用于促进植物生长和提高产量的脂壳寡糖联用组合物的制作方法
【专利摘要】本发明描述了用于促进豆科和非豆科植物中的植物生长和提高作物产量的组合物和方法。该组合物包括脂壳寡糖与壳多糖/脱乙酰壳多糖相组合，或与类黄酮化合物相组合，或与除草剂相组合。该方法包括将所述组合物同时或顺序施用至种子和/或植株。
【专利说明】用于促进植物生长和提高产量的脂壳寡糖联用组合物
[0001]本分案申请是基于申请号为200880001967.4，申请日为2009年7月9日，发明名称为“用于促进植物生长和提高产量的脂壳寡糖联用组合物”的原始中国专利申请的分案申请。
【背景技术】
[0002]在农业生产中，通过将可获得的大气氮变成植物可利用的形式，固氮起着至关重要的作用。在豆科植物中，植物与根瘤菌科(根瘤菌)的固氮细菌之间的共生互作促进植物生长和提高作物产量。当植物释放类黄酮化合物时引发该共生互作，所述类黄酮化合物刺激土壤中的根瘤菌产生“结瘤因子”。结瘤因子是诱发植物根部中的早期结瘤作用的信号化合物，其导致包含固氮根瘤菌的根瘤的形成。尽管该过程通常在豆科植物中随着时间天然发生，但是农业生产已经发展至更早地启动该过程。该过程包括向种子或土壤提供固氮细菌，并且将结瘤因子于种植之前或种植时直接施用至种子或土壤。
[0003]通过不同于结瘤的方式，结瘤因子近年来已经显示出还促进豆科和非豆科植物的发芽、生长和提高产量(US6, 979，664; Prithivaraj 等，Planta216:437-445，2003)。尽管结瘤因子对结瘤作用的作用已经被广泛研究并总结，例如Ferguson and Mathesius7J.PlantGrowth Regulation22:47-72, 2003，然而不依赖于结瘤作用的结瘤因子的作用机理还未充分公开。结瘤因子施用于豆科和非豆科植物的种子刺激作物和园艺植物品种的发芽、出苗、植物生长和产量，如US6，979，664和US5，922，316所描述。结瘤因子还显示出促进根部的发育(Olah, et al., The Plant Journal44:195-207, 2005)。还证实叶部施用结瘤因子促进作物和园艺植物品种的光合作用(US7，250, 068)，以及结果和开花(W004/093，542)。
[0004]结瘤因子是脂壳寡糖化合物(LCO’ s)。该化合物由在非还原端具有N-连接的脂肪酰基链的β-1，4-连接的N-乙酰基-D-葡萄糖胺(“GlcNAc”)残基的寡聚骨架组成。LCO’ s在骨架中的GIcNAc残基数、脂肪酰链的长度和饱和度以及还原和非还原糖残基的取代方面有所不同。LCO结构是各根瘤菌种类所特有的，并且各菌株可以产生具有不同结构的多种LC0’ S。在豆科植物的共生关系中，LCO’ s是宿主专一性的主要决定子(primarydeterminants) (Diaz, Spaink,和 Ki jne, Mol.Plant-Microbe Interactionsl3:268-276,2000)。
[0005]在细菌生长期间，对于所给定的根瘤菌的属和种而言，通过加入适宜的类黄酮可以刺激LCO合成。类黄酮分子与根瘤菌相结合，并且启动细菌基因以生产特定的LCO’S，所述的LCO’ s释放到发酵培养基中。在自然界中，豆科植物释放适当的类黄酮，其与土壤根瘤菌相结合，启动用于LCO生产的基因。这些LCO’ s通过细菌释放入土壤中，与豆科植物的根部相结合，并且引发植物基因表达的级联(其刺激豆科植物根部上的固氮瘤结构的形成)。可选地，经修饰的和合成的LCO分子可以通过基因工程或化学合成来生产。相同分子结构的合成LCO’ s与植物相互作用，并且以与天然生产的分子相同的方式刺激结瘤作用。
