短，将导致提取的脂肪中含 有非脂成分，进而导致检测结果偏高。由此，根据本发明实施例的冷冻饮品中脂肪含量的测 定方法准确性强、操作简单、稳定性高。
[0025] 根据本发明的实施例，用水定容至10~12mL。发明人意外地发现，定容体积显著影 响检测结果。不加水或定容体积较少的试样在倾倒上层酸液时，容易倒不完全，进而导致检 测结果偏低;定容体积较大时，倾倒上层酸液时，容易带入少量下层液，进而导致检测结果 偏高。由此，根据本发明实施例的冷冻饮品中脂肪含量的测定方法准确性强、操作简单、稳 定性高。
[0026] (3)向水解产物中加入乙醇并混匀。
[0027] 根据本发明的实施例，乙醇的添加量为5~10毫升。乙醇的添加目的是破坏样品溶 液中的蛋白质胶体，其添加量对检测结果的准确性影响显著。发明人经过大量实验优化得 到上述最优乙醇添加量。根据本发明的具体实施例，乙醇浓度为80~98体积％，优选95体 积％。由此，根据本发明实施例的冷冻饮品中脂肪含量的测定方法准确性强、操作简单、稳 定性高。
[0028] (4)向混合液中依次加入乙酸和石油酸，W便对混合液中脂肪进行萃取分离，并分 别获得上层酸液和下层液。
[0029] 根据本发明的实施例，乙酸的添加量为15~25毫升，石油酸的添加量为15~25毫 升。发明人经过大量实验优化得到上述最优添加量。在此添加量下，能够充分地使得脂肪酸 溶于乙酸和石油酸中，使得检测结果的准确性较高。由此，根据本发明实施例的冷冻饮品中 脂肪含量的测定方法准确性强、操作简单、稳定性高。
[0030] 需要说明的是，根据本发明的实施例，"上层酸液"是指静置后混合液的上层液，主 要成分是酸和脂肪。
[0031] 根据本发明的实施例，步骤(4)包括：（4-1)向所述混合液中加入乙酸进行第一混 合，得到第一混合液；W及(4-2)向所述第一混合液中加入石油酸进行第二混合及静置，分 别获得上层酸液和下层液。由此，根据本发明实施例的冷冻饮品中脂肪含量的测定方法准 确性强、操作简单、稳定性高。
[0032] 根据本发明的实施例，第一混合是在100次/min的频率下振摇1分钟，第二混合是 在100次/min的频率下振摇0.5分钟。若混合过于剧烈，将导致混合液形成持久乳化液，脂肪 被包覆其中，进而无法充分提取脂肪，导致检测结果的准确性较低。
[0033] 根据本发明的实施例，静置时间为20~60分钟，优选30分钟。在此最优静置条件下 分层明显，能够有效提取出含有脂肪的上层酸液。
[0034] 根据本发明的实施例，在步骤(5)之前，重复利用乙酸和石油酸对所述下层液中剩 余脂肪进行萃取分离，并合并每次得到的上层酸液，根据本发明的优选实施例，重复次数为 2~5次，由此，能够充分提取脂肪。
[0035] (5)将上层酸液进行蒸发，并将得到的脂肪进行干燥。
[0036] 需要说明的是，蒸发的目的是除去上层酸液中的有机溶剂，对于蒸发的方式不作 严格限定，只要能够将溶剂除去即可。根据本发明的具体实施例，将上层酸液进行旋转蒸发 或者在水浴锅中加热蒸发。
[0037] (6)对干燥后的脂肪进行称重，并基于结果确定冷冻饮品中脂肪含量。
[0038] 另外，本发明提出了另一种冷冻饮品中脂肪含量的测定方法。根据本发明的实施 例，该方法包括：1)将融化的冷冻饮品样品置于毛氏抽脂瓶中，作为样品组；同时，取IOmL水 置于另一毛氏抽脂瓶中，作为对照组，分别将样品组和对照组按照步骤2)~7)进行操作；2) 向毛氏抽脂瓶中加入2mL氯化钢溶液，并轻轻混匀，用水定容至10~12mL，然后加入2mL氨水 混匀，在65 °C下水浴15min，冷却至室溫，加入IOmL乙醇溶液并混匀;3)向毛氏抽脂瓶中加入 25血无水乙酸，Imin振摇100次，振摇过程中放气1-2次，用乙酸一石油酸混合溶剂洗瓶塞至 毛氏抽脂瓶中；4)向毛氏抽脂瓶中加入25mL石油酸，0.5分钟振摇50次，振摇过程中要放气 