本发明涉及组织培养基
技术领域：
，具体涉及一种大蒜脱毒组培苗的培养基。
背景技术：
：玉林大蒜已经有一千多年的栽培历史。其个头大、粒瓣结实、辛辣多汁、肉脆味香，茎皮颜色多为紫色，亦有白色。被列为广西土特产品，销路广，出口价值高，经济效益好。产地集中在仁东、仁厚、福绵、大平山等地。大蒜气味辛温，含有丰富的蛋白质、脂肪、糖、钙、铁和维生素A、B、C等营养物质，并具有较高的药用价值，有"消炎、理胃、温中、除邪痹毒气"之功效。大蒜头还是常用的调料，在煮瓜、菜、鱼、肉时，放入几瓣，芳香可口。玉林大蒜是广西名优地方特色农产品，因其具有品质独特、香味浓郁、辣味强烈、蒜油丰富、衣泽紫红等优点，在市场上深受欢迎。据有关部门检测，玉林大蒜是目前我国大蒜品种中香味最浓、辣味最烈、蒜油最丰富的品种，故又名玉林香蒜，极适宜加工蒜油、蒜蓉和调味食品。大蒜是无性繁殖植物，由于大蒜不能进行有性繁殖,通常是农民种植户常年自留种蒜，有限的自然变异并不能满足遗传改良的要求,通过传统的方法很难准确测定次生代谢组分含量和评价遗传变异。玉林大蒜依靠鳞茎繁殖，使病毒通过蒜种逐年累积并代代相传，导致品种种性严重退化，严重制约了玉林大蒜大规模生产和持续健康发展，限制了将玉林大蒜打造成地区特色产品的步伐。目前很少关于针对玉林大蒜，利用大蒜茎尖进行组织培养进行繁殖的研究，虽然目前有关其他品种进行组织培养的报道，但由于玉林大蒜品种与其他品种存在一定差别，组培效果差。缺少一种专门针对玉林大蒜的脱毒组培苗的培养方法和专用培养基。公开于该
背景技术：
部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。技术实现要素：本发明的发明目的在于：针对现有技术中的问题，提供一种大蒜脱毒大蒜脱毒组培苗的培养基，有效促进大蒜离体组织分裂和生长，提高移栽活率和出芽率，适合大蒜脱毒组织培养中使用，特别适合玉林大蒜在组织培养中使用。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以MS培养基或B5培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA0.5-2.0mg/L、NAA0.05-0.5mg/L，所述培养基PH值为5.6-6.0。优化的，所述基础培养基选自B5培养基。更优化的，以基础培养基计、所述6-BA为1.2-1.5mg/L，所述NAA为0.3-0.5mg/L。进一步优化的，培养基中还包括以下质量-体积浓度的活性成分：芸苔素内酯0.01-0.1mg/L、茉莉酸0.02-0.08mg/L、根皮苷0.1-0.8mg/L、活性炭1-3g/L、马铃薯浆30-50g/L、复合维生素0.2-0.4mg/L。更进一步优化的，所述活性成分质量-体积浓度为：芸苔素内酯0.03-0.08mg/L、茉莉酸0.04-0.06mg/L、根皮苷0.3-0.6mg/L、活性炭1.5-2.5g/L、马铃薯浆35-45g/L、复合维生素0.25-0.35mg/L。再更进一步优化的，所述活性成分以基础培养基计，成分名称和质量-体积浓度如下：6-BA1.4mg/L、NAA0.4mg/L、芸苔素内酯0.05mg/L、茉莉酸0.05mg/L、根皮苷0.4mg/L、活性炭2g/L、马铃薯浆30g/L、复合维生素0.3mg/L。再更进一步优化的，所述培养基PH值为5.8。综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：1.本发明培养基中添加了芸苔素内酯，具有用量少，可抑制生长素氧化酶的活性，提高植物内源生长素的含量，从而显著促进大蒜的伸长生长。芸苔素内酯与培养基中的生长素如NAA及其他活性成分如茉莉酸等，活性相互之间具有促进作用，共同促进大蒜组织中组织或组培苗的生长。本发明中还添加有茉莉酸可以有效促进大蒜组织细胞的分裂、分化，与6-BA一起共同促进大蒜组织细胞分裂。添加茉莉酸后可显著促进大蒜根系变多和生长，能够激发防御植物基因的表达，诱导植物的化学防御，使大蒜组培苗今后种植过程中适应能力增强，移栽成活性高。2.本发明培养基中添加一定浓度的活性炭，可以有效减少大蒜组织和培养基变色，有效吸附培养基中的有害物质和培养基中杂质，对组织培养过程中产生的有害代谢产物也可以起到吸附的作用，从面减少大蒜组培过程中的成活率。本发明中的根皮苷可以在培养基酸性环境下，可以有效的抑制培养基内有害微生物的活动，延长培养基变质，与活性炭共同作用，有效的保持培养基稳定，处于适合大蒜生长的环境状态下。本发明培养基与基础培养基相比，变色时间可延迟培养基5-8天。3.本发明选择MS培养基或B5培养基为基础培养基，可以具有维持离休植物细胞基本生命所需要的大部分营养成分，以此做为大蒜组培过程中的培养基是不够的。本发明通过添加适合大蒜生长具有促进作用的各种活性成分，补充基础营养中大蒜组培所需营养成分，均衡营养；利用各物质间相互作用，为大蒜的组织培养过程提供适宜的专用培养基。本发明提供的大蒜专用培养基，营养丰富，针对大蒜植物特性制备，能够有效提高大蒜出芽茎尖数和芽诱导率，组培苗根系发达，茎粗壮，生命力顽强。