离子液体基聚脂质体?金纳米粒子复合物的制备及应用
【专利摘要】本发明公开一种离子液体基聚脂质体?金纳米粒子复合物，其制备方法为，首先利用2?甲基咪唑和溴代?11?碳烯反应制备离子液体基脂质体单体；再通过离子液体基脂质体单体在水溶液中自组装制备成离子液体基脂质体，之后利用热引发方法将离子液体基脂质体制备成离子液体基聚脂质体；再进一步通过离子交换以及原位还原制备离子液体基聚脂质体?金纳米粒子复合物。之后进一步与辣根过氧化物酶复合制备HRP/Polysome?Au/PVA/GC修饰电极，实现酶的活性中心与电极表面的直接电子传输，并利用其性能实现对氧气、过氧化氢、亚硝酸钠的电催化，具有检测范围宽、灵敏度高、检出限低等特点。
【专利说明】
离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物的制备及应用
技术领域
[0001] 本发明属于酶电化学领域，具体涉及一种离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合 物(Polysome-Au)的制备及应用。
【背景技术】
[0002] 电流型酶电化学传感器是指酶活性中心与电极表面的电子传递，但是酶的活性中 心深埋于多肽链内部，难以实现电子传递，因此需要一个媒介体把酶产生的电子转移到电 极表面，增强电极响应。酶电化学生物传感器发展包括以下三个阶段。
[0003] 以氧为媒介的第一代酶传感器:该类传感器是通过检测h2〇2的浓度变化或者〇2的 消耗量来测定底物的浓度。但是这种方法也有缺点：一方面受到溶解氧的浓度的影响导致 传感器响应的波动；另一方面传感器受温度和pH的影响很大。因此第一代酶电极生物传感 器在应用上存在一定的局限性。
[0004] 基于人工合成的媒介体的第二代传感器:与第一代酶生物传感器相比，第二代酶 生物传感器的优点是:促进了电子的传递速度，降低了工作电势，提高了灵敏度，扩大了电 极的检测范围。常见的电子媒介体有:有机染料分子、二茂铁及其衍生物、高分子媒介体、铁 氰酸盐、有机导电盐等。这些电子媒介体的引入增强了酶与电极间的电子传递。同时也带来 了新的问题:加入的媒介体容易对电极产生污染、降低酶的活性，因此会影响电极的性能。
[0005] 直接电子传递的第三代传感器:第三代传感器不需要引入电子媒介体，主要是酶 的活性中心与电极表面之间的直接电子传递，从而使少数酶与电极之间的直接电化学成为 可能。同时也排除了其他物质对电极表面的干扰，这是第三代传感器最大的优点。
[0006] -些高分子量酶或蛋白质的活性中心被多肽链包埋，形成的不利反应位点或深埋 的活性中心很难实现电子的直接传递，只有一些分子量较小的蛋白质或酶且有合适的反应 位点，在电极上才能观察到电子的直接传递。主要用以下几种方法实现酶与电极之间的直 接电子传递：（1)加入促进剂，使酶与促进剂之间通过静电作用或形成氢键，连接酶的活性 中心和电极表面，促进电子直接传递。（2)形成电子转移介质，缩短电子传输距离。（3)将酶 负载于电极表面。（4)将酶与导电聚合物复合。
【发明内容】
[0007] 本发明目的是提供一种离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物(Polysome-Au) 的制备及应用，采用原位聚合以及原位还原的方法制备得到离子液体基聚脂质体-金纳米 粒子复合物，之后进一步与辣根过氧化物酶(HRP)复合制备HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰 电极，实现酶的活性中心与电极表面的直接电子传输，并利用其性能实现对氧气、过氧化氢 (H 202)、亚硝酸钠(NaN02)的电催化，具有检测范围宽、灵敏度高、检出限低等特点。
[0008] 本发明采用的技术方案为：
[0009] 离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物(Polysome-Au )，制备方法为，首先利用 2_甲基咪唑和溴代-11-碳烯反应制备离子液体基脂质体单体（lipid);再通过离子液体基 脂质体单体在水溶液中自组装制备成离子液体基脂质体(liposome)，之后利用热引发方法 将离子液体基脂质体制备成离子液体基聚脂质体(Polysome);再进一步通过离子交换以及 原位还原制备离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物。
[0010]所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，制备方法具体包括如下步骤： [0011] (1)将2-甲基咪唑、三乙胺、溴代-11-碳烯混合于甲苯中，加热反应，之后过滤，真 空旋干，重结晶，得到黄白色粉末，即离子液体基脂质体单体(lipid);
[0012] (2)取离子液体基脂质体单体(lipid)溶于去离子水中，超声得到澄清透明溶液A， 即为离子液体基脂质体(1 i P〇 s ome)溶液；
