烟粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道基因MED BtTrp及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及基因工程领域，具体涉及烟粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道基因MED?BtTrp及其应用，其核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示。本发明从烟粉虱MED隐种中克隆到瞬时感受器离子通道TRP(MED?BtTrp)基因的cDNA，并通过饲喂MEDBtTrp基因dsRNA结果导致烟粉虱MED隐种在高温胁迫下存活率显著降低。本发明结果对于明确烟粉虱MED隐种温度感知机制有重要意义，期望为进一步研究烟粉虱的温度适应机理和日后通过温度适应性控制烟粉虱危害的方法提供依据。
【专利说明】烟粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道基因MED BtTrp及其
应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及基因工程领域，具体涉及烟粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道基因MED BtTrp及其应用。
【背景技术】
[0002]烟粉風Bemisia tabaci(Gennadius)属半翅目(Hemiptera)粉風科(Aleyrodidae),小粉風属Bemisia,是多食性的刺吸性害虫，主要分布在热带和亚热带地区。烟粉虱入侵并成功扩张的机制包括多方面、多层次的内容，而在全球变化的环境下，生态适应是其关键环节之一。生态适应涉及的因素主要包括生物因素和非生物因素，在非生物因素中，温度是影响其种群动态和扩散分布的重要因素。已有研究表明，烟粉虱入侵机制和烟粉虱温度适应性密切相关。[0003]MED隐种对温度具有较强的抵抗力是其能扩散为全世界重要害虫的关键因素之一，是其入侵并成功扩张的重要机制之一。MED隐种具有很强的耐高温能力，使其在炎热的季节能猖獗危害；而在寒冷季节，逐渐扩大的保护地为其提供了越冬场所，使得其累积大量虫口数以致暴发。昆虫耐热性的获得与热激蛋白(heat shock proteins, HSP)的分子伴侣作用有关，热激蛋白在生物热胁迫生态适应和进化上起着重要作用。前期研究表明热激蛋白基因在烟粉虱耐热性中起着关键性作用，为更好的理解烟粉虱温度适应能力，研究烟粉虱怎样感知外界温度并将其传递至体内的温度感知机制尤为重要。已有研究表明，瞬时感受器离子通道TRP (transient receptor potential)是生物感知外界温度的关键通道。
[0004]瞬时感受器离子通道(transient receptor potential, TRP)是位于细胞膜上的一类重要的离子通道，最早发现于果蝇的视觉系统中。被激活时，允许包括钙离子在内的阳离子进行跨膜运输。TRP作为感受器中的门控分子，起到外部环境和神经系统中介的作用，可以将热刺激、化学刺激以及机械刺激等转化成内向电流。TRP在模式生物果蝇中研究较为透彻，主要具有光感应、温度感知、机械感应和生化感应等生物学功能。
[0005]RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指内源性或外源性的dsRNA(double-stranded RNA, dsRNA)介导的细胞内的mRNA发生特异性降解,从而导致祀细胞表达沉默，产生相应的功能表型缺失的现象。RNAi作为关闭特定基因功能的新技术，为基因功能的研究提供了一个快速、简便的方法，对于昆虫的研究起到了十分重要的作用。RANi技术在基因功能方面的研究是一项快速、高效、便于操作的可以使靶基因失活的技术。近些年，RNAi技术在昆虫研究上得到越来越多的应用，通过RNAi技术沉默昆虫体内某些基因，使昆虫的某些能力增强或丧失，也能在特定时间抑制其功能基因表达使昆虫的发育停留在某个阶段，进而达到利用或防治其危害的目的。RNAi技术通常采用饲喂、注射、浸泡、电穿孔、干细胞移植、通过转基因技术制备等方法。在昆虫研究中，通常采用注射法和饲喂法来进行RNAi效应的研究，将目的基因的dsRNA或SiRNA导入昆虫体内，进而实现干扰。由于烟粉虱个体体积小，注射dsRNA不易操作、费时等限制，而饲喂dsRNA具有简便、易于操作等特点而在烟粉虱研究中得以应用。
[0006]本发明从烟粉虱MED隐种中克隆到瞬时感受器离子通道TRP(MED BtTrp)基因的cDNA,并提供烟粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道TRP基因cDNA的克隆方法，并通过饲喂MED BtTrp基因dsRNA结果导致烟粉虱MED隐种在高温胁迫下存活率显著降低。本发明结果对于明确烟粉虱MED隐种温度感知机制有重要意义，期望为进一步研究烟粉虱的温度适应机理和日后通过温度适应性控制烟粉虱危害的方法提供依据。
【发明内容】
[0007]本发明的目的是从烟粉虱MED隐种中克隆到MED BtTrp基因。
[0008]本发明的再一目的是验证了 MED BtTrp基因在烟粉虱高温胁迫条件下所起的作用，提供了上述的MED BtTrp基因的应用。
[0009]根据本发明的MED BtTrp基因，所述MED BtTrp基因cDNA全长核苷酸序列如SEQID N0.1 所示:
[0010]
【权利要求】
1.烟粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道基因MEDBtTrp，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID N0.1 所示。
2.权利要求1所述烟 粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道基因MEDBtTrp用于防治烟粉虱的应用。
【文档编号】A01N57/16GK103898121SQ201410153314
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2014年4月16日 优先权日:2014年4月16日
【发明者】吕志创, 李倩, 万方浩, 周忠实, 郭建英 申请人:中国农业科学院植物保护研究所