一种能使吖啶酯抗原抗体结合物稳定的稀释液及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于化学分析技术领域，具体设及一种能使叮晚醋抗原抗体结合物稳定的 稀释液及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 化学发光免疫分析法是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析法，叮晚醋 是较为理想的发光底物，在碱性条件下，叮晚醋分子受到过氧化氨攻击可生成二氧乙烧，二 氧乙烧不稳定而分解为C〇2和电子激发态的Ν-甲基叮晚酬，当其回到基态时发出波长为 430nm的光。
[0003] 叮晚醋标记物在化学结构上有产生发光的特殊基团，在发光免疫分析过程中直接 参与发光反应。通常运类物质没有本底发光，在反应中能用于检测低浓度或微量浓度的样 品，是一类发光效率很高的发光剂。叮晚醋ι、π分子和叮晚酷胺m均可与抗体(或抗原）结 合，生成具有化学发光活性强、免疫反应特异性高的标记抗体(或抗原）。
[0004] 从目前的技术水平来看，叮晚醋在一般的缓冲液中不稳定、易水解，结合物稀释至 工作浓度时，由于结合物在稀释液中浓度的降低所引起的试剂的稳定性下降，从而导致试 剂的保存期缩短。从体外诊断试剂行业市场来看，叮晚醋抗原抗体结合物的稳定性好坏和 使用效期长短，也会直接影响试剂盒整体的性能指标。
【发明内容】
[0005] 针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种能使叮晚醋抗原抗体结合物稳 定的稀释液，该稀释液克服了叮晚醋在缓冲液不稳定、易水解的缺点，对叮晚醋抗原抗体结 合物起到保护作用，提高了叮晚醋抗原抗体结合物的稳定性，同时延长了使用的效期，还能 充分利用到体外诊断试剂盒中。
[0006] 本发明的另一目的在于提供一种能使叮晚醋抗原抗体结合物稳定的稀释液的制 备方法。
[0007] 实现本发明的目的可W通过采取如下技术方案达到：
[000引一种能使叮晚醋抗原抗体结合物稳定的稀释液，其是由如下质量百分数计的组分 制备而成： 碳水化合物 0.1-2% 多无醇 1-说％ 氨基酸. 0.1-1% 蛋白稳定剂 0.01-2.5%
[0009] 整合剂 0.001-0.1% 表面活性剂 0.01-0.5% 际腐剂 0.01-0.1% 添加剂 0.05-1%: 缓冲液 余量。
[0010] 优选地，所述碳水化合物由薦糖和海藻糖组成，所述薦糖和海藻糖的重量比为（1- 3):1。
[0011] 优选地，所述多元醇为山梨醇、肌醇、异丙醇或甘油其中的一种或两种W上的混合 物;所述氨基酸为丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸或赖氨酸其中的一种或两种W上的混合物。
[0012] 优选地，所述蛋白稳定剂为牛血清白蛋白（BSA)、脱脂奶粉、酪蛋白、小牛血清、牛 IgG或鼠 IgG其中的一种或两种W上的混合物。
[0013] 优选地，所述蛋白稳定剂选自质量百分比为0.1-2.5%的BSA、0.1-1.5%的酪蛋白 或0.01 -0.1 %的牛IgG中的一种或两种W上的混合物。
[0014] 优选地，所述馨合剂为抓TA或DTPA其中的一种或两种的混合物;所述表面活性剂 为Tween-20、Tween-40、乙基苯基聚乙二醇(NP-40)、Triton X-100或十二烷基硫酸钢其中 的一种或两种W上的混合物;所述防腐剂为硫柳隶、Proclin 300、叠氮钢或洗必泰其中的 一种或两种W上的混合物。
[0015] 优选地，所述添加剂选自质量百分比为0.1-1%的聚乙二醇6000。666000)、0.05- 0.5 %的明胶、0.9 %的氯化钢其中的一种或两种W上的混合物。
[0016] 优选地，所述缓冲液选自浓度为0.01-0.2mol/L的巧樣酸盐缓冲液、2-(N-吗啡嘟） 乙横酸缓冲液(MES缓冲液）、化is-HCl缓冲液或憐酸盐缓冲液其中的一种。
[0017] 优选地，所述缓冲液为0.05-0.2mol/L巧樣酸盐缓冲液或0.01-0.1mol/L MES缓冲 液。
[0018] -种能使叮晚醋抗原抗体结合物稳定的稀释液的制备方法，其具体步骤如下：
[0019] 1)按配方量的碳水化各物、多元醇、氨基酸、蛋白稳定剂、馨合剂、表面活性剂、防 腐剂和添加剂加入缓冲液中，揽拌至完全溶解，得到混合液；
[0020] 2)将步骤1)得到的混合液揽拌混匀，加入HC1或化0H调节抑值为6-7,即得到稀释 液。
[0021] 本发明的有益效果在于：
[0022] 1、本发明的稀释液能够使叮晚醋抗原抗体结合物保持稳定、不易水解，延长了试 剂的保存期；