[0006]壳多糖和脱乙酰壳多糖也由GlcNAc残基组成，是真菌细胞壁和昆虫和甲壳动物类的外骨骼的主要成分。这些组分已经被施用于广谱的作物和园艺植物的种子、根和叶。壳多糖和脱乙酰壳多糖组分提高对抗植物病原体的保护作用，部分地，通过刺激植物产生壳多糖酶、降解壳多糖的酶(Collinge,等人，The Plant Journal3:31-40,1993)。
[0007]类黄酮是具有通过三个碳桥连接的两个芳环的通式结构的酚类化合物。类黄酮是由植物产生的，并且具有多种功能，例如有益信号分子，以及对抗昆虫、动物、真菌和细菌的保护作用。类黄酮的种类包括查耳酮、花色素、香豆素、黄酮、黄烷醇、黄酮醇、黄烷酮和异黄酮(Jain 和 Nainawatee，J.Plant Biochem.&Biotechnol.11:1-10, 2002; Shaw 等人,Environmental Microbiol.11:1867-1880,2006)。
【发明内容】
[0008]本发明包括用于促进植物生长和提高作物产量的方法和组合物。示例性组合物包含至少一种脂壳寡糖和至少一种壳多糖类化合物。另一种示例性组合物包含至少一种脂壳寡糖和至少一种选自下组的类黄酮化合物:黄酮、黄烷醇、黄酮醇、黄烷酮和异黄酮。进一步的示例性组合物包含至少一种脂壳寡糖和至少一种除草剂。示例性方法包括将本发明的组合物以促进植物生长或提高作物产量的有效量施于植株或种子。在另一个实施方式中，该方法包括用至少一种脂壳寡糖和至少一种壳多糖类化合物或至少一种选自下组的类黄酮化合物:黄酮、黄烷醇、黄酮醇、黄烷酮和异黄酮顺序处理植株或种子。
[0009]本发明提供用于促进植物生长和提高作物产量的组合物和方法，并来源于本文记载的实验结果，其显示当施用于种子和/或叶片时，脂壳寡糖与壳多糖/脱乙酰壳多糖、类黄酮化合物或除草化合物相组合对植物生长和作物产量的改善作用。
[0010]对于本发明的目的而言，“脂壳寡糖”(“LC0”)是具有常规LCO结构的化合物，即在非还原端具有N-连接的脂肪酰基链的β -1, 4-连接的N-乙酰基-D-葡萄糖胺残基的寡聚骨架，如在U.S.专利号5，549，718、U.S.专利号5，646，018、U.S.专利号5，175，149和U.S.专利号5，321，01 1中所描述。该基本结构可以包含在天然产生的LCO’ s中所发现的修饰或取代结构，例如在 Spaink, Critical Reviews in Plant Sciences54:257-288，2000^ Haeze 和 Holsters，Glycobiologyl2:79R_105R，2002 中所述的结构。本发明还包括合成的LCO化合物，例如描述于W02005/063784的化合物，以及通过基因工程生产的LCO’s。用于构建LCOs的前体寡糖分子也可以通过基因工程生物体来合成,例如在Samain等人，Carbohydrate Research302:35-42,1997 中所描述。
[0011]用于本发明实施方式中的LCO’s可以由产生LCO’s的根瘤菌科菌株来再生，例如固氮根瘤菌属(Azorhizobium)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)(包括慢生大豆根瘤菌)、中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)、根瘤菌(Rhizobium)(包括大豆根瘤菌)、中华根瘤菌属(Sinorhizobium)(包括苜蓿中华根瘤菌)的菌株，以及产生LCO’ s的基因工程的细菌菌株。这些方法在本领域中是已知的并且描述于例如U.S.专利号5，549，718和5，646，018中，这两篇文献通过引用并入本文。现有包含LCO’s的商品，例如OPTIMIZE? (EMD CropBioScience)。