[0013] (3)取离子液体基脂质体（liposome)溶液于两口瓶中，加入过硫酸钾(K2S 208)，在 反应温度为l〇〇°C氮气保护下反应24h，得到澄清透明溶液B即为离子液体基聚脂质体 (Polysome)；
[0014] (4)取离子液体基聚脂质体(Polysome)于样品瓶中，滴加氯金酸(HA11CI4)，在室温 下振荡12h，反应结束后，离心，将离心产物加水稀释得溶液A，之后向溶液A中滴加硼氢化钠 (NaBH4)还原剂反应2h，最后得到离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物。
[0015]所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，步骤1)中2-甲基咪唑、三乙胺和 溴代-11-碳烯的投料摩尔比为6.1:7.3:12.2。
[0016]所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，步骤（1)将2-甲基咪唑、三乙胺、 溴代-11-碳烯混合于甲苯中，于90°C下反应48h后，抽滤除去固体，蒸干溶剂，用正己烷多次 洗涤，蒸干溶剂后用乙腈-乙酸乙酯混合溶剂重结晶，得到黄白色粉末。
[0017]所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，步骤(2)澄清透明溶液A的浓度 为l_2mg/mL〇
[0018]所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，步骤(3)中过硫酸钾(K2S20 8)和 离子液体基脂质体的摩尔比为0.6:1。
[0019]所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，步骤(4)中反应滴加的氯金酸 HAuCl4的量为2mL，0.02mol/L;反应加入的硼氢化钠NaBH4的量为4mL，0.01mol/mL。
[0020 ] -种如上述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物在制备酶基修饰电极上的 应用。
[0021]所述的应用，所述离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物与辣根过氧化物酶 (HRP)构建成酶基修饰电极。
[0022]所述的应用，所述酶基修饰电极可对氧气、过氧化氢和亚硝酸钠进行电催化。
[0023]本发明具有以下有益效果：
[0024] 本发明采用共价键作用制备具有良好生物相容性和导电性的离子液体基聚脂质 体(Polysome)，在生物传感器、化学工程以及生物医药等领域有着非常广阔的应用前景，为 实现离子液体基聚脂质体等纳米复合物在医药、化学领域的进一步工业化提供理论依据。
[0025] 本发明致力于离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物修饰电极在电化学领域的 方法研究，并进一步拓展了离子液体基聚脂质体的应用领域。结果表明，利用本发明所述的 方法，对氧气、过氧化氢(H 202)、亚硝酸钠(NaN02)都有良好的催化效果，体现出检测范围宽、 灵敏度高、检出限低等特点。同时探究了离子液体基脂质体（liposome)及其复合物的形貌 特征、表面性质和内在结构。离子液体具有蒸汽压低、导电率高、电化学电位窗口宽、较强的 溶解能力等许多优良的物理化学性能。因此在分离萃取、催化合成及电化学研究等方面有 着重要的应用。脂质体具有与细胞膜相似的化学组成，有较好的生物相容性和稳定性。在离 子液体基脂质体（liposome)的基础上利用原位聚合法制备离子液体基聚脂质体 (Polysome)，再利用离子交换以及原位还原法得到离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合 物(Polysome-Au)，之后进一步固载辣根过氧化物酶(HRP)构建酶基修饰电极。因此可在此 基础上，探讨该类材料的合成策略、特殊性能及其在电化学领域的应用。
[0026]本发明利用2-甲基咪唑和溴代-11-碳烯反应制备离子液体基脂质体单体 (lipid)，反应方程式如下：
[0028]离子液体基脂质体单体在水溶液中自组装制备成离子液体基脂质体(liposome)， 之后利用热引发的方法将离子液体基脂质体制备成离子液体基聚脂质体(Polysome)，进一 步离子交换以及原位还原制备离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，并利用其自身的 生物相容性和导电性，与辣根过氧化物酶HRP构建HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极，实现 酶的活性中心与电极表面之间的电子传输，同时利用修饰电极对氧气、过氧化氢(H2〇2 )、亚 硝酸钠(NaN02)都有良好的催化效果，从而实现了修饰电极的实用价值。
