一种茶籽粕脱毒方法
【专利摘要】本发明公开了一种茶籽粕脱毒方法，包括步骤：使用黑曲霉(Aspergillus niger)和乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)混合发酵茶籽粕原料。该方法的具体步骤为：茶籽粕中加入3-5倍重量份的水，搅拌均匀，60℃-90℃处理1-3h；分别培养黑曲霉菌种和乳酸乳球菌菌种；调节预处理过的茶籽粕pH至6.5-7.5，加入甘蔗糖蜜，60℃-90℃热处理1h后接种，发酵72h后发酵产物干燥粉碎后即得脱毒茶籽粕。本发明使用黑曲霉菌种和乳酸乳球菌菌种发酵，具有优异的协同性能，发酵后茶皂苷含量降低显著，小分子肽含量显著提高。
【专利说明】一种茶籽粕脱毒方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物【技术领域】，尤其涉及一种茶籽柏脱毒方法。
【背景技术】
[0002] 油茶是中国特有的一种纯天然高级油料植物，占全国木本食用油料的80%以上。 我国油茶面积约有5500万亩，油茶籽年产量约为100万吨，年产茶油高达20万吨，预估产 值为110亿元。按照油茶茶籽含油量26 %?39%，得油率70 %计算，油茶籽柏年产量70万 吨左右，而且今年来茶油产量逐年增长，导致茶籽柏产量也进入了增长快车道。
[0003] 茶油生产中产生的茶籽柏中茶皂素、多酚类物质等抗营养因子含量过高，不适 宜直接用于动物饲料，大部分被用作清塘剂、肥料、燃料，甚至废弃，少量用于茶皂素的提 取，造成了资源的极大浪费。茶籽柏一般含0.5%?7%的粗脂肪、10%?20%的蛋白质、 15%?25%的粗纤维、30%?60%的糖类物质、20%?50%的无氮浸出物。油茶籽柏蛋白 质中含有18种氨基酸，包括畜禽生长所需的10种必需氨基酸，其中苏氨酸、谷氨酸、组氨酸 和精氨酸等含量较为丰富。同时，矿物质和微量元素 Ca、K、Mg、Fe、Mn等含量也较为丰富。 如果除去油茶籽柏中的抗营养因子，就可以使其变成一种营养价值较高的饲料原料。
[0004] 茶皂苷是茶籽柏中的主要毒性物质，其毒性主要表现为溶血性。溶血性是其苷元 与红细胞壁上胆留醇结合生成不溶于水的复合物沉淀，破坏细胞渗透压，使红细胞发生崩 解，进而导致溶血现象。皂苷有无溶血活性与皂苷元有关，活性强弱与糖分子的大小、糖分 子之间的连接、糖分子上的取代基等有关，此外还与皂苷的浓度有关。因此本领域技术人员 致力于开发一种能够显著降低茶皂苷含量，改善茶籽柏动物饲料用品质的技术。
[0005] 甘蔗糖蜜是制糖工业中将压榨出的甘蔗汁液，经加热、中和、沉淀、过滤、浓缩、结 晶等制糖工序后所剩下的浓稠液体，俗称糖稀，属于液体能量饲料。甘蔗糖蜜能刺激瘤胃 (反刍动物的第一胃）活动，增进食欲，从而增加草料和干物质摄入量并帮助消化。糖蜜的 美味使草料的摄入增加。其他味道差的成分味道被糖蜜掩盖，从而保证了重要元素的摄入。 甘蔗糖蜜作为一种糖工业中的天然副产品，是很好的能量来源和生命活动调节者。
【发明内容】
[0006] 有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种茶籽柏脱毒 的方法。
[0007] 为实现上述目的，本发明提供了一种茶籽柏脱毒方法，包括步骤：
[0008] 使用黑曲霉（Aspergillus niger)和乳酸乳球菌（Lactococcus Iactis)混合发 酵茶籽柏原料。
[0009] 优选地，所述方法的具体步骤为：