[0012]LCO’ s可以以多种纯度形式利用，并且可以单独使用或与根瘤菌一起使用。仅提供LCO’s的方法包括从LCOs和根瘤菌的混合物中简单地除去根瘤菌细胞，或采用LCO溶剂相分离然后进行HPLC色谱来连续分离或纯化LCO分子，如Lerouge等人(US5，549，718)所描述。通过重复HPLC可以提高纯度，并且经纯化的LCO分子可以经冷冻干燥长时间储存。该方法可接受用于由所有的根瘤菌科的属和种制备LCO’ S。
[0013]在豆科植物中，特定根瘤菌的属和种显现出与特定豆科植物宿主的共生固氮关系。这些植物宿主:根瘤菌的组合描述于Hungria and Stacey, Soil Biol.Biochem.29:819-830，1997中，其也列出了根瘤菌菌种的有效的类黄酮结瘤基因诱导剂，以及由不同根瘤菌菌种产生的特定LCO结构。然而，LCO特异性只用于在豆科植物中建立结瘤作用。当用LCO’s处理豆科或非豆科植物的种子或叶片时，不必将LCO’s和植物种类相匹配以刺激植物生长和/或作物产量。
[0014]壳多糖类化合物包括:壳多糖(IUPAC:N-[5-[[3-乙酰基氨基_4，5_ 二羟基-6-(羟基甲基)嚙烷-2-基]甲氧基甲基]-2-[ [5-乙酰基氨基-4，6- 二羟基-2-(羟基甲基)嚙烷-3-基]甲氧基甲基]-4-羟基-6-(羟基甲基)嚙烷-3-基]乙酰胺)，以及脱乙酰壳多糖(IUPAC:5_氨基-6-[5-氨基-6-[5-氨基-4，6- 二羟基_2_(羟基甲基)碟烧-3-基]氧基-4:-羟基-2-(羟基甲基)魂烧-3-基]氧基-1 (羟基甲基)魂烷-3，4- 二醇)。这些化合物例如由Sigma-Aldrich商购可得，或由昆虫、甲壳动物贝壳或真菌细胞壁制得。用于制备壳多糖和脱乙酰壳多糖的方法是本领域已知的，并且描述于U.S.Pat.N0.4, 536, 207 (由甲壳动物贝壳制得)，Pochanavanich and Suntornsuk, Lett.App1.Microbiol.35:17-21，2002 (由真菌细胞壁制得)和 U.S.Pat.N0.5，965，545 (由蟹壳和市售脱乙酰壳多糖的水解制得)。可以获得范围为低于35%至高于90%脱乙酰化的脱乙酰壳多糖和脱去乙酰基的壳多糖，其覆盖宽范围的分子量，例如低于15kD的低分子量的脱乙酰壳多糖低聚物以及0.5至2kD的壳多糖低聚物；具有分子量约150kD的“实验等级(practicalgrade)”的脱乙酰壳多糖；以及直至700kD的高分子量的脱乙酰壳多糖。配制用于植物和土壤处理的壳多糖和脱乙酰壳多糖组合物也是商购可得的。市售产品包括，例如ELEXA?-4PDB (Plant Defense Boosters, Inc.)和 BEYOND?(Agrihouse, Inc.)。
[0015]LCO’ s和壳多糖/脱乙酰壳多糖是结构相关的。壳多糖和脱乙酰壳多糖可以刺激植物壳多糖酶的产生,并且已经表明如同壳多糖化合物一样,植物壳多糖酶可以使LCO，s和壳多糖化合物失活并且降解(Staehelin等人，P.N.A.S.USA91:2196-2200，1994 ；Ferguson and Mathesius, J.Plant Growth Regulation22:47-72, 2003))。此外，商购可得的脱乙酰壳多糖配制剂通常含有对根瘤菌具有毒性并且从而防止LCOs产生的重金属。出于这些原因，以前将根瘤菌与壳多糖/脱乙酰壳多糖组合的使用表明是不合适的。然而，如以下实施例所示，现已证实LCO化合物和壳多糖/脱乙酰壳多糖顺序或同时至植株或种子的施用诱导了植物生长和产量方面的有利应答。虽然对于该作用的机理还未证实，但一种假说是LCO化合物与植株或种子上的特定受体相结合，并且通过产生壳多糖酶在LCO降解前引发这些有利应答。此外，该新处理方法消除了重金属对由根瘤菌产生的LCO的影响。
