一种无公害的水产养殖抗菌杀虫制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明是一种应用于水产养殖领域的防治寄生虫和细菌性病害的制剂及其制备方法。其特征在于含印楝素干粉1～45％，溶菌酶干粉1～25％，润湿剂1～10％，分散剂1～8％，崩解剂1～5％，乳化剂1～10％，黏结剂0.01～2％，填充剂适量的能速溶水的粒剂。本发明属于水分散粒剂，利用印楝素与溶菌酶间的协同增效作用，杀虫与抗菌消炎同步进行，治疗效果明显。制剂PH4～6保证了活性物质稳定，保质期长。天然杀虫和抗菌物质复配克服了抗药性，且具有广谱、高效、低毒、无污染、无残留的优点，从而可以代替传统的化学杀虫剂和抗生素，为无公害的水产养殖模式创造了有利的条件，保护生态环境和消费者的食品安全。
【专利说明】一种无公害的水产养殖抗菌杀虫制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种无公害水产养殖所使用的防治寄生虫细菌性病害的药物制剂的制备方法，特别涉及一种以印楝素和溶菌酶复配驱杀水产动物体内寄生虫与抗菌消炎同步进行，一剂双效的创新制剂的制备方法及其在水产养殖领域的应用。
【背景技术】
[0002]鱼类寄生虫病是鱼类养殖业中的主要病害之一，其流行区域广、时间长，可引起鱼的大量死亡。以往水产养殖上使用农药、重金属盐类防治鱼类寄生虫病效果不错，但随着时间的推移，抗药性不断呈现。同时这类药物对水产生物具有蓄积残留效应，可引发水产品质量问题。出口产品药残超标、屡遭禁运，使人们重新认识到化学杀虫剂带来的诸多问题，当前大力推广的健康无公害水产养殖模式迫切需要寻求一种新型的无公害防治药物。生物制剂由于具有纯天然、无公害、针对性强，对人畜安全，无毒害，不污染环境，也不易产生抗性等优点，受到世界各国农药研究和开发者们的高度关注。发展生物农药是我国发展绿色水产业、增强水产品国际竞争力的一条重要途径。植物源杀虫剂是生物农药的重要组成部分，印楝作为世界公认的最有潜力的杀虫植物，以其杀虫的广谱性、效果显著性等特点，成为当今世界最受重视的杀虫植物，印楝无公害生物农药的制备是当今国际上无公害生物农药创新的热点。
[0003]印楝素是从印楝树中提取的三萜化合物，属于高度氧化的柠檬素类。印楝素对昆虫具有拒食、忌避，调节生长和绝育等多种作用，在农业上作为杀虫剂使用已取得了良好的效果，但印楝素作为鱼类寄 生虫病防治药物在水产养殖业上应用这个领域的研究很少，现有的技术都是照搬了印楝素在种植业等其他农业领域的应用方法，如已经公开的中国专利申请“水产动物杀虫剂”(公布号CN102429896A)，是将印楝素浸膏、氯氰菊酯苯油、高氯乳化剂、二甲基酰胺、二甲苯复配成乳化液，采用全池泼洒的方式防治水产寄生虫，实际效果并不理想，实际上还是化学药在起作用，而且极易对水体造成二次污染。特别是菊酯类药物对虾等甲壳类水产动物产生毒害，副作用太大。因此，由于水产养殖业的特殊性，不能照搬普通种植业使用的防治害虫经验，对印楝素等植物源杀虫剂作为水产药物进入水体后的毒理试验是非常必要的，对复配剂型的选择也是非常关键的。
[0004]寄生虫对鱼类的影响显著时可引起宿主生长发育缓慢，抵抗力下降，甚至造成死亡。有时寄生虫的影响并不显著，养殖者则不予重视。但从实际生产情况看，水产动物的细菌性疾病主要是细菌性体表病,而寄生虫造成的损伤则是引起这类疾病发生和流行的主要原因，两者是一体的。在选择水产杀虫剂的同时应该选择抗菌消炎的药物与之配伍，收到标本兼治的良好效果。为了防治滥用抗生素造成耐药性，我们选择了同样来源于天然的抗菌消炎药物溶菌酶，与印楝素复配。
[0005]溶菌酶广泛分布于动物、植物和微生物中，在鸡蛋清中含量较高。具有抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力、促进双岐杆菌增殖等作用。溶菌酶能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖，使细胞壁变的松弛，细胞溶解死亡。近年来，溶菌酶在医疗、食品防腐、畜牧及生物工程中，具有广泛的应用，因为抗菌力强且纯天然、无毒、无害，应用前景非常广阔。研究发现溶菌酶能直接水解革兰氏阳性菌，在分泌型免疫球蛋白A、补体的参与下，还能水解革兰氏阴性菌如大肠杆菌等。此外，它还可与各种诱发炎症的酸性物质结合，使其失活，并能增强抗生素和其他药物的疗效，改善组织基质的粘多糖代谢，从而达到消炎、修复组织的目的。
