专利名称：大花金挖耳杀菌剂及其制备方法
一、所属领域
本发明属于农林业领域，具体涉及农药制备及加工领域，特别涉及一种利用植物大花金挖耳为原料制备的杀菌剂及其方法。背景技术：
大花金挖耳(Carpesium macrocephalum Franch.et Sav)属菊科天明精属。茎高60-140厘米；叶片较大，向上渐小，宽卵形，椭圆形至长圆形；头状花絮；果实圆状卵形，具头状腺毛。分布于我国东北、华北及河南、陕西南部、甘肃、四川等地。其全草可治疗吐血，花及果实可提取芳香油。
菊科是被子植物中最大的一个科，约1000属，2500~3000种。菊科植物中的化合物结构多样、种类繁多。菊科植物中的部分种，如除虫菊的杀虫活性很早就被人们所认知和利用，对除虫菊中化合物除虫菊素的研究最为深入和系统，以该活性成分分子结构为模板，开发出的拟除虫菊酯类农药，是当今应用最为广泛地农药品种。拟除虫菊酯类农药的开发成功促进了对菊科植物中活性化合物的研究，从中发现了很多结构新颖、具有一定生物活性的化合物。这些研究为菊科植物的杀菌活性研究奠定了基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用植物大花金挖耳为原料制备的杀菌剂及其方法。
为了实现上述目的，申请人在对各种菊科植物杀菌活性广泛筛选的基础上，发现大花金挖耳的杀菌活性，其提取物对多种植物病原菌表现出较高的抑制活性，在活体条件下能病原菌对农作物的侵染，对农作物有良好的保护作用。
本发明采取的技术方案是将大花金挖耳(Carpesium macrocephalumFranch.et Sav)的根、茎、叶、花粉碎，用提取溶剂提取，提取液经浓缩得提取物，提取物再和溶剂、农药助剂配制成大花金挖耳杀菌乳油或微乳剂。大花金挖耳杀菌剂，其特征在于该杀菌剂乳油的各组份重量百分比为
大花金挖耳提取物 10％～80％
溶剂 20％～50％
农药助剂 10％～20％
大花金挖耳杀菌微乳剂的各组份重量百分比为
大花金挖耳提取物 10％～40％
溶剂 10％～20％
水30％～50％
农药助剂 10％～20％
提取大花金挖耳所用的提取溶剂可以是甲醇、或乙醇、或乙酸己酯、或丙酮等物质中的任意一种，或己醇∶丙酮＝1∶1的混合溶剂。
上述的大花金挖耳杀菌剂的制备方法，其步骤为
A.取干燥的大花金挖耳根、茎、叶及花粉碎，过40目筛；
B.用3倍于大花金挖耳粉碎物重量的提取溶剂，在回流条件下提取，提取温度70℃～80℃，提取时间8h；
C.用真空浓缩的方法，将大花金挖耳提取物浓缩至与大花金挖耳原料粉碎物等重，得大花金挖耳提取物；
D.在反应釜中，按杀菌乳油配比量依次加入各成份，搅拌均匀即可得大花金挖耳杀菌乳油；
E.先将大花金挖耳提取物，农药助剂溶解于溶剂中，在40℃～50℃、高速搅拌情况下，将上述溶剂加入蒸馏水中，恒温搅拌1h，即得大花金挖耳杀菌微乳剂。
经实验证明，本发明的大花金挖耳杀菌微乳剂对大棚番茄灰霉有较好防治效果。具体实施例方式
为了更清楚的理解本发明以及本发明药剂的药效，以下通过发明人给出的依本发明技术方案所完成的具体的实施例对本发明作进一步的详细描述，这些仅是本发明较好的实施例，但不限于这些实施例。实施例1大花金挖耳提取物的制备
将干燥的大花金挖耳根、茎、叶及花粉碎，过40目筛。称取100kg大花金挖耳粉碎物于回流提取釜中，加入300kg乙酸己酯，加热至706℃，提取8h；过滤；将过滤液浓缩至100kg，即得大花金挖耳提取物。实施例2大花金挖耳提取物的制备