[0016]在本发明的一个实施方式中，该组合物可以通过在农业上适宜的溶剂中将脱乙酰壳多糖与一种或多种LCO相混合来制得。在第二个实施方式中，该组合物也可以包含壳多糖。脱乙酰壳多糖的浓度范围可以为0.1至15%w/v，优选3至12%。所包括的壳多糖可以为O至4%w/v。LCO的浓度范围为10_5M至10_14M，优选为10_6M至ΙΟ,Μ。LCO组分可以由纯化的或部分纯化的LC0、 或由LCO和产生LCO的根瘤菌的混合物组成。农业上适宜的溶剂优选水性溶剂，例如水。
[0017]适宜的类黄酮化合物包括选自下组的化合物:黄酮、黄烷醇、黄酮醇、黄烷酮和异黄酮。这类化合物可以包括，但不限于染料木黄酮、大豆黄素、芒柄花素、柚皮素、橙皮素、木犀草素和芳:菜素。类黄酮化合物是商购可得的，例如来自Natland International Corp.,Research Triangle Park, NC;MP Biomedicals, Irvine,CA;LC Laboratories, Woburn MA0类黄酮化合物可以从植株或种子中分离，例如如US5，702, 752、US5, 990, 291、US6, 146，668所描述的。类黄酮化合物也可以通过基因工程生物体如酵母制得，如在Ralston等人，PlantPhysiologyl37:1375-1388，2005 中所描述的。
[0018]在本发明的一个实施方式中，该组合物可以通过在农业上适宜的溶剂中将一种或多种类黄酮与一种或多种LCO相混合制得。组合物的“有效量”是当与未用该组合物处理的植株或种子的生长或作物产量相比，促进植物生长或提高作物产量的量。例如，组合物中的类黄酮的浓度范围为20-800 μ m，优选100-500 μ m。组合物中的LCO的浓度范围为10_5M至10_14M，优选10_6M至ΙΟ,Μ。LCO组分可以由纯化的或部分纯化的LC0、或由LCO和产生LCO的根瘤菌的混合物组成。农业上适宜的溶剂优选水性溶剂，例如水。
[0019]尽管以单一混合物的形式将类黄酮或壳多糖/脱乙酰壳多糖与LCO组分相组合和施用是有效的和便利的，然而在本发明的一个实施方式中，类黄酮或壳多糖/脱乙酰壳多糖组分与LCO组分可以单独和以任何顺序先后施用。可以同时或顺序施用的其它添加剂包括肥料(如钙、氮、钾、磷)，微量营养物(如铜、铝、镁、锰和锌离子)，以及农药(如杀真菌剂、杀昆虫剂、除草剂和杀线虫剂)
[0020]在本发明的一个实施方式中，包含至少一种LCO和至少一种除草剂的组合物施用于植物叶片以促进植物生长或提高作物产量。适宜的除草剂包括，但不限于灭草松、三氟羧草醚、氯嘧磺隆、乳氟禾草灵、异噁草酮、吡氟禾草灵、草铵膦、草甘膦、烯禾定、咪唑乙烟酸、甲氧咪草烟、氟磺胺草醚、氟烯草酸、咪唑喹啉酸和烯草酮。包含这些化合物的商品是容易获得的。对于特定的除草剂而言，组合物中的除草剂浓度通常相应于所标注的用量。组合物中的LCO浓度范围为10_5Μ至10_14Μ，优选10_6Μ至ΙΟ,Μ。在待施用的组合物中所使用的农业上适宜的溶剂优选为水性溶剂，例如水。该组合物通常在任何适宜于杂草防治的时间施用于植物，优选苗后施用。
[0021]在一个实施方式中，该组合物包含至少一种具有基于草甘膦除草剂的LC0，并且处理包括将该组合物施用于植物，所述植物是为获得针对草甘膦的抗性而经基因修饰的。