【具体实施方式】下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以MS培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA0.5mg/L、NAA0.05mg/L，所述培养基PH值为5.6。实施例2一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以MS培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA2.0mg/L、NAA0.5mg/L，培养基PH值为6.0。实施例3一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以MS培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA1.5mg/L、NAA0.3mg/L，培养基PH值为5.8。实施例4一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以B5培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA1.5mg/L、NAA0.3mg/L，培养基PH值为5.8。实施例5一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以B5培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA1.2mg/L、NAA0.1mg/L、芸苔素内酯0.01mg/L、茉莉酸0.02mg/L、根皮苷0.1mg/L、活性炭1g/L、马铃薯浆30g/L、复合维生素0.2mg/L，培养基PH值为5.7。实施例6一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以B5培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA2.0mg/L、NAA0.5mg/L、芸苔素内酯0.1mg/L、茉莉酸0.08mg/L、根皮苷0.8mg/L、活性炭3g/L、马铃薯浆50g/L、复合维生素0.4mg/L，培养基PH值为5.9。实施例7一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以B5培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA1.2mg/L、NAA0.3mg/L、芸苔素内酯0.03mg/L、茉莉酸0.04mg/L、根皮苷0.3mg/L、活性炭1.5g/L、马铃薯浆35g/L、复合维生素0.25mg/L，培养基PH值为5.8。实施例8一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以B5培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA1.5mg/L、NAA0.5mg/L、芸苔素内酯0.08mg/L、茉莉酸0.06mg/L、根皮苷0.6mg/L、活性炭2.5g/L、马铃薯浆45g/L、复合维生素0.35mg/L，培养基PH值为5.8。实施例9一种大蒜脱毒组培苗的培养基，培养基以B5培养基为基础培养基，以基础培养基计、还包括以下质量-体积浓度的活性成分：6-BA1.4mg/L、NAA0.4mg/L、芸苔素内酯0.05mg/L、茉莉酸0.05mg/L、根皮苷0.4mg/L、活性炭2g/L、马铃薯浆30g/L、复合维生素0.3mg/L。培养基PH值为5.8。效果对比试验实验样品：实施例1-8分别做为实样样品1-8号。同时设对照培养基，对照培养基设置如下：对照1号为B5培养基；对照2号为MS培养基实验方法：实验样品为同一批玉林大蒜，采用相同的组培操作方法，取玉林大蒜的大蒜茎尖分别接种到不同的培养基中，通过同样的培养条件下培养一段时间，观察不同培养基上各大蒜的出芽数，计算出芽率。不同培养基对大蒜组培苗的出芽率影响样品接种茎尖数(个)出芽数(个)出芽率(％)实施例11002929实施例21003434实施例31004646实施例41005252实施例51008585实施例61008484实施例71009090实施例81009292实施例91009696对照1号1001616对照2号1001212从实施例3和实施例4中分别采用MS和B5两种不同基本培养基，其他条件同，进行玉林大蒜茎尖芽诱导分化培养，结果表明接种的大蒜茎尖在MS和B5培养基中均可诱导分化出芽并成苗，且以B5培养基的出芽率较高，相比之下，MS培养基的芽诱导迟2-3天，出芽率低，玉林大蒜茎尖培养采用B5基本培养基较好。实施例5-9与实施例1-4和对照1-2号相对，出芽率明显高于后面两个，表面增加多种成分的培养基更适合玉林大蒜的生长。且以实施例9最高。相对于两个基础的培养基对照1号和对照2号，实施例1-9中添加了不同活性成分的培养基都明显要高于对照1号和对照2号。上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。当前第1页1 2 3