用于从所获得的基于干细胞的生物材料收集、低温存储和分配化妆配制品的商业方法、过...的制作方法_3

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制备一种自体性化妆品组合物的方法,该 方法包括从一位客户获得获得一种生物样品并且离分该生物样品以便获得一种限定的离 分的产品的步骤。
[0058] 将该限定的离分的产品与一种生长培养基结合以便获得生长至融合的干细胞。将 这些生长至融合的干细胞与一种非生长培养基结合以便获得一种活性物质,将这种活性物 质分离出。将该分离的活性物质与一种化妆配制品结合。该分离的活性物质与该化妆配制 品的结合产生了一种所希望的化妆产品。
[0059] 参见图2,展示了本方法实施例110,该生物样品是脂肪组织,通过抽吸获得112 ; 最常见的是由一位医学专业人员。然而,本领域普通技术人员将认识到本发明不限于脂肪 组织但可以针对其他的生物样品,例如富含血小板的血浆(PRP)。
[0060] 在本实施例中限定的离分的产品是一个基质血管部分(SVF);支持生长的脂肪组 织部分。更具体地,SVF是从吸脂碱脂细胞(liposuction minus the fat cells)(脂肪细 胞)获得的脂肪抽吸物(lipoaspirate)。除了脂肪细胞,该SVF含有多种其他的细胞例如 前脂肪细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、周皮细胞、成纤维细胞、和成体干细胞(ASC)。此外,该 SVF还含有来自毛细血管(提供脂细胞)的血细胞。这些包括红细胞或红血细胞、B和T细 胞、巨噬细胞、单核细胞、肥大细胞、自然杀伤(NK)细胞、造血干细胞和内皮祖细胞,仅举几 个例子。此外,SVF,除了脂肪细胞内分泌之外,还含有例如(除其他之外)转化生长因子β (TGF)、血小板源生长因子(PDGF)、以及成纤维细胞生长因子(FGF)。这符合在一种细胞外 基质的存在下的细胞的分泌物。该SVF还含有存在于脂肪组织中的不同的蛋白。
[0061] 分离以便获得限定的离分产物114,例如SVF,可以以如本文中讨论的多种方法实 现。在一种方法114Α中,脂肪组织的离分可以通过超声空化实现,主要与细胞破碎(溶解} 或分解有关。总体上,在描述超声空化时,当以高强度超声处理液体时,传播进该液体培养 基的声波导致交替的高压(压缩)和低压(稀薄)周期,其中速度取决于频率。在低压周期过 程中,高强度超声波在该液体中产生小的真空泡或空隙。 当这些泡达到了它们不再能吸收能量的体积时,它们在高压周期过程中剧烈坍塌。 这种现象称为空化。在该内爆过程中,局部达到了非常高的温度(约5. 000Κ)和压力(约 2,000atm)。空泡的内爆还导致高达280m/s速度的液体喷射。获得的切力机械地破坏细胞 包膜并且改进材料传递。超声对细胞可以具有或者破坏性的或建设性的作用,这取决于使 用的超声处理参数。
[0062] 可替代地,离分可以通过脂肪组织的酶消化来实现114B,其中化学物质离分该细 胞以便获得限定的离分的产品。
[0063] 将基质血管部分与一种生长培养基相结合以便使干细胞生长至融合116。该生长 培养基可以具有多种可商购的产品,这些产品具有允许生长的组合成。然而,可以使用物种 特定培养基,这将消除任何类型的免疫反应,例如在美国专利号7, 989, 205中描述的培养 基。本领域普通技术人员将认识到可以重复该过程的这个步骤以便获得限定的或要求的细 胞数。
[0064] 在生长至融合时,可以加入一种酶,例如胰蛋白酶(Tripson),以便消化来自其中 "生长发生的"容器的"表面"的键联,其中这些干细胞"漂浮(float)"在该液体培养基中。 通过倾倒掉生长培养基分离出干细胞并且将其与一种非生长培养基相结合118。将该非生 长培养基,例如限于碳水化合物的培养基,加入其中生长发生的容器。这允许来自干细胞的 细胞因子的分泌物进入该"非生长"培养基以便产生这种活性物质。
[0065] 使用或者本文描述的方法(或其他的获得基质血管部分的离分方法),使这种活性 物质与一种化妆配制品结合120,该化妆配制品具有(i)在6. 0与8. 0之间的ph,和(ii) 不含有蛋白酶并且(iii)是无 菌的。
[0066] 本实施例进一步理解为在限定的离分产物和生长培养基的组合中包括弹性蛋白 原以便形成这种活性物质。当将该生长培养基与该基质血管部分结合时添加弹性蛋白原将 给这种活性物质增加附加特性。
[0067] 通过该方法形成一种自体性化妆产品,该产品具有用于多种用途的限定的特性。 通过本实施例的方法获得的自体性化妆产品可以用于多种目的(包括再生的、抗衰老的和 美丽增强产品),但还用于与身体以多种能力一起工作以便取得指定的结果。此类能力可以 包括一种用于刺激皮肤(真皮)细胞的方法,其方式为通过使活个体的真皮与本实施例的一 种自体性化妆产品接触。
