一种牡丹种子脂肪酸含量的无损检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于测试领域，具体设及一种利用近红外光谱测定脂肪酸含量的方法。
【背景技术】
[0002] 牡丹（PaeoniasufTruticosaAn化.）是中国特产的名贵花弁，具有悠久的栽培历 史和深厚的文化底蕴，并越来越受到世界各国人民的喜爱。近几年来，牡丹种子油用价值得 到广泛认可，其种子含油量较高，尤其是a-亚麻酸含量较高，使牡丹巧油具备较高的营养 价值，同时牡丹种子产量也较高，作为新型油料作物，具有广阔的市场开发潜力。长期W来， 植物种子含油量及油脂检测手段主要依靠索氏提取、气相色谱等方法，采用该些传统方法 需要将牡丹种子去皮粉碎然后提取，不仅费时费力，需要使用化学药剂，而且还需要破坏种 子样品，该对油用牡丹的育种和种子品质检测带来极大障碍，制约着牡丹油用品种选育及 规模化商业生产。
[0003] 20世纪80年代之后，近红外光谱检测技术（NIR巧迅速发展起来，是利用有机物 质在近红外光谱区的光学特征，快速估计样品中一种或多种化学成分的含量（Ra化el化nt etal. (2006)Theuseofnear-infraredspectroscopy(NIRS)inthestudyofseed qualitycomponentsinplantbreedingprograms.IndustrialCropsAndProducts 24 (2006) 307-313.)，它的优点是检测快速、成本低廉、操作简便。目前，已应用于多种农作 物种子检测，如油菜、花生、大豆等。
[0004] NIRS检测效果因样品材料而异，油菜、大豆、玉米等种子尺寸较小且较为规则，而 其他如棉巧、油茶巧等尺寸较大的种子则多用粉末或去皮种仁进行测定，并不能实现种子 的无损检测。而牡丹种子尚无NIRS检测技术相关报道。
【发明内容】
[0005] 针对本领域存在的问题，本发明的目的在于提供一种牡丹种子脂肪酸含量的无损 检测方法。
[0006] 实现本发明上述目的的具体技术方案为：
[0007] 一种牡丹种子脂肪酸含量的无损检测方法，其特征在于快速测定、不损伤样品、不 使用化学试剂，包括步骤：
[000引步骤一，采收成熟牡丹种子6(TC烘干作为样品。
[0009] 步骤二，每份样品称取20g放入ANTARIS傅里叶近红外扫描仪（ThermoNicolet Co.，USA)的自动旋转杯中，在4000~lOOOOcnTi范围扫描64次。每份样品重复装填3次， 取平均光谱值。
[0010] 通常近红外测试仪器扫描32次，因为牡丹的种子较大，扫描64次更适宜。
[0011] 步骤=，用气相色谱法测定每份样品的脂肪酸含量，即化学值，最后将光谱值与化 学值建立数学模型，建立数学模型通常用TQAnalystV7. 2软件。
[0012] 步骤四，将未知样品放入傅里叶近红外扫描仪的自动旋转杯中，在4000~ lOOOOcnTi范围扫描64次，每份样品重复装填3次，取平均光谱值，代入所建模型预测出相 关脂肪酸含量。
[0013] 其中，所述步骤一中，牡丹的材料选自栽培牡丹（P.sufTruticosa)、凤丹牡丹 (Paeoniaostii)、紫斑牡丹化rockii)、卵叶牡丹化qiui)、W及巧药化lactiflora)。 基于品种之间、品种内个体之间的差异，可尽可能地广泛选择建模样本，使其能够包括主要 栽培牡丹的种质类型，从而覆盖分析样品的脂肪酸分布范围，获得可靠的数学模型。
[0014] 其中，所述步骤二测得近红外光谱值后，进行光谱基线校正和用马氏距离剔除异 常点。
[0015] 其中，所述步骤=气相色谱法包括步骤：
[0016] 1)提取种子油脂；将牡丹种子去皮粉碎，放入索氏提取器中，W石油離：己酸己醋 体积比7:1回流提取化，得淡黄色油状液体，烘干0.化或敞口放置化备用。
[0017] 2)进行甲醋化；取牡丹巧油1ml，加入0. 5mol/L氨氧化钟-甲醇溶液5ml，充分振 荡后静置lOmin，加过量无水硫酸钢除水，离屯、2min，取上清液1ml进行气相检测。
[001引如气相色谱条件泡谱柱进样口温度250。检测口温度；280°C;初温80°CW5°C/min升温到230°C，保持15min;氨气；40ml/min;空气；300ml/min;进样量；1y1 ;分流比， 30:1。
[0019] 其中，所述步骤=中建立数学模型的脂肪酸包括软脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸。
[0020] 其中，光谱值的预处理方法为多元散射校正、一阶导数、标准正态变量校正、二阶 导数法中的一种或多种。本申请的发明人用上述的四种预处理方法一一处理了牡丹种子的 光谱值，根据数学模型的相关程度，确定了更优的预处理方法：
[0021] 建立亚麻酸数学模型的谱区是7233. 0~5417.Ocnfi，光谱预处理方法为多元散射 校正和一阶导数；建立软脂酸数学模型的谱区是7295. 3~5506. 7cnTi，光谱预处理方法为 多元散射校正和一阶导数；建立亚油酸数学模型的谱区是7447. 8~5860. 3cnTi，光谱预处 理方法为标准正态变量校正和二阶导数；建立油酸数学模型的谱区7295. 3~5860. 3cnTi， 光谱预处理方法为多元散射校正和一阶导数。
[0022] 其中，所述步骤四无损检测未知牡丹种子脂肪酸含量的步骤包括：
[0023] 1)采收待测牡丹的成熟种子60°C烘干作为样品。
[0024] 2)每份样品称取20g放入ANTARIS傅里叶近红外扫描仪（ThermoNicolet Co.，USA)的自动旋转杯中，在4000~lOOOOcnTi范围扫描64次。每份样品重复装填3次， 取平均光谱值。
[002引如将未知样品光谱值代入所述步骤S建立的模型中，预测出软脂酸、油酸、亚油酸 和亚麻酸的含量。
[0026] 本发明的有益效果在于：
[0027]1)实现了牡丹种子软脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸含量的快速无损检测，实际操作 中一份样品的检测不超过2min;
[002引 2)操作简便；
[0029] 3)基于对多种牡丹种子的化学值及光谱值的建模，获得了可靠的数学模型；预测 结果准确性高，模型预测准确性与【背景技术】真实值接近。
【附图说明】
[0030]图1;软脂酸模型图。横坐标为真实值，纵坐标为预测值。
[003U图2;油酸模型图。
[003引图3;亚油酸模型图。
[003引图4;亚麻酸模型图。
【具体实施方式】
[0034] W下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。