将干燥的大花金挖耳根、茎、叶及花粉碎，过40目筛。称取100kg大花金挖耳粉碎物于回流提取釜中，加入甲醇∶丙酮混合溶剂300kg，加热至74℃，提取8h；过滤；将过滤液浓缩至100kg，即得大花金挖耳提取物。实施例3大花金挖耳杀菌乳油制备
称取大花金挖耳提取物50kg，用甲醇40kg溶解，在搅拌下加入壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯10kg，搅拌均匀，即得100kg孜然杀菌乳油。实施例4大花金挖耳杀菌微乳剂制备
称取大花金挖耳提取物20kg，和15kg壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯，溶于15kg乙醇中，将以上溶液在匀质机中加热至43℃，高速搅拌下滴加无离子水50kg；滴加完毕，再搅拌45min，冷却，即得孜然杀菌微乳剂。实验实施例1大花金挖耳乙酸己酯提取物对植物病原菌的抑制活性测定
本实验在离体条件下，测定了大花金挖耳乙酸己酯提取物对植物病原菌的抑制活性，实验方法和实验结果如下1)供试菌种
小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)、玉米大斑病菌(Exserohilumturcicurn)、辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici leaonian)、苹果炭疽病菌(Goloetotrichum gloeosphorivides)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)，均由西北农林科技大学植物病理研究所提供。2)试验方法
将上述大花金挖耳杀菌乳油采用菌丝生长速率法和孢子萌发法对供试病原菌进行离体生物活性测定，按下列公式计算抑制率
3)试验结果
用生长速率法测定了大花金挖耳杀菌乳油对供试病原菌的毒力，从而求出其提取物对供试病原菌的毒力，结果见表1
表1 大花金挖耳花活性物质抑制菌丝生长的毒力(72h)实验实施例2大花金挖耳杀菌乳油田间药效试验2.1供试作物与防治对象
供试作物番茄(Lycopersicon esculentum)，品种为“强选1号”；
防治对象番茄灰霉病(Botrytis cirerea Pers.)。2.2试验地块的选择与试验处理
(1).试验地块的选择此试验设在陕西杨凌区杨村乡南庄大棚蔬菜基地进行，冬茬大棚番茄地，番茄连作5年。土壤肥力中等；
(2).试验处理与小区设计供试药剂为大花金挖耳杀菌乳油150X、250X、350X；对照药剂施佳乐1000X和空白对照(清水)共五种处理。每种处理面积为27m2，处理间隔随机排列；
(3).施药方法按亩兑水量48kg，用“MATABI”背负式手动喷雾器进行叶面喷雾。2001年2月17日第一次施药，2月22日第二次施药。试验期间大棚内气温偏低，最高温度为22℃，最低温度为12℃。棚内湿度高；
(4).调查方法每处理对角线5点取样，每点随机选3株，共15株，每株从上中随机选3个果。第一次施药前调查病情基数(2月17日)，分别在第一次施药后5天(2月22日)及第二次施药后5天(2月27日)进行药效调查，并根据以下分级标准记录果实发病情况；
番茄灰霉病病果分级标准
0级无病斑；
1级病斑直径小于1cm；
3级病斑直径1-2cm；
5级病斑直径2-3cm；
7级病斑直径3-4cm；
9级病斑直径大于5cm。
(5)药效计算根据病指按下列公式计算防治效果。
病情指数＝∑(各级病果数×相对级数值)/(调查果数×最高分级数)×100
防治效果＝(对照病指数-处理病指数)/对照病指数×1002.3结果与分析