【附图说明】
[0029] 图1实施例1中脂质体单体合成示意图。
[0030] 图2实施例1中脂质体单体的核磁氢谱图。
[0031 ]图3实施例1中脂质体单体的红外吸收光谱图。
[0032]图 4 实施例3 中 Polysome-Au 的 TEM 图。
[0033] 图5实施例3中a为HRP/Polysome-Au，b为HRP的紫外-可见吸收光谱图。
[0034] 图6实施例3中a为HRP/Polysome-Au，b为HRP的红外吸收光谱图。
[0035] 图7实施例5中HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在N2饱和的磷酸缓冲溶液PBS (pH 7.0)中的循环伏安图。扫速:200mV/s。
[0036] 图 8a 实施例 5 中（A)HRP/Polysome-Au/PVA/GC 修饰电极在 N2 饱和的 PBS(pH 7.0) 中，扫速从50mV/s到500mV/s (a-j)的循环伏安曲线图。
[0037] 图8b实施例5中峰电流与扫速的线性关系图。
[0038] 图 9 实施例6 中 HRP/Polysome-Au/PVA/GC 修饰电极在 PBS(pH 7.0)中，含有：（a) OmL，（b)5mL，（c) 10mL，（d) 15mL，（e)20mL氧气的循环伏安曲线（扫速:200mV/s)。
[0039] 图 l〇a实施例6中HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在N2饱和的roS(pH 7.0)中， 对H2〇2的催化循环伏安曲线图（扫速:200mV/s);含有H 2〇2的浓度分别是:0.00yM(a)，327.16 yM(b)，1127.16yM(c)，2127.16yM(d)，3827.16yM(e)，5427.16yM(f)。
[0040] 图l〇b HRP/Polysome_Au/PVA/GC(a)与HRP/Polysome/PVA/GC(b)催化峰电流与 H2O2浓度校正曲线图。
[0041 ] 图11实施例6中HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在N2饱和的roS(pH 7.0)中，对 H2〇2的催化的I-t曲线。
[0042] 图123实施例6中册?/?〇178〇1116-411/?￥4/6(：修饰电极在吣饱和的1^5(口115.7)中， 对NaN02的催化循环伏安曲线图（扫速：200mV/s);含有NaN02的浓度分别是：0.00mM(a)， 30.826mM(b)，162.826mM(c)，518.826mM(d)，1418.826mM(e)。
[0043] 图12b为催化峰电流与NaN〇2浓度校正曲线图。
【具体实施方式】
[0044] 为了更好地理解本发明的技术方案，特以具体的实施例作进一步详细说明，但方 案不限于此。
[0045] 实施例1(离子液体基脂质体单体的合成）
[0046] 取50mL甲苯于100mL圆底烧瓶中，向其中加入2-甲基咪唑（6. lmmoL，0.5000g)，然 后再加入三乙胺(7.3mmoL，1.017mL)和溴代-11 -碳烯（12.2mmoL，2.66mL)，90 °C 反应48h，之 后抽滤除去胺盐固体，蒸干溶剂，用正己烷多次洗涤，蒸干溶剂后用乙腈-乙酸乙酯混合溶 剂重结晶，得到黄白色粉末。脂质体单体的合成如图1所示。
[0047] 图2所示为脂质体单体的核磁氢谱图，其核磁共振数据为，1HNMR(氘代甲醇）：5 = 7.55(s，2H)，5.8h5.76(m，2H)，4.95-4.89(dd，4H)，4.15-4.13(t，4H)，2.64(s，3H)，2.05-2.01(111，41〇，1.85-1.81(111，41〇，1.37-1.31口口111(111，241〇，溶剂峰是4.90与3.3(^口111。由图2可 知，以上结果与脂质体单体的结构相符。
[0048]图3为脂质体单体的红外吸收光谱图，由图3可知，1191CHT1归属为咪唑环上的C-H 的面内变形振动，1372和1456CHT1归属为C-H面内弯曲振动，1522CHT1归属为咪唑环C-N伸缩 振动吸收峰，1630CHT 1归属为碳碳双键伸缩振动峰，3068CHT1归属为咪唑环上C-H伸缩振动 吸收峰。以上结果与脂质体单体的结构相符。
[0049] 实施例2(离子液体基脂质体和聚脂质体的合成）
[0050] 取离子液体基脂质体单体155.Omg溶于100mL去离子水中，超声得到澄清透明溶 液，即为离子液体基脂质体（1 iposome)，浓度为1.55mg/mL，脂质体溶液较为稳定，室温下放 置两周无沉降现象。