[0006]研究表明，印楝素与溶菌酶在水体中的溶解度均非常良好，且两种物质都属于干粉状，性状接近。利用现有成熟的水分散颗粒剂加工技术，可以很容易把两者复配成水分散粒剂，并应用于水产养殖。
【发明内容】
[0007]本发明的目的即在于克服现有技术的缺点，提供一种对水产动物寄生虫及细菌性病害防治效果理想，克服寄生虫和细菌抗药性，广谱、安全、无公害的抗菌杀虫天然复合制剂，针对水产养殖的特点，使用方便、起效快、并降低用药成本。
[0008]本发明的另一个目的是提供上述天然复合制剂的制作方法。
[0009]本发明的再一目的是提供上述复合制剂在水产养殖中作为杀灭水生动物寄生虫、治疗水产动物皮肤病、肠胃炎等的用途。
[0010]本发明的目的通过以下技术方案来实现:印楝素与溶菌酶复配的抗菌杀虫水分散粒剂，它包括印楝素干粉，它还包括溶菌酶干粉，润湿剂、分散剂、崩解剂、乳化剂、粘结剂和填充剂，以上各成分的与总重量比例印楝素1-45%，溶菌酶1_25%，润湿剂1_10%，分散剂1_8%，崩解剂1_5%，乳化剂1-10%，粘结剂0.01-2%，PH调节剂适量、填充剂余量。
[0011]所述的印楝素干粉，为含量达到40%以上的印楝素原药，可以通过以下步骤取得:取粉碎的印楝种仁，用60-70%的甲醇或乙醇回流提取，调至醇含20%，，静止置冷却，分离除去油层，得到脱油的印楝提取物，通过控制大孔吸附树脂层析或轴向液相色谱层析，得其中印楝素含量40 %的提取物，提取物脱溶干燥，即为印楝素干粉。印楝素在本发明水分散颗粒剂的含量为1-45%.[0012]所述的溶菌酶干粉，可以通过以下步骤取得:取鸡蛋清，加入2倍量的纯净水稀释，用醋酸调节PH值为3.5，水浴加热到85。C，搅拌加热5min，将所得液体3000r/min离心IOmin,收集上清液，将上清液加入处理好的CMS印haroseFF层析柱中，控制流速在200ml/h左右，吸附完毕用纯净水冲洗吸附柱，以除去杂蛋白，用0.lmol/L的氯化钠溶液洗脱溶菌酶，收集洗脱液，浓缩、干燥即得溶菌酶干粉，酶活性1500u/mg。溶菌酶在本发明中的含量为1-25%。
[0013]所述的的润湿剂，可以是蓖麻油聚氧乙烯醚、蔗糖酯、吐温、烷基醚硫酸钠，烷基苯磺酸盐、拉开粉、多山梨醇酯中任何一种或多种，本发明优选为拉开粉。含量1-10%。
[0014]所述的分散剂可以是奈磺酸盐、木质素磺酸钙、NNO中的一种，本发明优选NNO为分散剂，含量为1-8%.[0015]所述的崩解剂为硫酸铵、低取代羟丙基甲基纤维素、干淀粉、甲基淀粉钠、泡腾崩解剂中任一种。本发明中更优选为硫酸铵，含量1_5%。
[0016]所述的乳化剂，可以为0P-10，TX-10，020IB，优选为020IB，含量为1_10%。
[0017]所述的粘结剂优选为淀粉、甲基纤维素、羧甲基纤维素、聚乙烯醇中的一种或多种。优选为聚乙烯醇含量为0.01-2%.[0018]所述的PH调节剂，可以为有机酸，无机酸、固体酸，本发明优选为固体酸。印楝素与溶菌酶在PH4-6范围最稳定，优选为调PH为5.5。
[0019]所述的填充剂优选为膨润土、高岭土、轻钙、白炭黑中的一种或几种，使用多种时，总使用量不能大于份量的最大值。本发明中优选为白炭黑。
[0020]本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果:
[0021](I)印楝素与溶菌酶协同发挥作用，特别对水产动物寄生虫引起的皮肤病、肠胃炎有显著效果，同时也适于防治已产生严重抗药性的多类病害。
[0022](2)采用印楝素与溶菌酶混配水分散粒剂，确立了获得良好抗菌杀虫效果的混配比例，降低了印楝素的用量和农药残留量，对环境无污染、无残留，高效、低毒，同时能够延缓害虫抗药性的产生。
[0023](3)减轻水产品的药物残留，有利于提高水产品的市场竞争能力，有利于保护人畜安全，保护生态环。
[0024](4)制剂的PH值调节为弱酸性，可保持印楝素和溶菌酶活性稳定，延长了药剂的保质期。
【具体实施方式】
[0025]下面结合优选的实例对本发明作进一步详细的描述，湿润剂、粘结剂、崩解剂、填充剂可参照本领域常规使用，并不因此将发明限定于以下实施例中。 [0026]实施例1
[0027]生产浓度为18%的印楝素与溶菌酶混配水分散粒剂，各组份配比是:
