一种pct时间分辨荧光纳米免疫层析定量检测试纸条的制作方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型属于免疫层析检测技术领域，具体设及一种PCT时间分辨巧光纳米免 疫层析定量检测试纸条。
【背景技术】
[0002] 降巧素原(P;rocalcitonin，PCT)，是由116个氨基酸组成的糖蛋白质，无激素活性。 为降巧素(CT)的前肤物质。健康人血浆PCT含量极低，当严重细菌、真菌、寄生虫感染W及脈 毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高，并且在2~6小时内在循环中就可W被检 巧慢Ij。降巧素原的半衰期约为20-24小时，在炎症过后很快就会恢复正常水平。自身免疫、过 敏和病毒感染时PCT不会升高。局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症也不会导致其 升高。
[0003] PCT反映了全身炎症反应的活跃程度。影响PCT水平的因素包括被感染器官的大小 和类型、细菌的种类、炎症的程度和免疫反应的状况。另外，PCT只是在少数患者的大型外科 术后1~4d可W测到。
[0004] PCT是诊断和监测细菌炎性疾病感染的一个参数。监测有感染危险的患者(如外科 术后和器官移植后免疫抑制期，多处创伤后）W及需要重症监护患者，用来探测细菌感染的 全身影响或检测脈毒性并发症。
[0005] 截止目前还未有一种PCT时间分辨巧光纳米免疫层析定量检测试纸条。 【实用新型内容】
[0006] 本实用新型的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种PCT时间分辨巧光 纳米免疫层析定量检测试纸条。
[0007] 本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是：
[000引一种PCT时间分辨巧光纳米免疫层析定量检测试纸条，包括背衬底板，该背衬底板 上设置有硝酸纤维素膜、样品结合垫和吸水膜，该样品结合垫和吸水膜分别叠压在硝酸纤 维素膜的两端上;该样品结合垫上包被有时间分辨巧光物质标记的PCT单克隆抗体;该硝酸 纤维素膜上设有检测线和质控线，该检测线包被有另一个表位的PCT单克隆抗体，该质控线 包被有羊抗鼠 IgG。
[0009] 一实施例中：所述时间分辨巧光物质为铜系元素、铜系元素与乳胶的结合物、铜系 元素的馨合物中的一种。
[0010] -实施例中:所述铜系元素为館，铺，衫或铺中的一种。
[0011] -实施例中:所述样品结合垫为玻璃纤维素膜或聚醋膜。
[0012] -实施例中：所述样品结合垫为玻璃纤维素膜或聚醋膜经表面活性剂缓冲液浸泡 处理后干燥而得。
[0013] -实施例中:所述试纸条外还包裹有一壳体。
[0014] 本技术方案与【背景技术】相比，它具有如下优点：
[0015] 1.传统的定量检测试纸条分别设有样品垫和结合垫，血清/血浆等样品首先与样 品垫接触，样品垫对样品进行预处理，去除样品中杂质颗粒，调节样品液抑值或粘度等，减 缓样品渗透速度，有利于样品的均匀分布;经样品垫预处理过后的均匀的样品再流动至结 合垫上与标记抗体发生结合，才能够保证定量反应的准确性，如果不经预处理，样品在结合 垫上的结合量无法把握，且结合稳定性也差，更加难W实现定量效果;而本实用新型采用一 个样品结合垫代替传统的样品垫和结合垫，该样品结合垫上准确而均匀地分布有标记抗 体，既能保证样品得到预处理，又能保证样品结合一定量的标记抗体，保证了定量反应的准 确性，经检测，准确度和精密度良好;同时，也使得试纸条结构和制备过程得到简化。
[0016] 2.本实用新型的PCT时间分辨巧光纳米免疫层析定量检测试纸条，利用时间分辨 巧光免疫分析（1山日寸日3〇1￥日(1；1^11101'〇-；[1]11]111]10日3 3日7，了1?。14)运种新型非放射性标记免疫 分析技术。与传统的巧光素标记不同，采用具有独特巧光特性的铜系元素及其馨合物作为 时间分辨巧光物质，铜系元素激发光与发射光之间的Stokes位移较大，避免了激发及发射 光谱存在的重叠问题，排除激发光的干扰，通过波长分辨方式使其明显的区别于背景巧光； 且铜系元素激发光光谱较宽，可采用只允许发射巧光通过的滤光片，从而进一步将抢特异 性巧光和背景巧光区分开，消除干扰;铜系离子馨合物的巧光衰变时间长，为传统巧光的 103~106倍，通过测定时间差可W实现高信噪比；同时其可W反复接受激发，从而大大提高 仪器探测到的信号值，有效排除样品自然巧光的干扰，具有灵敏度高，特异性强、稳定性好 和无放射性污染等特点，可广泛应用于PCT的临床免疫检验和科学研究中。
[0017] 3.本实用新型的NGAL时间分辨巧光纳米免疫层析定量检测试纸条制作方便，可批 量生产;体积小，便于携带。
【附图说明】
[0018] 下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步说明。
[0019] 图1为本实用新型的PCT时间分辨巧光纳米免疫层析定量检测试纸条结构示意图。
[0020] 附图标记:样品结合垫1;时间分辨巧光物质标记的PCT单克隆抗体2;硝酸纤维素 膜3;检测线4;质控线5;吸水膜6;背衬底板7。
【具体实施方式】
[0021] 下面通过实施例具体说明本实用新型的内容：
[0022] 请查阅图1，一种PCT时间分辨巧光纳米免疫层析定量检测试纸条，包括背衬底板 7,该背衬底板7上设置有硝酸纤维素膜3、样品结合垫1和吸水膜6,该样品结合垫1和吸水膜 6分别叠压在硝酸纤维素膜3的两端上;该样品结合垫1上包被有时间分辨巧光物质标记的 PCT单克隆抗体2;该硝酸纤维素膜3上设有检测线4(Τ线)和质控线5(C线），检测线4(Τ线)包 被有另一个表位的PCT单克隆抗体，质控线5(C线)包被有羊抗鼠 IgG。
[0023] 上述试纸条可W通过W下制备方法制备：
[0024] 1)硝酸纤维素膜(NC膜)处理
[0025] 将NC膜贴至背衬底板的制定位置，取50mM的抑7.4憐酸盐缓冲液将另一个表位的 PCT单克隆抗体稀释至Img/ml，用于制备T线；用0.05M的MES缓冲液将羊抗鼠 IgG抗体稀释至 0.5mg/ml，用于制备C线；按化1/cm划液量，通过biodot划膜仪将上述两种稀释后的抗体均 匀的划至NC膜上制备Τ线和C线;将划好的NC膜放置于5(TC干燥箱中，干燥过夜。
[00%] 2)样品结合垫的处