[0051 ]取liposome溶液25mL(0? lmmoL，0 ? 0388g)于两口瓶中，加入0 ? 0150g(0 ? 06mmoL)过 硫酸钾(K2S2〇8)，反应温度为100°C氮气保护下反应24h，得到澄清透明溶液即为离子液体基 聚脂质体(Polysome)。
[0052]实施例3(离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物的合成）
[0053]取 1.55mg/mL的Polysome 4mL于样品瓶中，滴加0.02mol/L的氯金酸（HAuCl4)2mL， 在室温下振荡12h，反应结束后，以lOOOOrpm离心5min除去多余的HA11CI4,将离心的产物加 水稀释至2.0mg/mL，之后滴加0 . Olmol/mL的硼氢化钠(NaBH4)4mL还原剂反应2h，最后得到 1 .Omg/mL的Polysome-Au溶液。图4为Polysome-Au的TEM图，由图4可知Polysome-Au为明显 的球形形貌，大小为200nm左右，同时可以观察到细小的金颗粒均勾的附着在Polysome上。 金纳米粒子的粒径小于10nm，这是氯金酸原位还原的结果，因此也证明了Polysome有较好 的稳定性可作为纳米复合物的基底。图5为HRP/Polysome-Au和HRP的紫外-可见吸收光谱 图，由图5可知曲线b中HRP在403nm处有紫外特征吸收峰，HRP/Polysome-Au复合材料的紫外 光谱在408nm处有明显的Soret带的吸收峰（曲线a)，与天然HRP的特征吸收峰出现的位置相 近。说明酶电极构建过程中HRP的结构没有破坏，保持了它固有结构。
[0054] 图6为HRP/Polysome-Au和HRP的红外吸收光谱图，由图6可知b曲线可以观察到HRP 在1652CHT 1和1539CHT1处分别是酰胺I带和酰胺II带的特征吸收峰，从HRP/Polysome-Au复 合物的红外光谱图a曲线中可以观察到固载于Polysome-Au上的HRP的酰胺I带（1655〇1^)和 酰胺II带（1539CHT 1)的特征吸收峰，与HRP固有的特征吸收峰几乎完全相同，这证明了固载 于修饰电极上的HRP保持了其固有的二级结构。
[0055] 实施例4(离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物修饰电极的制备）
[0056] 取3uL HRP/Polysome-Au复合物（1 .Omg/mL Polysome-Au与lOmg/mLHRP 2:1 混合） 滴涂到预处理好的电极表面，用烧杯罩住电极，室温下使水分缓慢蒸发，这样可以在电极表 面形成一层HRP/Polysome-Au薄膜，室温干燥后滴涂3% (聚乙烯醇)PVA 5此，即得到HRP/ Polysome-Au/PVA/GC 修饰电极。
[0057] 实施例5(离子液体基聚脂质体_金纳米粒子复合物的电化学性能）
[0058] 如无特殊说明，本实验都是以0.1M磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液（PBS，pH 7.0)作为支持电解质。循环伏安法实验使用CHI 760E电化学工作站进行。所有实验均采用 三电极体系，以HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极为工作电极，铂电极为对电极，Ag/AgCl (饱和KC1)电极为参比电极。所有的电化学测试都是在室温下进行，实验前取5.OmL的PBS缓 冲溶液于电解池中，高纯氮气除氧30min，实验过程中无特殊说明一直保持氮气气氛。
[0059] 图7为HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在N2饱和的roS(pH 7.0)中的循环伏安 图，扫速:200mV/s。由图7可知在电位扫描范围0 ? 2~-0 ? 8V内，修饰电极HRP/Polysome-Au/ PVA/GC修饰电极氧化还原峰电位分别是-0.319￥，-0.260￥，电极的电位差(八￡口)为7611^。氧 化还原峰是由于HRP中氧化还原电对(F em/Fen)在电极表面发生了直接电子转移产生的， HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极的有效还原峰电流为0.486tiA，同时HRP/Polysome-Au/ PVA/GC的式电位与文献中报道的同样条件下的HRP式电位一致，HRP/Polysome-Au有很好的 生物相溶性和较快的电子传输速度，可以作为理想的电极材料。
