野生兰州湾脆蘑菌种分离及其驯化栽培方法
【专利摘要】本发明涉及兰州湾脆蘑菌种的分离及其驯化栽培方法，该方法采用菌种分离、液体扩繁及驯化栽培即可得到食用菌新品种-兰州湾脆蘑。通过本发明所述方法，兰州湾脆蘑可以进行人工驯化栽培，进而为食用菌市场提供优异新品种。本发明的栽培方法出菇期一个月左右，栽培周期3-4个月。通过本发明所述方法获得的兰州湾脆蘑为浅灰褐色，菌盖表面有微绒毛，肉质洁白脆嫩，深受人们喜爱。
【专利说明】野生兰州湾脆蘑菌种分离及其驯化栽培方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食用菌驯化栽培技术，涉及兰州湾脆蘑的菌种分离、液体扩繁、栽培料及驯化方法。
【背景技术】
[0002]野生兰州湾脆蘑属伞菌目离褶伞属，子实体扁半球形至平展，朽叶色或浅灰褐色，肉质洁白脆嫩，味道鲜美，深受当地人民喜爱。但目前还未能进行商品化栽培。本发明目的在于，提供一种兰州湾脆蘑菌种分离及其驯化栽培方法，该方法采用菌种分离、液体扩繁及驯化栽培即可得到食用菌优异新品种-兰州湾脆蘑，通过本发明所述方法以便使野生兰州湾脆蘑可以进行人工驯化栽培，为食用菌市场提供优质新品种。通过本发明所述方法获得的兰州湾脆蘑栽培周期为3-4个月，子实体为浅灰褐色，菌肉洁白细嫩，味道鲜美。
【发明内容】
[0003]本发明目的在于提供一种野生兰州湾脆蘑菌种分离及其驯化栽培方法，该方法采用菌种分离、液体扩繁及驯化栽培即可得到食用菌新品种-兰州湾脆蘑，获得的兰州湾脆蘑出菇期一个月左右，栽培周期3-4个月，子实体的菌盖为浅灰褐色，并且菌盖表面有微绒毛。通过本发明所述方法获得的兰州湾脆蘑，肉质洁白脆嫩，味道鲜美，深受人们喜爱，为食用菌市场提供优异新品种-兰州湾脆蘑。
[0004]本发明所述的一种野生兰州湾脆蘑菌种分离及其驯化栽培方法，按下列步骤进行:
菌种分离:
a、采用常规PDA培养基，用组织分离法从野生兰州湾脆蘑的菌盖和菌柄交接处进行分离，然后取菌块分别接种于试管中，温度20-25°C培养15-25天获得洁白致密的母种；
菌种的液体扩繁:
b、采用摇瓶培养扩繁母种获得栽培种，液体扩繁培养基为:马铃薯100-250g/L、麸皮9-25 g/L、红糖 15-25 g/L、蛋白胨 1.5-3.0 g/L、磷酸二氢钾 0.5-2.5 g /L、磷酸氢二钾0.5-1.5 g/L和硫酸镁1.5-2.0 g/L，将试管母种接入液体培养基，温度20_25°C，培养7_14天获得栽培种；
栽培培养基配方与制作:
C、称取粉碎长I cm的玉米秸杆85-90 %，用质量浓度1_3%的石灰水浸泡24小时，捞出控水，加入10-15%麸皮，拌匀装瓶，温度121 °C高压灭菌2小时，以备栽培用；
d、取主料玉米芯40%-60%、牛粪30%-40%和玉米杆10%_20%，加入占主料1%的石灰、占主料2%的过磷酸钙和占主料2%的石膏，按双孢蘑菇栽培法制作发酵料，然后将发酵料装瓶或装塑料袋，温度121-128°C高压灭菌2-2.5小时；
驯化栽培:
e、将步骤b栽培种接入步骤c和d栽培培养基中，然后将栽培瓶移入菌种培养室，温度20-25 °C培养1-2个月，菌丝便长满菌种瓶；
f、菌丝满瓶后，采用加大温差促进原基分化，培养室温度为15-23°C，3-5天即可分化形成原基，原基分化后6-10天即可采摘子实体，出菇期30-35天。
[0005]步骤c和d栽培培养基的含水量为65-70%。
[0006]步骤e中菌种培养室的相对湿度25-30%。
[0007]步骤f中菌种培养室的相对湿度40-50%。
【专利附图】