[0022]本文所使用的术语“植物”包括块茎、根、茎、叶、花和果实。组合物可以直接施用于种子或植株，或可以在种植前或种植时，施于种子或植物附近的土壤中。在优选的实施方式中，将该组合物喷雾于种子、块茎或叶片上。可以处理幼苗以及更成熟的植株。还可以通过喷雾处理花和果实。可以将移植植物的根在种植前进行喷雾或浸在组合物中。
[0023]组合物的“有效量”是当与未用该组合物处理的植株或种子的生长或作物产量相t匕，促进植物生长或提高作物产量的量。
[0024]该组合物可以施用至单子叶或双子叶植物，以及豆科植物和非豆科植物。在一个实施方式中，将该组合物施用至大田生长植物。在另一个实施方式中，将组合物施用至温室生长植物。例如，该组合物可以施用至豆科植物如大豆、豌豆、鹰嘴豆、菜豆、花生、三叶草、苜蓿，以及非豆科植物如玉米、棉花、稻、西红柿、油菜、小麦、大麦、甜菜和禾本科植物的种子或叶片。通常，对于种子处理而言，将该组合物以单次施用的方式施用至种子，并且所述种子可以立即种植或在种植前储存。该组合物可以施用至叶片。叶片施用通常包括在生长期期间，将组合物一次或多次喷雾至植物叶片上。此外，若先后施用类黄酮化合物和LCO，则类黄酮化合物可以施用至种子，并且LCO施用至叶片。
实施例
[0025]1、用1X0+壳多糖/月兑乙酉先壳多糖处理.大.豆(Northrup King S24_k4) 叶片
[0026]进行大豆大田试验以评价当单独或组合施用至叶片时，LCO和两种市售脱乙酰壳多糖产品对谷物产量的作用。在该试验中所使用的两种市售脱乙酰壳多糖产品为BEYOND? (Agr1-House Inc., 307ffelch Ave, Berthoud, CO)和 ELEXA !V—4PDB (Plant
Defense Boosters, 235Harrison St, Syracuse, NY)。BEYOND? 中的壳多糖 / 脱乙酸壳多糖的精确浓度未知，但估算范围为6-12%w/v的脱乙酰壳多糖和0-3%w/v壳多糖，基于U.S.申
请号6，193，988。ELEXA?-4PDB中的脱乙酰壳多糖的浓度为4%w/v。ELEXA?_4PDB
不包含壳多糖。在ELEXA?-4PDB中脱乙酰壳多糖的浓度为4%w/v。lco产品是通过蚕豆根瘤菌(Rhizobium leguminosarum bv viceae)制得的，并且包含大约 1x10—8M 的 LC0。大田试验位于Whitewater，WI附近，特征为Milford粉砂质粘壤土的场地。土壤pH值为6.6，有机物质含量为4.8%，并且磷和钾的含量分别为41ppm和131ppm。[0027]在该研究中所使用的大豆种子为Northrup King变种S24-K4。通过在4叶生长阶段喷雾至叶片进行LCO处理(参见Soybean Growth and Development, 1wa StateUniversity Extension Bulletin PM1945，2004 年 5 月)，其用量为在 25 加仑水中 I 夸脱 /
英亩。将BEYOND?在水中稀释至浓度为0.132%w/v，并且ELEXA_?-4PDB稀释至2.5%w/v。
通过以在25加仑水中I夸脱/英亩的用量将各产品喷雾施用至叶片。当施用LCO-壳多糖/脱乙酰壳多糖组合物时，使用与当单独施用各产品时相同浓度的LCO和壳多糖/脱乙酰壳多糖产品。
[0028]以随机完全区组设计(a randomized complete block design)来进行研究，试验地块尺寸为10英尺X50英尺，30英寸的行距。重复4次。利用John Deere750NT谷物条播机，以I英寸的深度、播种量为175，000粒种子/英亩来种植种子。
[0029]研究结果示于表1。当以单独处理的方式施用至叶片时(p=0.1)，LCO、BEYOND?