[0028](I)加入10% (重量)印楝素干粉；
[0029](2)加入8% (重量)溶菌酶干粉
[0030](3)加入2% (重量)的拉开粉
[0031](4)加入 5% (重量)的 NNO
[0032](5)加入3.5% (重量)的硫酸铵
[0033](6)加入 2.5% (重量)的 0201B
[0034](7)加入0.1 (重量)的聚乙烯醇
[0035](8)加入68.9 (重量)预先调节PH值为5.5的白炭黑
[0036]将配方混合物进行超细粉碎后造粒、干燥、筛分即得产品。
[0037]实施例2
[0038]生产浓度为3%的印楝素与溶菌酶混配水分散剂，各组份比例是:
[0039](I)加入1.8% (重量)的印楝素干粉
[0040](2)加入1.2% (重量)的溶菌酶干粉
[0041](3)加入10% (重量)吐温为润湿剂
[0042](4)加入10% (重量)甲基纤维素为粘结剂
[0043](5)加入15% (重量)干淀粉为崩解剂
[0044](6)加入55% (重量)预先调节PH值为5.5的高岭土为填充剂
[0045]将配方料混合物进行超细粉碎后造粒、干燥、筛分即得产品。
[0046]实施例3[0047]生产浓度为58%的印楝素与溶菌酶混配水分散粒剂，各组分配比是:
[0048](I)加入40% (重量)印楝素干粉
[0049](2)加入18% (重量)溶菌酶干粉
[0050](3)加入11% (重量)蔗糖酯为润湿剂
[0051](4)加入13% (重量)淀粉为粘结剂
[0052](5)加入8% (重量)甲基淀粉钠为崩解剂
[0053](6)加入17% (重量)预先调节PH值为5.5的膨润土为填充剂
[0054]将配方料混合物进行超微粉碎后造粒、干燥、筛分即得产品。
[0055]印楝素与溶菌酶水分散粒剂的鱼类寄生虫的杀灭试验
[0056]采用静态室内试验法，在一组水族箱中放入曝气除氯的自来水，有效体积为50L，PH7.2，DO大于5mg/L，硬度为8.5德国度，试验水温为28摄氏度，将感染寄生虫的病鱼移入水族箱中，每箱10条。试验设置4个浓度组,分别是0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L的印楝素与溶菌酶的混配水分散粒剂，另设空白对照组。用药后连续观察3d，以寄生虫的生存状况来反映药物的杀虫活性。
[0057]试验结果
[0058] 试验3d后，0.2mg/L组病鱼腮上的车轮虫减少了 58%，0.4mg/L处理组车轮虫数减少了 81%，0.6mg/L处理组车轮虫数减少93%，0.8mg/L处理组车轮虫减少100%.表明车轮虫的减少与药品浓度呈正比关系。
【权利要求】
1.一种无公害水产养殖抗菌杀虫制剂及其制备方法，其特征在于，该制剂是一种以印楝素素与溶菌酶混合复配而成的水分散粒剂，具有抗菌和杀虫的双重功效，及其制备的方法，其特征在于制剂中含有以下重量百分比的物质:印楝素I~45%，溶菌酶I~25%，润湿剂I~10%，分散剂I~8，崩解剂I~5%，乳化剂I~10，粘结剂0.01~2，填充剂为余量，调节制剂PH值为4~6。
2.根据权利要求1所述的一种无公害水产养殖抗菌杀虫制剂，其特征在于以印楝素与溶菌酶复配制备水分散粒剂，还可以是粉剂、水剂、乳剂、片剂和其它剂型，所有以印楝素与溶菌酶混合复配的剂型，均应包括在此创造范围之内。
3.根据权利要求1所述的一种无公害水产养殖抗菌杀虫制剂及其制备方法，其特征在于加入了 PH值调节剂，调节PH值4~6的范围内，保持印楝素与溶菌酶的活性稳定。
4.根据权利要求1所述的一种无公害水产养殖抗菌制剂及其制备方法，其特征在于，润湿剂优选为拉开粉，占重量百分比I~10%，分散剂优选为NNO，占重量百分比I~8%，崩解剂优选为硫酸铵，占重量百分比I~5%，乳化剂优选为020IB，占重量百分比I~10%，粘结剂优选为聚乙烯醇，占重量百分比0.01~2%。
5.根据权利要求 1所述的一种无公害水产养殖抗菌杀虫制剂，本发明的用途在于治疗水产动物疾病，防治水产寄生虫病，但不限于水产养殖的范围，畜牧业、种植业等农业领域均可使用，也在本专利的保护要求范围。
【文档编号】A01N63/02GK103990117SQ201410168370
【公开日】2014年8月20日 申请日期:2014年4月25日 优先权日:2014年4月25日
【发明者】徐文中, 董燕声 申请人:珠海市康益达生物科技有限公司