一种蝙蝠葛组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种蝙蝠葛组织培养的快速繁殖方法，包括蝙蝠葛无菌苗的获得、丛生芽的增殖、壮苗、野外生根诱导等步骤，本发明方法采用无菌播种和组织培养方法获得无菌苗，并进行壮苗、生根培养与移栽，不仅繁殖成本低，培养周期短，且操作简单易行便于推广，为其优良品种的开发利用和快速繁殖提供技术支持。
【专利说明】 一种蝙傾葛组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及蝙蝠葛组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]蝙蝠葛，防己科,Menispermum dauricum DC,又称山豆根、黄条香、山豆秧根、尼恩巴。多年生草本花卉，落叶藤本，小枝绿色，叶互生，肾形或卵圆形，长5至12cm，全缘或3至7浅裂，叶柄盾状着生。花单性异株，短圆锥花序腋生，花小，淡绿色，花期5至6月。核果近球形，紫黑色，果期7至9月。耐寒，多生于海拔200至1500山地林缘、灌丛沟谷或缠绕岩石上。分布于中国东北、华北和华东；朝鲜，日本，苏联西伯利亚地区也有。根和茎含山豆根碱、汉防已碱等多种生物碱，有剧毒，供药用。功能:降血压、解热、镇痛。主治:牙龈肿痛、咳嗽、急性咽喉炎、慢性扁桃腺炎、肺炎、支气管炎。扁桃体炎，咽喉炎，风湿痹痛、麻木，水肿，脚气，痢疾肠炎，胃痛腹胀。主要采用播种及分株繁殖，组织培养的繁殖方法尚无人研究。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是一种蝙蝠葛组织培养的快速繁殖方法，本发明方法采用无菌播种和组织培养方法获得无菌苗，并进行壮苗、生根培养与移栽，不仅繁殖成本低，培养周期短，且操作简单易行便于推广，为其优良品种的开发利用和快速繁殖提供技术支持。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案:
取蝙蝠葛的种子，清洗干净，在100mg/L的赤霉素溶液中浸种16h，超净工作台上70%酒精处理50s，15%的次氯酸钠处理15min，流水冲洗5次，接入MS培养基中培养无菌苗，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，温度22±2°C，获得的无菌苗去掉胚根，接种于MCM+1.5mg/LZT+0.15mg/LKT培养基中进行丛生芽的增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照 35001x，温度 23±2°C，增殖后的丛生芽接入 MCM+l-2mg/L6_BA+0.025-0.5mg/LIAA+3-4mg/LKT培养基中进行壮苗，附加蔗糖60g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照45001x，温度25±2°C，将长约3cm的芽苗取出，洗去根部培养基，栽植于灭菌过的腐殖土中，搭设小荫棚，每天早晚浇灌一次0.6mg/LABT生根剂中，定期喷雾，温度25°C，湿度90%。
[0005]采用本发明制备的蝙蝠葛成活率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取蝙蝠葛的种子，清洗干净，在100mg/L的赤霉素溶液中浸种16h，超净工作台上70%酒精处理50s，15%的次氯酸钠处理15min，流水冲洗5次，接入MS培养基中培养无菌苗，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，温度22±2°C，获得的无菌苗去掉胚根，接种于MCM+1.5mg/LZT+0.15mg/LKT培养基中进行丛生芽的增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照 35001x，温度 23±2°C，增殖后的丛生芽接入 MCM+lmg/L6_BA+0.025mg/LIAA+3mg/LKT培养基中进行壮苗，附加蔗糖60g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照45001x，温度25±2°C，将长约3cm的芽苗取出，洗去根部培养基，栽植于灭菌过的腐殖土中，搭设小荫棚，每天早晚浇灌一次0.6mg/LABT生根剂中，定期喷雾，温度25 V，湿度90%，生根率94%。
[0008]实施例2
取蝙蝠葛的种子，清洗干净，在100mg/L的赤霉素溶液中浸种16h，超净工作台上70%酒精处理50s，15%的次氯酸钠处理15min，流水冲洗5次，接入MS培养基中培养无菌苗，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，温度22±2°C，获得的无菌苗去掉胚根，接种于MCM+1.5mg/LZT+0.15mg/LKT培养基中进行丛生芽的增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照 35001x，温度 23±2°C，增殖后的丛生芽接入 MCM+2mg/L6_BA+0.5mg/LIAA+4mg/LKT培养基中进行壮苗，附加蔗糖60g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照45001x，温度25±2°C，将长约3cm的芽苗取出，洗去根部培养基，栽植于灭菌过的腐殖土中，搭设小荫棚，每天早晚浇灌一次0.6mg/LABT生根剂中，定期喷雾，温度25°C，湿度90%，生根率95%。
[0009]实施例3
取蝙蝠葛的种子，清洗干净，在100mg/L的赤霉素溶液中浸种16h，超净工作台上70%酒精处理50s，15%的次氯酸钠处理15min，流水冲洗5次，接入MS培养基中培养无菌苗，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，温度22±2°C，获得的无菌苗去掉胚根，接种于MCM+1.5mg/LZT+0.15mg/LKT培养基中进行丛生芽的增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照 35001x，温度 23±2°C，增殖后的丛生芽接入 MCM+2mg/L6_BA+0.025mg/LIAA+4mg/LKT培养基中进行壮苗，附加蔗糖60g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照45001x，温度25±2°C，将长约3cm的芽苗取出，洗去根部培养基，栽植于灭菌过的腐殖土中，搭设小荫棚，每天早晚浇灌一次0.6mg/LABT生根剂中，定期喷雾，温度25°C，湿度90%，生根率97%。
【权利要求】
1.一种蝙蝠葛组织培养的快速繁殖方法，包括蝙蝠葛无菌苗的获得、丛生芽的增殖、壮苗、野外生根诱导，其主要步骤如下: (1)取蝙蝠葛的种子，清洗干净，在100mg/L的赤霉素溶液中浸种16h，超净工作台上70%酒精处理50s，15%的次氯酸钠处理15min，流水冲洗5次，接入MS培养基中培养无菌苗，附加蔗糖 30g/L，琼脂 7g/L，ρΗ5.8，光照 30001χ，温度 22±2°C ； (2)将步骤(I)获得的无菌苗去掉胚根，接种于MCM+1.5mg/LZT+0.15mg/LKT培养基中进行丛生芽的增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照35001x，温度23±2°C ； (3)将步骤(2)增殖后的丛生芽接入MCM+l-2mg/L6-BA+0.025-0.5mg/LIAA+3-4mg/LKT培养基中进行壮苗，附加蔗糖60g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照45001x，温度25±2°C ； (4)将步骤(3)壮苗后的丛生芽进行野外生根诱导。
2.按照权利要求1所述的一种蝙蝠葛组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中所述蝙蝠葛野外生根诱导的培养方法为将长约3cm的芽苗取出，洗去根部培养基，栽植于灭菌过的腐殖土中，搭设小荫棚，每天早晚浇灌一次0.6mg/LABT生根剂中，定期喷雾，温度25°C，湿度90%。
【文档编号】A01H4/00GK104285796SQ201410540506
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司