[0060] 图 8a 为 HRP/Polysome-Au/PVA/GC 修饰电极在 N2 饱和的 PBS(pH 7.0)中，扫速从 50mV/s至lj500mV/s(a-j)的循环伏安曲线图；图8b为峰电流与扫速的线性关系图。如图8a所 示，随扫速的增加，氧化还原峰电流不断增大。在-0.8~0.2V电位范围内，峰电流与扫速成 良好的线性关系（如图8b)，说明电子在电极表面和HRP之间的传递过程为表面控制电化学 反应过程。根据法拉第定律Q = nFAr*(Q根据循环伏安曲线中还原峰的积分峰面积得出；n 为电子转移数;F为法拉第常数96485;A为GC电极的几何面积约0.07cm2; r *为表面覆盖量 mol ? cnf2)可以估算出电活性的HRP在电极表面的覆盖度（r*)约为4.28Xl(Tnm〇l ? cnf2。 此值大于辣根过氧化物酶在电极表面单层理论覆盖值(2.0Xl(rnm〇l ? cnf2)，由此可以说 明固载到P〇lysome-Au上的HRP发生了多电子层转移。
[0061] 实施例6(离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物的电化学催化性能）
[0062] 图9为HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在PBS(pH 7.0)中，对氧气的催化循环伏 安曲线图（扫速：200mV/s);含有氧气的体积分别是：0ml(a)、5ml(b)、10ml(c)、15ml(d)、 20ml (e)，如图所示HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极只有一对HRPFem/Fen电对的氧化还 原峰。向PBS缓冲溶液中逐渐通入氧气，随着通入的氧气的量的逐渐增多，氧化峰电流逐渐 减小，并且还原峰电流同时逐渐增大，说明HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极对氧气有良 好的电化学催化性能。
[0063] 图 l〇a为HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在N2饱和的PBS(pH 7.0)中，对H2O2的 催化循环伏安曲线图（扫速:200mV/s);含有H2〇2的浓度分别是:0.00yM(a)，327.16yM(b)， 1127 ? 16yM(c)，2127.16yM(d)，3827 ? 16yM(e)，5427 ? 16yM(f);由图可知在PBS缓冲溶液中加 入H2〇2后，在-0.30V左右出现了一个明显的还原峰，当H 2〇2的量逐渐增加时，还原峰电流也 随着逐渐增大，而氧化峰电流逐渐减小直至消失。说明HRP/Po 1 y some-Au/PVA/GC修饰电极 对溶液中加入的H2〇2发生了典型的催化还原过程。说明修饰电极不但能够很好的实现HRP的 直接电子转移，而且实时地监测了电极上的HRP对溶液中H 2〇2的催化还原过程。
[0064] 图10b为HRP/Po 1 y some-Au/PVA/GC修饰电极的催化峰电流与H202浓度校正曲线图。 由图可知当H2〇2的浓度在2 ? 00 X 10-Vol/L~2 ? 13 X 10-3mol/L和2 ? 13 X 10-3mol/L~5 ? 43 X 1 (T3mo 1 /L范围内时，底物浓度值与峰电流呈现出良好的线性关系，线性回归方程分别为y = 0.0019x+0.48(R = 0.99353)和y = 8.97X 10-4x+2.56(R = 0.99514)，最低检出限为6.67 X 10_3yM(S/N=3)。根据曲线中校准曲线直线部分的斜率，可以得知HRP/Polysome-Au/PVA/GC 修饰电极的灵敏度分别为27.00mA ? cnf2 ? IVT1 和13.00mA ? cnf2 ? IVT1。说明，HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极有较宽的检测范围和较高的灵敏度。
[0065] 图 11为HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在N2饱和的PBS(pH 7.0)中，对H2O2的催 化的I-t曲线。如图所示HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在对H2〇 2的催化的I-t曲线中，工 作电位是-0.62V。当H2〇2加入到不断搅拌的PBS缓冲溶液中，修饰电极响应非常迅速，但是可 以看出HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极的灵敏度高而且衰减过程较慢，说明Polysome-Au有更好的稳定性和灵敏度。稳态响应电流随着加入的H2O2浓度的增加而增大，可在5s内迅 速达到稳态电流。
[0066] 图 12a为HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电极在N2饱和的PBS(pH 5? 7)中，对NaN〇2的 催化循环伏安曲线图（扫速:200mV/s);含有NaN02的浓度分别是:0.00mM(a)，30.826mM(b)， 162.826mM(c)，518.826mM(d)，1418.826mM(e);由图12a可知将不同浓度的NaN〇2溶液加入 到PBS缓冲溶液电解质中时，在-0.8V左右出现硝酸的还原峰，并且随着NaN0 2浓度的不断增 加，还原峰电流不断增大，说明HRP/Po 1 y some-Au/PVA/GC修饰电极对溶液中加入的NaN02发 生了典型的催化还原过程。