[0068] 在另一个实施例中,本发明是针对一种通过超声空化制备用于基于干细胞的化妆 品的组分的方法。在一种限定的用于制备化妆品的方法中使用超声空化集中在这种用于制 备实现特定目标的组分的方法的特性和优点上;具有特性的组分,这些特性将允许制备该 化妆品。因此,在本实施例中,超声空化用于获得组分(通过离分活动),这与本文中提出的 用于制备自体化妆品组合物的方法或为了相同目的的相关方法的其他"步骤"相"吻合"。 [0069] 超声破碎是破坏细胞结构的一种有效手段。这种作用可以用于细胞内材料,例如 来自细胞基质的淀粉的提取。超声破碎在所暴露的液体中产生交替的高压和低压波。在低 压周期过程中,超声波在该液体中产生小的真空泡,这些真空泡在高压周期过程中剧烈坍 塌;称为"空化"。空泡的内爆产生强的流体动力学的切力。切力可以将纤维状的、纤维素材 料分解成细颗粒(破坏细胞结构的壁)。这将更多的细胞内材料,例如淀粉或糖释放到该液 体中。此外,细胞壁材料被破坏成小的碎片。这种作用可以用于有机物质的发酵、消化和其 他的转化过程。在研磨和磨碎后,超声破碎使得更多的细胞内材料例如淀粉以及细胞壁碎 片可用于将淀粉转换为糖的酶。对本实施例来说,更重要地是,超声空化增加了在液化或糖 化过程中暴露于酶的表面积。
[0070] 在本实施例中,由超声空化产生的细胞产量要求高浓度的血清用于生长在获得一 种化妆产品中所使用细胞。认识不到这种要求,则细胞生长的产量既没有形成用于在一种 化妆产品中使用的基础而且它也不允许一种成功的商业方法。
[0071] 本实施例的方法包括以下步骤:通过超声空化以一种限定的方式形成一种脂肪组 织样品的基质血管部分以便取得成功的限定的离分的产品,该产品在限定的方法范围内可 以用于制备化妆产品。一旦完成了使用超声空化的限定的方式,将得到的基质血管部分与 一种生长培养基结合以便使干细胞生长至融合。 分离这些干细胞并且此后使这些干细胞与一种非生长培养基结合,从而允许来自该干 细胞的细胞因子和其他生长材料分泌,以便产生一种活性物质,其中将这种活性物质与一 种化妆配制品结合以便形成一种化妆产品。
[0072] 如在早先的实施例中,将这种活性物质与一种化妆配制品结合,该化妆配制品具 有(i)在6.0与8.0之间的ph,和(ii)不含有蛋白酶并且(iii)是无菌的并且进一步地, 该生长培养基或者是一种可商购的培养基或者是一种物种特定培养基。额外地,如在早先 的实施例中,弹性蛋白原可以与生长培养基和基质血管部分结合以便获得这种活性物质。 通过该方法形成的自体性化妆产品将具有与通过超声空化获得的组分相当的特性。
[0073] 在还另一个实施例中,本发明是针对一种用于制备一种基于种族干细胞的化妆产 品的方法,该方法包括以下步骤:从一个限定的种族的供体获得一个生物样品并且对该生 物样品进行加工以便获得一种活性物质。供体最常见地是人,具有就关于体貌而言(包括面 部特征、肌肉形态和皮肤品质)的优异特质。该干细胞供体将举例说明化妆产品消费者所希 望的种族特征。使这种活性物质与一种化妆配制品结合。
[0074] 在本实施例中的化妆配制品含有一种活性成分用于一个限定的种族群的所希望 的特性。这种配制品将与这种活性成分是互补的以便允许潜在的协同关系但还将含有多种 组分,这些组分将具有所希望的特定种族群供体的结果,例如皮肤亮肤霜。
[0075] 对生物样品进行加工包括离分该生物样品以便获得一种限定的离分的产品。如在 早先的实施例中,该限定的离分的产品最常见地是SVF,该SVF是如本文中所讨论的一样获 得的并且与一种生长培养基结合以便获得生长至融合的干细胞。分离这些生长至融合的干 细胞并且此后,使其与一种非生长培养基结合以便获得一种活性物质,将这种活性物质分 离出。使这种活性物质与一种化妆配制品结合(如本文所描述的)以便形成一种基于种族干 细胞的化妆品。
[0076] 参见图3,在又另一个实施方案中,本发明是针对一种用于连续提供一种基于种族 干细胞的化妆产品的商业方法200。本实施例的商业方法开始于选择一个限定的种族的供 体210并且从该限定的种族的供体获得一个生物样品212。如在早先的实施例中所讨论的, 选择的供体将显示与种族群相关的所希望的特征。
[0077] 协调该生物样品的加工,其中解离该生物样品以便获得一种限定的离分的产品并 且此后,对该限定的离分的产品进行加工而形成一种活性物质214。可以以限定的方式实现 协调和加工,这将促成如本文中所讨论的最终消费者化妆产品。
[0078] 将这种活性物质与一种化妆配制品结合,该化妆配制品含有用于一个限定的种族 群体的所希望的特性的一种活性成分,以便形成一种基于种族干细胞的化妆产品216。将选 择该活性成分和配制品以便满足所希望的基于种族干细胞的化妆产品的特性但还以一种 成本效益的方式用于商业成功。将该基于种族干细胞的化妆产品以行业中认可的不同的方 法商业上分配给多个消费者218。
[0079] 实例4基于自体脂肪组织干细胞的化妆产品的商业方法和制备方法
[0080] 在本实例中,该方法开始于指定一种基于自体干细胞的生物材料,该材料是来自 成年男性的脂肪组织。根据指定的该基于干细胞的生物材料,针对限定的用于收集、运输、 加工和分配该基于干细胞的生
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