【附图说明】
[0008]图1为本发明兰州湾脆蘑子实体图片。
【具体实施方式】
[0009]实施例1
菌种分离:
a、采用常规PDA培养基，用组织分离法从野生兰州湾脆蘑的菌盖和菌柄交接处进行分离，然后取菌块分别接种于试管中，温度20°C培养25天获得洁白致密的母种；
菌种的液体扩繁:
b、采用摇瓶培养扩繁母种获得栽培种，液体扩繁培养基为:马铃薯100g/L、麸皮9 g/L、红糖15 g/L、蛋白胨1.`5 g/L、磷酸二氢钾0.5 g/L、磷酸氢二钾0.5 g/L和硫酸镁1.5g/L，将试管母种接入液体培养基，温度20°C，培养14天获得栽培种；
栽培培养基配方与制作:
C、按重量百分比称取粉碎长Icm的玉米稻杆85%,用质量浓度1%的石灰水浸泡24小时，捞出控水，加入15%麸皮，拌匀装瓶，温度121 °C高压灭菌2小时，以备栽培用，栽培培养基的含水量为65-70% ；
d、取主料玉米芯(剥去籽粒的玉米棒)40%、牛粪40%和玉米杆20%，加入占主料1%的石灰、占主料2%的过磷酸钙和占主料2%的石膏，按双孢蘑菇栽培法制作发酵料，然后将发酵料装瓶或装塑料袋，温度121 °C高压灭菌2小时，栽培培养基的含水量为65-70% ；
驯化栽培:
e、将步骤b栽培种接入步骤c和d栽培培养基中，然后将栽培瓶移入菌种培养室，相对湿度25%，温度20°C培养2个月，菌丝便长满菌种瓶；
f、菌丝满瓶后，进行出菇，原基分化时培养室温度为23°C，相对湿度40%，并采用通风加大温差促进原基分化，5天即可形成原基，原基分化后6天即可采摘子实体，出菇期30-35天。
[0010]实施例2
菌种分离:
a、采用常规PDA培养基，用组织分离法从野生兰州湾脆蘑的菌盖和菌柄交接处进行分离，然后取菌块分别接种于试管中，温度23°C培养20天获得洁白致密的母种；
菌种的液体扩繁:
b、采用摇瓶培养扩繁母种获得栽培种，液体扩繁培养基为:马铃薯200g /L、麸皮16g/L、红糖20 g/L、蛋白胨2 g/L、磷酸二氢钾1.5 g /L、磷酸氢二钾I g/L和硫酸镁1.8g/L,将试管母种接入液体培养基，温度23 V，培养10天获得栽培种；
栽培培养基配方与制作:
C、按重量百分比称取粉碎长Icm的玉米稻杆88%,用质量浓度1%的石灰水浸泡24小时，捞出控水，加入12%麸皮，拌匀装瓶，温度121 °C高压灭菌2小时，以备栽培用，栽培培养基的含水量为65-70% ；
d、取主料玉米芯(剥去籽粒的玉米棒)50%、牛粪35%和玉米杆15%，加入占主料1%的石灰、占主料2%的过磷酸钙和占主料2%的石膏，按双孢蘑菇栽培法制作发酵料，然后将发酵料装瓶或装塑料袋，温度125°C，高压灭菌2.5小时，栽培培养基的含水量为65-70% ；
驯化栽培:
e、将步骤b栽培种接入步骤c和d栽培培养基中，然后将栽培瓶移入菌种培养室，相对湿度30%，温度23°C培养1.5个月，菌丝便长满菌种瓶；
f、菌丝满瓶后，进行出菇，原基分化时培养室温度为20°C，相对湿度45%，并采用通风加大温差促进原基分化，4天即可形成原基；原基分化后8天即可采摘子实体，出菇期30-35天。
[0011]实施例3
菌种分离:
a、采用常规PDA培养基，用组织分离法从野生兰州湾脆蘑的菌盖和菌柄交接处进行分离，然后取菌块分别接种于试管中，温度25°C培养15天获得洁白致密的母种；
菌种的液体扩繁:
b、采用摇瓶培养扩繁母种获得栽培种，液体扩繁培养基为:马铃薯250g /L、麸皮25g/L、红糖25 g/L、蛋白胨3 g/L、磷酸二氢钾2.5 g /L、磷酸氢二钾1.5 g/L和硫酸镁2.0g/L,将试管母种接入液体培养基，温度25°C，培养7天获得栽培种；