和ELEXA'?-4PDB产品分别各自显著地提高了 3.5、6.6和5.0bu/英亩的谷物产量。将ELEXA?-4PDB与lco组合施用相比单独施用lco统计学上提高了 6.2bu/英亩的产量，相比单独施用ELEXA?-4PDB提高4.7bu/英亩的产量。将beyond?与lco组合施用相
比单独施用LCO统计学上提高了 5.3bu/英亩的产量，相比单独施用BEYOND?数值上提高了
2.2bu/英亩的产量。
[0030]相比对照，用lco+ ELEXA?-4PDB的处理提高了 9.7bu/英亩的产量，与单独用lco或ELEXA?-4PDB的处理相比，显示了该组合物的出人意料的增效作用。
[0031]表1[0032]
【权利要求】
1.一种用于促进植物生长和提高作物产量的组合物，其包含 a)至少一种脂壳寡糖 b)和包含一种或多种壳多糖类化合物的第一组分，其选自壳多糖和脱乙酰壳多糖， 或 b')包含一种或多种类黄酮化合物的第二组分，其选自黄酮、黄烧醇、黄酮醇、黄烧酮和异黄酮，以20 μ m至800 μ m的浓度存在， 或 b/ / )包含除草剂的第三组分，其包含至少一种除草的化合物。
2.根据权利要求1的组合物,其中脂壳寡糖由选自下组的细菌种类产生:慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、根瘤菌(Rhizobium)、中华根瘤菌属(Sinorhizobium)和中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium) 或 其中脂壳寡糖是至少部分由基因修饰的细胞或生物体产生的。
3.根据权利要求1的组合物，其中脂壳寡糖是通过化学合成来产生的。
4.根据权利要求1的组合物，其中脂壳寡糖以10_5M至10_14M，优选10_6M至ΙΟ,Μ的浓度存在。
5.根据权利要求1的组合物，其进一步包含产生LCO的细菌。
6.根据权利要求1的组合物，其中所述第一组分包含以0.1至15% w/v，优选3至12%w/v的浓度存在的壳多糖类化合物。
7.根据权利要求1的组合物，其中所述第二组分包含至少一种选自下组的类黄酮化合物:染料木黄酮、大豆黄素、芒柄花素、柚皮素、橙皮素、木犀草素和芹菜素。
8.根据权利要求7的组合物，其中类黄酮化合物以100μ π!至500 μ m的浓度存在。
9.根据权利要求1的组合物，其中所述除草化合物选自下组:灭草松、三氟羧草醚、氯嘧磺隆、乳氟禾草灵、异噁草酮、吡氟禾草灵、草铵膦、草甘膦、烯禾定、咪唑乙烟酸、甲氧咪草烟、氟磺胺草醚、氟烯草酸、咪唑喹啉酸和烯草酮。
10.一种促进植物生长或提高作物产量的方法，该方法包括将权利要求1的组合物以促进植物生长或提高作物产量的有效量施于植物或种子。
11.根据权利要求10的方法，其中所述植物是豆科或非豆科植物。
12.根据权利要求11的方法，其中所述植物选自下组:大豆、豌豆、鹰嘴豆、菜豆、花生、三叶草、苜蓿、玉米、棉花、稻、西红柿、油菜、小麦、大麦、甜菜和禾本科植物。
13.根据权利要求10的方法，其中所述组合物是通过将所述组合物施用至叶片、种子或紧邻植物或种子的土壤来施于的。