[0010] (1)茶籽柏预处理
[0011] 茶籽柏中加入3-5倍重量份的水，搅拌均匀，60°C -90°c处理l-3h ;
[0012] ⑵菌种培养
[0013] 分别培养黑曲霉菌种和乳酸乳球菌菌种；
[0014] ⑶半固体发酵
[0015] 调节步骤（1)中预处理过的茶籽柏pH至6. 5-7. 5,加入甘蔗糖蜜，60°C -90°C热处 理Ih后接种步骤（2)中所得菌种，发酵72h ;
[0016] ⑷干燥粉碎
[0017] 将步骤（3)发酵产物干燥粉碎后即得脱毒茶籽柏。
[0018] 优选地，步骤（1)中，茶籽柏预处理过程中pH为9-12 ;更优选地为10-11。
[0019] 优选地，步骤（2)中，黑曲霉菌种培养条件为：蔗糖2.5 % (w/v)，酵母粉0.3 % (w/ v)，蛋白胨 1.0% (w/v) ,K2HPO4 0.1% (w/v)，MgS04.7H20 0.01% (w/v)，25°C培养 1-2 天。
[0020] 优选地，步骤（2)中，乳酸乳球菌菌种培养条件为：蛋白胨1.0% (w/v)，牛肉膏 1.0% (w/v)，酵母抽提物 0.5% (w/v)，葡萄糖 2% (w/v)，K2HP04 0.2% (w/v)，MgS04*7H20 0· 002% (w/v)，37°C厌氧培养 12-24 小时。
[0021] 优选地，步骤（3)中，黑曲霉菌种接种量为5-10% (v/v)。
[0022] 优选地，步骤（3)中，乳酸乳球菌菌种接种量为20-30% (v/v)。
[0023] 优选地，步骤（3)中，甘鹿糖蜜的添加量为茶籽柏质量的5-10%。
[0024] 技术效果
[0025] 本发明的技术方案，由于茶籽柏中茶皂素的存在，使得茶籽柏粘性较大，本发明人 在研究意外地发现，在碱性条件下高温处理茶籽柏，能够极大的降低茶籽柏原料的粘度，使 得后续的半固体发酵能够顺利的进行。
[0026] 本发明使用黑曲霉菌种和乳酸乳球菌菌种发酵，具有优异的协同性能，发酵后茶 皂苷含量降低显著，小分子肽含量显著提高。
[0027] 本发明使用甘蔗糖蜜作为发酵培养基的原料，不仅价格低廉，而且能够完全满足 发酵过成中的营养需求，非常适合作为黑曲霉菌种和乳酸乳球菌菌种混合发酵的碳源，无 需再添加其它成分，简化了发酵工艺。前期的研究结果表明，以黑曲霉和乳酸乳球菌进行混 合发酵，使用甘蔗糖蜜作为碳源，发酵产物中，小分子肽的含量明显高于以葡萄糖（高出约 20% )和蔗糖（高出约10% )作为碳源进行发酵。
【具体实施方式】
[0028] 在本发明的实施例中，有关数据按照下述方法进行检测：
[0029] 粗蛋白含量检测方法参考：国家标准GB/T6432-94《饲料中粗蛋白测定方法》；
[0030] 水溶性蛋白检测方法参考：农业行业标准NY/T1205-2006《大豆水溶性蛋白含量 的测定》执行；
[0031] 小分子肽含量检测方法参考：按照轻工行业标准QB/T2653-2004《大豆肽粉》执 行；
[0032] 茶皂素含量检测方法参考：钟世安等，反相高效液相色谱法测定茶籽饼中茶皂素 [J]，理化检验，2008 ;
[0033] 纤维素含量检测方法参考：国家标准GB/T5009. 10-23。
[0034] 黑曲霉（Aspergillus niger)和乳酸乳球菌（Lactococcus Iactis)购自北京北 纳凯创生物技术有限公司。
[0035] 实施例I
[0036] (1)茶籽柏预处理
[0037] 5公斤茶籽柏中加入20公斤的水，搅拌均匀，调节pH为10,90°C处理Ih ;