大花金挖耳杀菌乳油防治大棚番茄灰霉病果药效结果见下表，大花金挖耳杀菌乳油第一次施药后5天调查，大花金挖耳杀菌乳油350X、250X、150X的防效为62.1％～76.2％，对照药剂施佳乐防效为52.9％，大花金挖耳杀菌乳油的三种处理的防效均达到60％以上，与照药剂施佳乐相比防效较好；第二次施药后5天调查，大花金挖耳杀菌乳油处理350X与150X的防效高于80％，与照药剂施佳乐1000X的防效75.8％相近，而大花金挖耳杀菌乳油处理250X的防效仅有49.5％，这可能由于250X的病情指数低有关。
表2 大花金挖耳杀菌乳油对大棚番茄灰霉的防治效果
注表中的杀菌乳油即为本发明的大花金挖耳杀菌乳油。
通过大棚试验表明，大花金挖耳杀菌乳油按150X、250X和350X施药后，对大棚番茄灰霉病具有较好的防治效果。实验实施例3大花金挖耳杀菌微乳剂田间药效试验3.1供试药剂
大花金挖耳杀菌微乳剂；速克灵50％WP，日本住友化学株式会社产品；
施佳乐40％SP，德国艾格福公司产品。3.2供试作物与防治对象
供试作物番茄(Lycopersicon esculentum)，品种为“强选1号”；
防治对象番茄灰霉病(Botrytis cirerea Pers.)。3.3试验地块的选择与试验处理
试验地块的选择此试验设在陕西杨凌区杨村乡南庄大棚蔬菜基地进行，冬茬大棚番茄地，番茄连作5年。土壤肥力中等；
试验处理与小区设计供试药剂为大花金挖耳杀菌微乳剂100x、200x、400x；对照药剂施佳500ppm、速可500ppm和空白对照(清水)共六个处理。每个处理设3个重复，每小区面积为27m2，小区间随机排列；
施药方法按亩兑水量72kg，用“MATABI”背负式手动喷雾器进行叶面喷雾。试验期间大棚内气温较高，最高温度为29℃，最低温度为18℃。棚内湿度低。
调查方法每小区对角线5点取样，每点随机选2～3株，在2～3株中随机选6个果。施药前调查病情基数(3月18日)，在施药后5天(3月23日)进行药效调查，并根据以下两分级标准分别记录果发病情况。
番茄灰霉病病果分级标准(一)
0级无病斑；
1级残留花瓣或柱头发病；
3级萼片腐烂或柱头发病蔓延到果脐部；
5级果蒂部或果脐部有浸润斑，无霉层；
7级果蒂部或果脐部有霉层，但未扩展及果的其它部位；
9级霉层扩展到其它部位。
番茄灰霉病病果分级标准(二)
0级无病斑；
1级病斑直径小于1cm；
3级病斑直径1-2cm；
5级病斑直径2-3cm；
7级病斑直径3-4cm；
9级病斑直径大于5cm。
药效计算根据病指按下列公式计算防治效果。
病情指数＝∑(各级病果数×相对级数值)/(调查果数×最高分级数)×100
病指增长率＝(处理后病指数-处理病指数)/处理后病指数×100
防治效果＝(处理病指增长率±对照病指增长率)/(100±对照病指增长率)×1003.4结果与分析
由表3可见，供试药剂大花金挖耳杀菌微乳剂对大棚番茄灰霉有较好防治效果。大花金挖耳杀菌微乳剂的200x处理出现病指下降，大花金挖耳杀菌微乳剂的100x处理与对照药剂施佳乐、速克灵的防效均在80.0％以上，而大花金挖耳杀菌微乳剂400x的防效较低，其防效仅为54.4％。表4表明在施药后5天，大花金挖耳杀菌微乳剂100x、400x和对照药剂速克灵500ppm的病指与施药前病指相比，病指增加且病指增长率高于空白对照，施佳乐500ppm对番茄灰霉病的防效为同时四种处理对灰霉菌的防效低57.18％，而大花金挖耳杀菌微乳剂200x的病指下降。这表明用两种分级标准统计病指所得结果有一定的一致性，并且说明大花金挖耳杀菌微乳剂及对照药剂的保护作用强于治疗作用。
