一种花吊丝竹组培繁育中的继代、生根方法
【专利摘要】一种花吊丝竹组培繁育中的继代、生根方法，包括继代培养、生根培养步骤，其特征在于：在继代培养步骤的多周期继代扩繁时为生根培养步骤选苗，当一个周期继代培养中培养至5-7天、将基部萌发出2-4cm长新芽的植株转入生根培养步骤；生根培养步骤为将植株接入生根培养基：1/4MS大量+IBA0.2-0.4mg·L-1+根太阳25-35ppm先进行暗培养5-7天，再进行光照培养20天；各培养阶段培养温度均控制在25-28℃，暗培养为完全黑暗培养，光照培养为光照10小时/天、光照强度1600-2200lx。优点在于：简化生根程序，节约生产成本；提高花吊丝竹瓶内生根的生根率，由原80％提高至90％。
【专利说明】—种花吊丝竹组培繁育中的继代、生根方法
【技术领域】:
[0001]本发明涉及花吊丝竹组培的方法，具体涉及花吊丝竹组培繁育中继代、生根的方法。
【背景技术】:
[0002]花吊丝竹为丛生竹，牡竹属吊丝竹变种，杆节间浅黄色，竹杆用途与吊丝竹相同。其杆浅黄色而间有5-8条深绿色条纹，甚为美丽，可作庭园观赏竹种。其产笋量高，适应性强，可为笋用竹产业和园林绿化。在常规的繁育方法是母竹分株或者利用竹杆、竹枝扦插，成本高、效率低下、种苗运输不便，且优良种源稀缺，给林竹产业带来了很大的阻碍。利用组织培养，选取优良材料进行扩繁，不仅弥补了常规繁育方法的诸多不足，而且将母本的优良遗传性状保持并扩大其繁育数量。目前国内对于丛生竹种组织培养的研究主要集中在丛生竹的组培快繁技术研究(张光楚，2004)、花吊丝竹组培快繁育种技术研究(张玮，2010)等，解决花吊丝竹组培现有研究技术中普遍存在难生根的问题，为建立花吊丝竹高效稳定的组培快繁体系。
[0003]1、花吊丝竹外植体的消毒:
[0004]花吊丝在7-10月份选取当年新抽梢的主枝茎段作为组培材料，将剪好的枝条修剪干净，先去除叶片，蘸95%酒精的棉球擦拭枝条2遍，无菌水浸泡枝条底部l_3cm，放入冰箱10°C冷藏。次日在超净工作台上用75%酒精消毒Imin后，2%。升汞分3次消毒30min、25min、5min，无菌水冲洗5次。
[0005]2、花吊丝竹的诱导:
[0006]将茎段接种于诱导培养基:3/4MS+6-BA4.0mg.'+Θ-ΚΙ.0mg.1+椰乳(Cff) IOOmL.1+ 白糖 20g.1+ 卡拉胶 5.5g/L.PH5.8。45-60 天丛芽。
[0007]3、花吊丝竹的继代培养:
[0008]形成丛芽后，接种于继代培养基:3/4MS+6-BA2.0mg.L_1+K0.5mg.L_1+VC0.5mg.1+椰乳150mL.L-1+白糖20g.L-1.PH5.8。20-25天周转一次进行多周期继代扩繁。
[0009]4、花吊丝竹的生根培养:
[0010]将预备生根的瓶苗转入生根培养基①:1/3MS+IBA4.0mg.1+ΝΑΑ4.5mg +ΚΟ.15mg.?Λ5-7 天后全部转回继代培养基(3/4MS+6-BA2.0mg K0.5mg VC0.5mg.171+椰乳150mL.L-1+白糖20g.L-1.PH5.8)，待5-7天后将萌发2_4cm的新芽再次转生根培养基②:1/5MS+IBA8.0mg.L_1+NAA4.5mg.L_1+K0.1mg.L' 采用二次生根法，平均生根率可达 80%。
[0011]以上诱导、继代、生根各培养阶段均为培养温度控制25-28°C，光照10小时/天，光照强度约1600-22001x。
[0012]5、花吊丝竹的移栽:`[0013]待生根苗出根至5_7cm时，炼苗15_20天进行移栽，移栽前一天要拧松瓶盖，洗去根部粘黏的培养基。移栽时要丛状移栽，移栽前用2%。高锰酸钾溶液消毒，移栽后用2.5%o多菌灵定根，并且在移栽成活后也要定期喷2.5%。多菌灵，以控制病害发生。移栽基质用:3/4河沙+1/4泥炭土。生根苗移栽7-10天后就可恢复生长，25-35天抽新叶。成活率可达90%以上。60天后可移至圃地。
[0014]现有技术的缺点:1、花吊丝组培采用二次生根的方法程序过于繁杂，运用于生产成本过高；2、花吊丝组培采用二次生根的生根率过低，只达到80%。
【发明内容】
:
[0015]本发明的目的在于克服上述缺点，提供一种花吊丝竹组培繁育中的继代、生根方法。
