专利名称：一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法
技术领域：
本发明涉及植物组培快繁技术领域，尤其涉及一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法。
背景技术：
瓶子草(Sarracenia)又名眼镜蛇花，属于瓶子草科瓶子草属植物，本属植物原产西欧、 北美和墨西哥等地。瓶子草为多年生草本植物，根状茎，匍匐，须根。叶常绿，粗糙，圆筒 状，叶瓶状并带有顶盖，基生成莲座状叶丛，每一张瓶状叶就是一个捕虫器，瓶内分泌粘液 和消化液，将粘住误入瓶内的昆虫并消化、吸收。瓶子草花葶直立，花单生，下垂，紫或绿 紫色，4 5月开放，花茎从叶基部抽出，花较大，且很有特点，花芯长有一个巨大的盔状柱 头，花黄绿色或深红色，具有很高的观赏价值。可作垂吊花卉栽植观赏，更适宜在学校作生 物科普材料栽培。瓶子草一般是分株繁殖，但繁殖速度很慢。在一定程度上制约了瓶子草的 工厂化生产。
发明内容
本发明要解决上述现有技术的缺陷，提供一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法。
本发明目的通过以下技术方案来实现这种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，按如下步 骤进行
1) 、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为-
(1) 基本培养基选用1/6MS 1/3MS培养基，附加蔗糖或白糖20 30g/L，琼脂7 9 g/L， pH5.6 5.8;
(2) 种子萌发培养基为1/6MS 1/3MS;
(3) 增殖培养基为l/6MS l/3MS + BA0.1 2.0mg/L+NAA0.01 0.2mg/L;
(4) 壮苗培养基为l/6MS l/3MS + BA0.1 0.5mg/L+NAA0.01 0.1mg/L;
(5) 生根培养基l/6MS l/3MS+NAA0.01 1.0mg/L;
2) 、种子采集采用瓶子草为亲本，开花时选取生长健壮的母株进行瓶子草的自交授粉
及杂交，授粉后120 150天蒴果成熟时作为外植体用于播种；
3) 、无菌播种从蒴果中取出种子，种子在20%硫酸溶液浸种5 10h，再用体积比为75% 酒精表面消毒30 45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20 30min，无 菌水冲洗3 5遍；将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条 件下培养30 45天后，从种子萌发成实生苗；培养温度为25土2t:，暗培养30~45天，种 子萌发后转为光照培养，光照光强为1000 2000Lx，光照时间为12h/d;4) 、丛生芽增殖培养将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30 45天增殖 出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30 45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；
5) 、壮苗培养将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培 养20 30天后，幼苗苗高生长达3 5厘米；
6) 、生根培养将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20 30天后，幼苗苗高生长达约5 7cm、苗基部长出5 10根细根；
7) 、移栽将生根组培苗移栽于泥碳基质中，培育1 2个月至成苗。 所述的丛生芽增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25i2t:，
光照光强为2500 3000 Lx，光照时间为12h/d。
本发明的有益效果是本发时所提供的瓶子草无菌播种和组培快繁方法，快速建立无菌 组培快繁体系，繁殖速度快，组培苗健壮均匀，移栽成活率高，在短期内形成大量的优良组 培苗，进行规模化、生产化生产。
具体实施例方式
通过以下实施例对本发明作进一步的详细说明，但本发明的内容并不局限于此。 实施例l
这种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，按如下步骤进行-
1) 、种子采集采用瓶子草为亲本，开花时选取生长健壮的母株进行瓶子草的自交授粉 及杂交，授粉后120 150天蒴果成熟时作为外植体用于播种；
2) 、无菌播种从蒴果中取出种子，种子在体积比为20。/。硫酸溶液浸种5 10h，再用体 积比为75%酒精表面消毒30 45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20 30min，无菌水冲洗3 5遍；将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上， 在培养条件下培养30 45天后，从种子萌发成实生苗；培养温度为25士2。C，暗培养30 45 天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000 2000 Lx，光照时间为12h/d;种子萌发培 养基为1/6MS 1/3MS;
3) 、丛生芽增殖培养将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30 45天增殖 出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30 45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；增殖培 养基为1/6MS 1/3MS + BA0.1 2.0mg/L+NAA0.01 0.2mg/L;
4) 、壮苗培养将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培
养20 30天后，幼苗苗高生长达3 5厘米；壮苗培养基为1/6MS 1/3MS + BA 0.1 0.5 mg/L+NAA 0.01 0. lmg/L;5) 、生根培养将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20 30天后，幼苗苗高生长达约5 7cm、苗基部长出5 10根细根；生根培养基1/6MS 1/3MS +NAA0.01 1.0mg/L;
6) 、移栽将生根组培苗移栽于泥碳基质中，培育1 2个月至成苗。
所述的丛生芽增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25士2。C， 光照光强为2500 3000Lx，光照时间为12h/d。 实施例2:
本例中，种子萌发培养基为1/6MS;丛生芽增殖培养基1/3MS+ BA 1.0mg/L+ NAA O.lmg/L;壮苗培养基l/4MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L;生根培养基1/5MS+NAA0.5 mg/L0
其余步骤，条件均同于实施例l。
除上述实施例外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技 术方案，均落在本发明要求的保护范围。
权利要求
1、一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，其特征在于该方法按以下步骤进行1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为(1)基本培养基选用1/6MS～1/3MS培养基，附加蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；(2)种子萌发培养基为1/6MS～1/3MS；(3)增殖培养基为1/6MS～1/3MS+BA0.1～2.0mg/L+NAA0.01～0.2mg/L；(4)壮苗培养基为1/6MS～1/3MS+BA0.1～0.5mg/L+NAA0.01～0.1mg/L；(5)生根培养基1/6MS～1/3MS+NAA0.01～1.0mg/L；2)、种子采集采用瓶子草为亲本，开花时选取生长健壮的母株进行瓶子草的自交授粉及杂交，授粉后120～150天蒴果成熟时作为外植体用于播种；3)、无菌播种从蒴果中取出种子，种子在20％硫酸溶液浸种5～10h，再用体积比为75％酒精表面消毒30～45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20～30min，无菌水冲洗3～5遍；将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条件下培养30～45天后，从种子萌发成实生苗；培养温度为25±2℃，暗培养30～45天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000～2000Lx，光照时间为12h/d；4)、丛生芽增殖培养将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；5)、壮苗培养将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达3～5厘米；6)、生根培养将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达约5～7cm、苗基部长出5～10根细根；7)、移栽将生根组培苗移栽于泥碳基质中，培育1～2个月至成苗。
2、 根据权利要求1所述的瓶子草无菌播种和组培快繁方法，其特征在于，所述的丛生芽 增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25士2'C，光照光强为2500 3000 Lx，光照时间为12h/d。
全文摘要
本发明属植物繁殖技术领域，主要是一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，包括如下步骤种子采集、无菌播种、丛生芽增殖培养、壮苗培养、生根培养、移栽。基本培养基为选用1/6MS～1/3MS培养基，附加蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.4～5.6。本发明的优点是快速建立无菌组培快繁体系，繁殖速度快，组培苗健壮均匀，移栽成活率高，在短期内形成大量的优良组培苗，进行规模化、生产化生产。
文档编号A01H4/00GK101518207SQ20091009721
公开日2009年9月2日 申请日期2009年3月26日 优先权日2009年3月26日
发明者吕永平, 刚 徐, 汪一婷, 牟豪杰, 陈剑平 申请人:浙江省农业科学院