[0023] 2、本发明的稀释液能够保持叮晚醋抗原抗体结合物的稳定性W及使用效期，解决 了试剂盒使用效期短的问题，保证了试剂盒整体的性能指标。
【具体实施方式】
[0024] -种能使叮晚醋抗原抗体结合物稳定的稀释液，其是由如下质量百分数计的组分 制备而成： 碳水化合物 0.1-2% 多元醇 1-10% 氨基酸 0.1-1% 蛋白稳定剂 化則-2.5%
[0025] 整合剂 0.001-0.1% 表面活性剂 0.01-0.5% 防腐剂 0.01-0.1% 添加刺 0.05-1%: 缓冲液 余量。
[0026] 其中，碳水化合物：由薦糖和海藻糖组成，薦糖和海藻糖的重量比为（1-3):1,优选 为2:1;
[0027] 多元醇:选用山梨醇、肌醇、异丙醇或甘油其中的一种或两种W上的混合物，优选 为甘油；
[0028] 氨基酸:选用丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸或赖氨酸其中的一种或两种W上的混合物， 优选为甘氨酸；
[0029] 蛋白稳定剂:选用BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、小牛血清、牛IgG或鼠 IgG其中的一种或 两种W上的混合物，优选为质量百分含量为0.1-2.5%BSA、0.1-1.5%酪蛋白或0.01-0.1 % 牛IgG中的一种或两种W上的混合物；
[0030] 馨合剂:选用邸TA或DTPA其中的一种或两种的混合物，优选为DTPA;
[0031] 表面活性剂:选用Tween-20、Tween-40、NP-40、TritonX-100或十二烷基硫酸钢其 中的一种或两种W上的混合物，优选为质量百分含量为0.01~0.5%的Tween-20或化iton X-100中的一种或两种的混合物；
[0032] 防腐剂:选用硫柳隶、Proclin 300、叠氮钢或洗必泰其中的一种或两种W上的混 合物；
[0033] 添加剂:选自质量百分比为0.1-1 %的阳G6000、0.05-0.5%的明胶、0.9%的氯化 钢其中的一种或两种W上的混合物，优选为质量百分含量为0.05-0.5%PEG6000和0.9%氯 化钢；
[0034] 缓冲液:选自浓度为0.01-0.2mol/L的巧樣酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris-HCl缓冲 液或憐酸盐缓冲液其中的一种，优选为0.05-0.2mol/L的巧樣酸盐缓冲液或0.01-0.1mol/L 的MES缓冲液。
[0035] 稀释液的配制方法如下：
[0036] 1)将上述原料混合，揽拌至完全溶解，得到混合液；
[0037] 2)将步骤1)得到的混合液揽拌混匀，加入肥1或化0H调节抑值为6.4± 0.1，即得到 稀释液。
[003引实施例1:
[0039] -种能使叮晚醋抗原抗体结合物稳定的稀释液，其是由如下质量百分数计的组分 制备而成： 篇糖 0 2% 海藻糖 0 1% 甘油 1% 甘氣酿 0.1% BSA 0.1%
[0040] DTPA 0 002% Tween-20 0 01% 叠氮尉] 0.05% PEG6000 0.05% 氯化铜 0.9% 梓橡酸盐缓冲液 余量。
[0041 ]稀释液的配制方法如下：
[0042] 1)按配方量的薦糖、海藻糖、甘油、甘氨酸、854、0了?4、1^6611-20、叠氮钢、？666000 和氯化钢加入0. 〇5mol/L巧樣酸盐缓冲液中，揽拌至完全溶解，得到混合液；
[0043] 2)将步骤1)得到的混合液揽拌混匀，加入化0的周节抑值为6.4±0.1，即得到稀释 液。
[0044] 用实施例1配制的稀释液对下面结合物进行稀释，结合物分别是日丫晚醋-FSH抗体 和叮晚醋-E2抗原，稀释至工作浓度，得到日丫晚醋-FSH抗体稀释液（1)和日丫晚醋-E2抗原稀释 液（1)。两种稀释后的结合物各分出13瓶，每瓶大概1ml。其中3瓶放置37°C烘箱进行加速实 验，另外5瓶放置2-8 °C冰箱保存，还有5瓶放置室溫保存。
[0045] 实施例2:
[0046] -种能使叮晚醋抗原抗体结合物稳定的稀释液，其是由如下质量百分数计的组分 制备而成： 廉糖 2% 海藻糖 1% 甘冻 10% 甘氨酸 1% BSA 25%
[0047] DTPA 0 01% Tween-20 0 05% 叠氮拥 0.憐 PEG6000 0.5% 氯化納 0.少知
[004引梓橡酸盐缓冲浪 余量。
[0049]稀释液的配制方法如下：
[00加]1)按配方量的薦糖、海藻糖、甘油、甘氨酸、854、0了?4、1^6611-20、叠氮钢、？666000 和氯化钢加入0.2mol/L巧樣酸盐缓冲液中，揽拌至