[0016]本发明的方案是:包括继代培养、生根培养步骤，其特征在于:在继代培养步骤的多周期继代扩繁时为生根培养步骤选苗，当一个周期继代培养中培养至5-7天、将基部萌发出2-4cm长新芽的植株转入生根培养步骤；生根培养步骤为将植株接入生根培养基:1/4MS大量+ΙΒΑ0.2-0.4mg.L—1+根太阳25_35ppm先进行暗培养5_7天，再进行光照培养20天；所述各培养阶段培养温度均控制在25-28°C，暗培养为完全黑暗培养，光照培养为光照10小时/天、光照强度1600-22001x。
[0017]本发明的优点在于:1.简化生根程序，节约生产成本；2.提高花吊丝竹瓶内生根的生根率，由原来的80%提高至90%。
【具体实施方式】:
[0018]本发明的方法是:包括继代培养、生根培养步骤，其特征在于:在继代培养步骤的多周期继代扩繁时为生根培养步骤选苗，当一个周期继代培养中培养至5-7天、将基部萌发出2-4cm长新芽的植株转入生根培养基:1/4MS大量+ΙΒΑ0.2-0.4mg.L—1+根太阳25-35ppm,接入生根培养基后进行暗培养5_7天，再进行光照培养，20天后平均生根率可达90%以上。便可进入移栽步骤。
[0019]实施例1:
[0020]将准备生根的瓶苗预先转入继代培养基中培养至5-7天、选择萌发出2-4cm长新芽的植株转入生根培养基:1/4MS大量+IBA0.4mg.L—1+根太阳35ppm。接入生根培养基直接进行光照培养。20天后统计平均生根率为79%。
[0021]实施例2:
[0022]将准备生根的瓶苗预先转入继代培养基中培养至5-7天、选择萌发出2-4cm长新芽的植株转入生根培养基:1/4MS大量+IBA0.4mg.L—1+根太阳35ppm。接入生根培养基后进行暗培养5-7天，再进行光照培养。20天后统计平均生根率为92.7%。
[0023]实施例3:
[0024]将准备生根的瓶苗预先转入继代培养基中培养至5-7天、选择萌发出2-4cm长新芽的植株转入生根培养基:1/4MS大量+IBA0.25mg.L—1+根太阳25ppm。切割生根植株时，一个主枝带1-2个新芽转入生根培养基中，接入生根培养基后进行暗培养5-7天，再进行光照培养。20天后统计平均生根率为90.3%。
[0025]各培养阶段均为培养温度控制25-28°C，光照10小时/天，光照强度约16001x ;暗
培养为完全黑暗培养。[0026]本发明旨在花吊丝竹组培组培技术中存在难生根的问题，制约了其建立稳定高效的组培快繁体系，因此本发明方法在花吊丝组培繁育中生根培养阶段前采用了先继代培养5-7天时间后，再转入生根培养基，使得植株在同时萌发出新芽后再同时出根，达到了苗木生长、生根整齐的要求。首次添加了根太阳的使用，利于生根率的提高。插入暗培养分步骤有利于暗培养条件下细胞快速完成脱分化，促使根的分化形成，所以暗培养利于生根率的提闻并利于生根时间的提iu。[0027]本发明英文名词说明:
[0028]MS:组培中用到的一种基本培养基(包含大量元素、微量元素、铁盐和有机成分)
[0029]VC:抗坏血酸，一种水溶性维生素
[0030]6-BA:6_苄氨基嘌呤，一种植物细胞分裂素
[0031]NAA:萘乙酸，一种植物细胞生长素
[0032]IBA:吲哚-3- 丁酸，一种植物生根剂
[0033]KT:6_糖基氨基嘌呤，一种植物细胞分裂素
[0034]根太阳:一种新型的分子信号诱导型植物生根剂
[0035]CW:椰乳，椰子汁
[0036]Lx:勒克斯，光照强度单位。
【权利要求】
1.一种花吊丝竹组培繁育中的继代、生根方法，包括继代培养、生根培养步骤，其特征在于:在继代培养步骤的多周期继代扩繁时为生根培养步骤选苗，当一个周期继代培养中培养至5-7天、将基部萌发出2-4cm长新芽的植株转入生根培养步骤；生根培养步骤为将植株接入生根培养基:1/4MS大量+IBA0.2-0.4mg.L—1+根太阳25_35ppm先进行暗培养5_7天，再进行光照培养20天；所述各培养阶段培养温度均控制在25-28°C，暗培养为完全黑暗培养，光照培养为光照10小 时/天、光照强度1600-22001X。
【文档编号】A01H4/00GK103493739SQ201310495293
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年10月11日 优先权日:2013年10月11日
【发明者】黄树燕 申请人:福建省永安林业(集团)股份有限公司种苗中心