[0038] (2)菌种培养
[0039] 黑曲霉囷种的培养：
[0040] 鹿糖 2. 5% (w/v)，酵母粉 0· 3% (w/v)，蛋白胨 I. 0% (w/v) ,K2HPO4 0· 1% (w/v)， MgS04 · 7H20 0· 01% (w/v)，25°C培养 2 天。
[0041] 乳酸乳球菌培养：
[0042] 蛋白胨I. 0% (w/v)，牛肉膏L 0% (w/v)，酵母抽提物0· 5% (w/v)，葡萄糖2% (w/ v)，K2HPO4 0· 2% (w/v)，MgSO4 · 7H20 0· 002% (w/v)，37°C厌氧培养 24 小时。
[0043] (3)半固体发酵
[0044] 调节步骤（1)中预处理过的茶籽柏pH至6. 5,加入甘鹿糖蜜500g，9(TC热处理Ih 后接种黑曲霉菌种液2. 5L，乳酸乳球菌菌种液5L，发酵72h ;
[0045] (4)干燥粉碎
[0046] 将步骤（3)发酵产物干燥粉碎后即得脱毒茶籽柏。
[0047] 以未发酵的茶籽柏为对照，进行检测，设定对照组中各项目含量为100%，检测结 果如表1所示。
[0048] 表 1
[0049]
【权利要求】
1. 一种茶籽柏脱毒方法，其特征在于，包括步骤：使用黑曲霉（Aspergillus niger)和 乳酸乳球菌（Lactococcus lactis)混合发酵茶籽柏原料。
2. 如权利要求1所述的方法，其中，所述方法的具体步骤为： (1) 茶籽柏预处理 茶籽柏中加入3-5倍重量份的水，搅拌均匀，60°C -90°C处理l_3h ; (2) 菌种培养 分别培养黑曲霉菌种和乳酸乳球菌菌种； (3) 半固体发酵 调节步骤（1)中预处理过的茶籽柏pH至6. 5-7. 5,加入甘蔗糖蜜，60°C _90°C热处理lh 后接种步骤（2)中所得菌种，发酵72h ; (4) 干燥粉碎 将步骤（3)发酵产物干燥粉碎后即得脱毒茶籽柏。
3. 如权利要求1所述的方法，其中，步骤（1)中，茶籽柏预处理过程中pH为9-12;更优 选地为10-11。
4. 如权利要求1所述的方法，其中，步骤⑵中，黑曲霉菌种培养条件为：鹿糖2. 5% (w/v)，酵母粉 0· 3% (w/v)，蛋白胨 1. 0% (w/v)，Κ2ΗΡ04 0· 1 % (w/v)，MgS04 · 7H20 0· 01 % (w/v)，25°C 培养 1-2 天。
5. 如权利要求1所述的方法，其中，步骤⑵中，乳酸乳球菌菌种培养条件为：蛋白胨 1.0% (w/v)，牛肉膏 1.0% (w/v)，酵母抽提物 0.5% (w/v)，葡萄糖 2% (w/v)，K2HP04 0.2% (w/v)，MgS04 · 7H20 0· 002% (w/v)，37°C厌氧培养 12-24 小时。
6. 如权利要求1所述的方法，其中，步骤（3)中，黑曲霉菌种接种量为5-10% (v/v)。
7. 如权利要求1所述的方法，其中，步骤（3)中，乳酸乳球菌菌种接种量为20-30% (v/ v)。
8. 如权利要求1所述的方法，其中，步骤（3)中，甘蔗糖蜜的添加量为茶籽柏质量的 5-10%。
【文档编号】A23K1/14GK104286383SQ201410487785
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年9月16日 优先权日:2014年9月16日
【发明者】杨钟华 申请人:瑞安市普罗生物科技有限公司