧化物酶灭活后的切片，放入550mL抗原修复液中进行微波修复15min，室温放置冷却，然后用I3BS进行冲洗，每次3min，洗3次，得到抗原修复后切片；
[0048](7)将步骤(6)所得抗原修复后的切片，甩去多余的液体，加入10yL的5 % BSA室温敷育20min，得到封闭后的切片；
[0049](8)将步骤(7)所得封闭后的切片，除了阴性对照8张切片外，其余切片均甩去5%BSA，分别加入各60yL抗人自然杀伤细胞表面分子CD56的抗体、抗人巨噬细胞表面分子CD68的抗体、抗人T细胞表面分子CD3的抗体、抗人辅助性T细胞表面分子CD4的抗体、抗人杀伤性T细胞表面分子CD8的抗体、抗人调节性T细胞核转录因子Foxp3的抗体、抗人未成熟树突状细胞表面分子CDla的抗体、抗人成熟树突状细胞表面分子CD83的抗体中的一种，均于37°C水浴敷育60min，然后用PBS冲洗，每次3min，洗3次，PBST冲洗，每次3min，洗I次，得到一抗后的切片；
[0050](9)将步骤(8)所得一抗后的切片，甩去多余的液体，每张切片上加入60yL 二抗，370C水浴敷育30min，甩去二抗，然后使用PBS冲洗，每次3min，洗3次，得到二抗后的切片；
[0051 ] (10)将步骤(9)所得二抗后的切片，甩去多余的液体，每张切片上加入60yL DAB显色液进行显色，得到显色后的切片；
[0052](11)将步骤(10)所得显色后的切片，甩去显色液，滴加60uL苏木素复染4min、60uL的I %盐酸酒精分化20s、60uL的I %氨水中返蓝30s，得到返蓝后的切片；
[0053](12)将步骤(11)所得返蓝后的切片，甩去多余的液体，依次转入250mL的70%酒精浸泡2min、80%酒精浸泡2min、95%酒精浸泡2min、100%酒精浸泡2min进行脱水，然后转入250mL的二甲苯溶液浸泡3min，另一份二甲苯溶液1min，另一份二甲苯溶液5min进行透明化处理，得到透明化后的切片；
[0054](13)将步骤(12)所得透明化后的切片，甩去多余的液体，加入1y