栽培培养基配方与制作:
C、按重量百分比称取粉碎长Icm的玉米稻杆90%,用质量浓度3%的石灰水浸泡24小时，捞出控水，加入10%麸皮，拌匀装瓶，温度121 °C高压灭菌2小时，以备栽培用，栽培培养基的含水量为65-70% ；
d、取主料玉米芯(剥去籽粒的玉米棒)60%、牛粪30%和玉米杆10%，加入占主料1%的石灰、占主料2%的过磷酸钙和占主料2%的石膏，按双孢蘑菇栽培法制作发酵料，然后将发酵料装瓶或装塑料袋，温度128°C，高压灭菌2.5小时，栽培培养基的含水量为65-70% ；
驯化栽培:
e、将步骤b栽培种 接入步骤c和d栽培培养基中，然后将栽培瓶移入菌种培养室，相对湿度30%，温度25°C培养I个月，以便菌丝长满菌种瓶；
f、菌丝满瓶后，进行出菇，原基分化时培养室温度为15°C，相对湿度50%，并采用通风加大温差促进原基分化，3天即可形成原基；原基分化后10天即可采摘子实体，出菇期30-35 天。
【权利要求】
1.一种野生兰州湾脆蘑菌种分离及其驯化栽培方法，其特征在于按下列步骤进行: 菌种分离: a、采用常规PDA培养基，用组织分离法从野生兰州湾脆蘑的菌盖和菌柄交接处进行分离，然后取菌块分别接种于试管中，温度20-25°C培养15-25天获得洁白致密的母种； 菌种的液体扩繁: b、采用摇瓶培养扩繁母种获得栽培种，液体扩繁培养基为:马铃薯100-250g/L、麸皮9-25 g/L、红糖 15-25 g/L、蛋白胨 1.5-3.0 g/L、磷酸二氢钾 0.5-2.5 g /L、磷酸氢二钾0.5-1.5 g/L和硫酸镁1.5-2.0 g/L，将试管母种接入液体培养基，温度20_25°C，培养7_14天获得栽培种； 栽培培养基配方与制作: C、称取粉碎长I cm的玉米秸杆85-90 %，用质量浓度1_3%的石灰水浸泡24小时，捞出控水，加入10-15%麸皮，拌匀装瓶，温度121 °C高压灭菌2小时，以备栽培用； d、取主料玉米芯40%-60%、牛粪30%-40%和玉米杆10%_20%，加入占主料1%的石灰、占主料2%的过磷酸钙和占主料2%的石膏，按双孢蘑菇栽培法制作发酵料，然后将发酵料装瓶或装塑料袋，温度121-1 28°C高压灭菌2-2.5小时； 驯化栽培: e、将步骤b栽培种接入步骤c和d栽培培养基中，然后将栽培瓶移入菌种培养室，温度20-25 °C培养1-2个月，菌丝便长满菌种瓶； f、菌丝满瓶后，采用加大温差促进原基分化，培养室温度为15-23°C，3-5天即可分化形成原基，原基分化后6-10天即可采摘子实体，出菇期30-35天。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤c和d栽培培养基的含水量为65-70%。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤e中菌种培养室的相对湿度25-30%。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤f中菌种培养室的相对湿度40-50%。
【文档编号】A01G1/04GK103598011SQ201310569576
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年11月13日 优先权日:2013年11月13日
【发明者】付振艳, 王建宝, 王晓军, 胥萌萌, 林翠 申请人:中国科学院新疆理化技术研究所, 三明市食用菌协会