[0067] 图12b为催化峰电流与NaN02浓度校正曲线图。由图12b可知NaN02浓度在2.00 X 10 Aiol/L~1.42mol/L的范围内与催化峰电流成良好的线性关系，线性回归方程为y = 0.021x +5.85(1? = 0.99618)^和7分别代表他如2浓度(1111)和还原峰电流(^)，最低检出限为6.67 X 10-4mM(S/N = 3)，由校正曲线的部分直线斜率可以得到HRP/Polysome-Au/PVA/GC修饰电 极的灵敏度为〇.29mA ? cnf2 ? if1。
【主权项】
1. 离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物Polysome-Au，其特征在于，制备方法为，首 先利用2-甲基咪唑和溴代-11-碳烯反应制备离子液体基脂质体单体lipid;再通过离子液 体基脂质体单体在水溶液中自组装制备成离子液体基脂质体liposome，之后利用热引发方 法将离子液体基脂质体制备成离子液体基聚脂质体Polysome;再进一步通过离子交换以及 原位还原制备离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物。2. 如权利要求1所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，其特征在于，制备方 法具体包括如下步骤： (1) 将2-甲基咪唑、三乙胺、溴代-11-碳烯混合于甲苯中，加热反应，之后过滤，真空旋 干，重结晶，得到黄白色粉末，即离子液体基脂质体单体； (2) 取离子液体基脂质体单体溶于去离子水中，超声得到澄清透明溶液A，即为离子液 体基脂质体溶液； (3) 取离子液体基脂质体溶液于两口瓶中，加入过硫酸钾K2S2〇8,在反应温度为100°C氮 气保护下反应24h，得到澄清透明溶液B即为离子液体基聚脂质体； (4) 取离子液体基聚脂质体于样品瓶中，滴加氯金酸HAuC14,在室温下振荡12h，反应结 束后，离心，将离心产物加水稀释得溶液A，之后向溶液A中滴加硼氢化钠 NaBH4还原剂反应 2h，最后得到离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物。3. 如权利要求2所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，其特征在于，步骤1) 中2-甲基咪唑、三乙胺和溴代-11-碳烯的投料摩尔比为6.1:7.3:12.2。4. 如权利要求2所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，其特征在于，步骤（1) 将2-甲基咪唑、三乙胺、溴代-11-碳烯混合于甲苯中，于90°C下反应48h后，抽滤除去固体， 蒸干溶剂，用正己烷多次洗涤，蒸干溶剂后用乙腈-乙酸乙酯混合溶剂重结晶，得到黄白色 粉末。5. 如权利要求2所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，其特征在于，步骤(2) 澄清透明溶液A的浓度为l_2mg/mL。6. 如权利要求2所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，其特征在于，步骤(3) 中过硫酸钾Κ2&0 8和离子液体基脂质体的摩尔比为0.6:1。7. 如权利要求2所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物，其特征在于，步骤(4) 中反应滴加的氯金酸HAuCl4的量为2mL，0.02mol/L;反应加入的硼氢化钠 NaBH4的量为4mL， 0·01mol/mL〇8. -种如权利要求1所述的离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合物在制备酶基修饰 电极上的应用。9. 如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述离子液体基聚脂质体-金纳米粒子复合 物与辣根过氧化物酶HRP构建成酶基修饰电极。10. 如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述酶基修饰电极可对氧气、过氧化氢和亚 硝酸钠进行电催化。
【文档编号】G01N27/327GK106053571SQ201610352712
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年5月25日
【发明人】夏立新, 田艳平, 张谦, 张俊慧
【申请人】辽宁大学