表3 大花金挖耳杀菌微乳剂对大棚番茄灰霉的防治效果
注表中的杀菌微乳剂即为本发明的大花金挖耳杀菌微乳剂。
表4 NZ-1012对大棚番茄灰霉的防治效果
注1.表3病指统计根据分级标准(一)；表2病指统计根据分级标准(二)；
2.表中“-”表示病指增长率下降或病指增长率大于对照病指增长率未计算的防效；
3.表中的杀菌微乳剂即为本发明的大花金挖耳杀菌微乳剂。3.5小结
通过大棚试验表明，大花金挖耳杀菌乳油对大棚番茄灰霉病在侵染初期有一定的防效，而在灰霉病后期(病原菌侵入果实，果实表现水浸斑症状)则无防效。3.6对第三次大棚试验(定点定株施药)结果与分析
1)对照药剂与NZ-1012对病原菌侵入果实并且果实表现症状(有水浸斑)的病果作用不明显，表现在水浸斑继续扩展，且扩展程度各药剂间差异不明显；
2)各药剂对叶部病菌有一定的作用，表现在叶缘干枯；对花萼及花瓣上孢子堆有作用，表现在花萼及花瓣干枯，孢子数相对减少，所观察病果没有出现水浸斑。各药剂间比较看，施佳乐500ppm效果最好，NZ-1012的400ppm、200ppm、100ppm处理中，100ppm效果最差，400ppm、200ppm之间差异不大，与速克灵相当。不过在试验期间大棚内温度较高，湿度低，不利于病原菌孢子入侵和显症。
权利要求
1.一种大花金挖耳杀菌剂，用大花金挖耳(Carpesium macrocephalumFranch.et Sav)的根、茎、叶、花为原料，其特征在于，用提取溶剂提取，提取液经浓缩得提取物，提取物再和溶剂、农药助剂配制成大花金挖耳杀菌乳油或微乳剂。
2.如权利要求1所述的大花金挖耳杀菌剂，其特征在于，该杀菌剂乳油的各组份重量百分比为
大花金挖耳提取物 10～80％
溶剂20～50％
农药助剂10～20％
3.如权利要求1所述的大花金挖耳杀菌剂，其特征在于，该杀菌微乳剂的各组份重量百分比为
大花金挖耳提取物 10～40％
溶剂10～20％
水 30～50％
农药助剂10～20％
4.如权利要求1所述的大花金挖耳杀菌剂，其特征在于，所述的提取溶剂可以是甲醇、或乙醇、或乙酸己酯、或丙酮中的任意一种，或己醇∶丙酮＝1∶1的混合溶剂。
5.一种实现权利要求1所述的大花金挖耳杀菌剂的制备方法，其特征在于，按以下步骤进行
A.将干燥的大花金挖耳根、茎、叶及花粉碎，过40目筛；
B.用3倍于大花金挖耳粉碎物重量的提取溶剂，在回流条件下提取，提取温度70～80℃，提取时间8h；
C.用真空浓缩的方法，将大花金挖耳提取物浓缩至与大花金挖耳原料粉碎物等重，得大花金挖耳提取物；
D.在反应釜中，按杀菌乳油配比量依次加入各成份，搅拌均匀即可得大花金挖耳杀菌乳油；
E.先将大花金挖耳提取物，农药助剂溶解于溶剂中，在40℃～50℃，高速搅拌情况下将所得溶剂加入蒸馏水中，恒温搅拌1h，即得大花金挖耳杀菌微乳剂。
全文摘要
本发明公开了一种利用植物大花金挖耳为原料制备的杀菌剂及其方法，用大花金挖耳(Carpesium macroce-phalum Franch.et Sav)的根、茎、叶、花为原料，用提取溶剂提取，提取液经浓缩得提取物，提取物再和溶剂、农药助剂配制成大花金挖耳杀菌乳油或微乳剂，本发明的大花金挖耳杀菌微乳剂对大棚番茄灰霉有较好防治效果。
文档编号A01P3/00GK1395841SQ02139350
公开日2003年2月12日 申请日期2002年8月13日 优先权日2002年8月13日
发明者冯俊涛, 李玉平, 马志卿, 李广泽, 祝木金, 张兴 申请人:西北农林科技大学无公害农药研究服务中心