14.一种促进植物生长或提高作物产量的方法，该方法包括将包含 a)至少一种脂壳寡糖，其以10_5M至10_14M的浓度存在 和 b)包含至少一种以促进植物生长或提高作物产量的有效量的壳多糖类化合物的第一组分，其选自壳多糖和脱乙酰壳多糖， 或 b/ )包含至少一种类黄酮化合物的第二组分，其选自黄酮、黄烷醇、黄酮醇、黄烷酮和异黄酮，以20 μ m至800 μ m的浓度存在以促进植物生长或提高作物产量， 或 b/ ')包含至少一种除草的化合物的第三组分。
15.根据权利要求14的方法，其中所述第二组分包含至少一种选自下组的类黄酮化合物:染料木黄酮、大豆黄素、芒柄花素、柚皮素、橙皮素、木犀草素和芹菜素。
16.根据权利要求14的方法，其中所述第一组分包含以0.1至15%浓度存在的壳多糖类化合物。
17.一种促进植物生长或提高作物产量的方法，该方法包括将以促进植物生长或提高作物产量的有效量包含至少一种脂壳寡糖的第一组合物，和以促进植物生长或提高作物产量的有效量包含至少一种壳多糖类化合物的第二组合物以任何顺序先后施于植物或种子，其中壳多糖类化合物选自壳多糖和脱乙酰壳多糖。
18.根据权利 要求17的方法，在第一组合物中脂壳寡糖以IO-5M至KT14M的浓度存在。
19.根据权利要求17的方法，在第一组合物中脂壳寡糖以IO-6M至ΙΟ,Μ的浓度存在。
20.根据权利要求17的方法，其中壳多糖类化合物以0.1至15% w/v的浓度存在。
21.根据权利要求17的方法，其中壳多糖类化合物以3至12%w/v的浓度存在。
22.根据权利要求17的方法，还包括施用除草剂于植物。
23.根据权利要求22的方法，其中所述除草剂选自下组:灭草松、三氟羧草醚、氯嘧磺隆、乳氟禾草灵、异噁草酮、吡氟禾草灵、草铵膦、草甘膦、烯禾定、咪唑乙烟酸、甲氧咪草烟、氟磺胺草醚、氟烯草酸、咪唑喹啉酸和烯草酮。
24.根据权利要求22的方法，其中所述植物是为获得针对该除草剂的抗性而经基因修饰的植物。
25.根据权利要求17的方法，其中所述壳多糖类化合物是壳多糖。
26.根据权利要求17的方法，其中所述壳多糖类化合物是脱乙酰壳多糖。
27.根据权利要求17的方法，其中所述植物或种子是豆科的。
28.根据权利要求17的方法，其中所述植物或种子是非豆科的。
29.根据权利要求17的方法，其中所述植物选自下组:大豆、豌豆、鹰嘴豆、菜豆、花生、三叶草、苜蓿、玉米、棉花、稻、西红柿、油菜、小麦、大麦、甜菜和禾本科植物。
30.一种促进植物生长或提高作物产量的方法，该方法包括将以促进植物生长或提高作物产量的有效量包含至少一种脂壳寡糖的第一组合物，和以促进植物生长或提高作物产量的有效量包含至少一种选自黄酮、黄烧醇、黄酮醇、黄烧酮和异黄酮的类黄酮化合物的第二组合物以任何顺序先后施于植物或种子。
31.根据权利要求30的方法，其中类黄酮化合物选自下组:染料木黄酮、大豆黄素、芒柄花素、柚皮素、橙皮素、木犀草素和芹菜素。
32.根据权利要求根据权利要求10或14的方法，其中所述组合物包含至少一种脂壳寡糖和至少一种除草剂，其中所述组合物施用至植物，所述植物是为获得针对该除草剂的抗性而经基因修饰的植物。
【文档编号】A01N57/20GK103461385SQ201310365298
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2008年1月8日 优先权日:2007年1月9日
【发明者】R·S·史密斯, R·M·奥斯本 申请人:默克专利股份有限公司