1-2次，用乙酸一石油酸混合溶剂洗瓶塞至毛氏抽脂瓶中，将毛氏抽脂瓶静置30分钟；5)将 静置后的上层酸液倒入S角瓶中，再向毛氏抽脂瓶中加入15mL无水乙酸，Imin振摇100次， 振摇过程中放气1-2次，用乙酸一石油酸混合溶剂洗瓶塞至毛氏抽脂瓶中；6)向毛氏抽脂瓶 中加入15mL石油酸，0.5min振摇50次，振摇过程中要放气1-2次，静置30分钟，将静置后的上 层酸液倒入所述=角瓶中；7)将=角瓶置于45°C水浴锅中，在通风楓里挥发除去乙酸和石 油酸，将剩有脂肪的S角瓶置于100-105°C烘箱中干燥至恒重，取出在天平室内无尘自然冷 却0.化后称重；8)按照下列公式计算得到冷冻饮品中脂肪含量，脂肪含量％ = ((1112-1111)-(m3-m日））/MX100，式中：ml为加热恒重后样品组的空S角瓶重（g);m2为加热恒重后样品组 的总重（g);m3为加热恒重后对照组的总重（g);m日为加热恒重后空白对照组的空S角瓶重 (g);M为称取冷冻饮品质量(g)。由此，根据本发明实施例的冷冻饮品中脂肪含量的测定方 法准确性强、操作简单、稳定性高。
[0039] 下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的 实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条 件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪 器未注明生产厂商者，均为可W通过市购获得的常规产品。
[0040] 试剂：
[0041] 2 %氯化钢溶液:称取2g氯化钢，溶于98mL水中，混匀。
[0042] 氨水(NMH):质量分数为化％。
[00创乙醇（C她OH):体积分数至少为95%。
[0044] 刚果红溶液(C32出2N6Na2〇6S2):将Ig刚果红溶于100血水中。
[0045] 乙酸(C祖1〇0):不含过氧化物，不含抗氧化剂，并满足实验的要求。
[0046] 石油酸(化出。+2):沸程30-60°(：。
[0047] 乙酸一石油酸混合溶剂:等体积混合乙酸和石油酸，现用现配。
[004引材料；
[0049] ISOmlS角瓶、毛氏提取瓶，水浴锅，烘箱、瓶颈移液器(25ml移液管）
[(K)加]实施例1
[0051] 在该实施例中，按照下列步骤测定冰洪淋中脂肪含量：
[0052] (1)将融化的冷冻饮品样品置于毛氏抽脂瓶中，作为样品组；同时，取IOmL水置于 另一毛氏抽脂瓶中，作为对照组，分别将样品组和对照组按照步骤2)~7)进行操作；
[0053] (2)向毛氏抽脂瓶中加入2mL氯化钢溶液，并轻轻混匀，用水定容至IOmL,然后加入 2mL氨水混匀，并在65°C下水浴15min，冷却至室溫，加入IOmL乙醇溶液并混匀；
[0054] (3)向毛氏抽脂瓶中加入25mL无水乙酸，Imin振摇100次，振摇过程中放气1-2次， 用乙酸一石油酸混合溶剂洗瓶塞，并将所得到的洗液置于毛氏抽脂瓶中；
[0055] (4)向毛氏抽脂瓶中加入25mL石油酸，0.5分钟振摇50次，振摇过程中要放气1-2 次，用乙酸一石油酸混合溶剂洗瓶塞，并将所得到的洗液置于毛氏抽脂瓶中，将毛氏抽脂瓶 静置30分钟；
[0056] (5)将静置后的上层酸液倒入S角瓶中，再向毛氏抽脂瓶中加入15mL无水乙酸， Imin振摇100次，振摇过程中放气1-2次，用乙酸一石油酸混合溶剂洗瓶塞至毛氏抽脂瓶中；
[0057] (6)向毛氏抽脂瓶中加入15mL石油酸，0.5分钟振摇50次，振摇过程中要放气1-2 次，静置30分钟，将静置后的上层酸液倒入=角瓶中；
[0058] (7)将=角瓶置于45°C水浴锅中，在通风楓里挥发除去乙酸和石油酸，将剩有脂肪 的S角瓶置于100-105°C烘箱中干燥化，至恒重，取出在天平室内无尘自然冷却0.化后称 重；
[0059] (8)按照下列公式计算得到冰洪淋中脂肪含量，
[0060