一种石菖蒲组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种石菖蒲组织培养的快速繁殖方法，包括石菖蒲无菌外植体的获得、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、壮苗、生根培养等步骤，本发明通过对石菖蒲诱导、增殖、生根的研究，可以提高石菖蒲繁殖材料组培苗质量，从而为石菖蒲种苗快繁体系的建立及产业化奠定一定的理论基础及技术支撑。
【专利说明】一种石菖蒲组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及石菖蒲组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]石菖蒲，Jcorw1S又称九节菖蒲、山菖蒲、药菖蒲,天南星科,多年生草本植物，其根茎具气味。叶全缘，排成二列，肉穗花序(佛焰花序)，花梗绿色，佛焰苞叶状。喜阴湿环境，在郁密度较大的树下也能生长，但不耐阳光暴晒，否则叶片会变黄。不耐干旱，稍耐寒，在长江流域可露地生长。常见于海拔20-2600米的密林下，生长于溪旁石上。产黄河以南各省区，印度东北部至泰国北部也有。具有化湿开胃，开窍豁痰，醒神益智的功效，用于脘痞不饥，噤口下痢，神昏癫痫，健忘耳聋。理气，活血，散风，去湿。治癫痫，痰厥，热病神昏，健忘，气闭耳聋，心胸烦闷，胃痛，腹痛，风寒湿痹，痈疽肿毒，跌打损伤。主要的繁殖方法采用根茎繁殖，组培技术应用其快速繁殖具有很强的优越性。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是一种石菖蒲组织培养的快速繁殖方法，本发明通过对石菖蒲诱导、增殖、生根的研究，可以提高石菖蒲繁殖材料组培苗质量，从而为石菖蒲种苗快繁体系的建立及产业化奠定一定的理论基础及技术支撑。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案:
取石菖蒲优良当年生枝条且直径为0.5cm半木质化的带芽茎段为外植体，剪取2-3cm，每段带I个芽，在自来水中保存ld，洗衣粉浸泡lOmin，流水冲洗0.5h，超净工作台上70%的酒精处理35s，0.5%的氯化汞处理lOmin，无菌水冲洗5次，消毒过的石菖蒲带芽茎段接入NT+2，4-D0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH5.8，光照20001x，温度22± I °C，诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH5.8，光照40001x，温度22土 1°C，增殖后的芽苗接入培养基NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BAl.0mg/L中进行壮苗，附加蔗糖40g/L，琼脂8.0g/L, pH5.8，光照60001x，温度23±2°C，壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.1-0.2mg/L+NAA0.1-0.2mg/L+Ag5.0-6.0mg/L 中进行生根培养，附加蔗糖 15g/L，琼脂 6.0g/L,pH5.8，光照 80001x，温度 25±2°C。
[0005]采用本发明制备的石菖蒲成活率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取石菖蒲优良当年生枝条且直径为0.5cm半木质化的带芽茎段为外植体，剪取2-3cm，每段带I个芽，在自来水中保存ld，洗衣粉浸泡lOmin，流水冲洗0.5h，超净工作台上70%的酒精处理35s，0.5%的氯化汞处理lOmin，无菌水冲洗5次，消毒过的石菖蒲带芽茎段接入NT+2，4-D0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH5.8，光照20001x，温度22土 1°C，诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH5.8，光照40001x，温度22± 1°C，增殖后的芽苗接入培养基 NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BAl.0mg/L 中进行壮苗，附加蔗糖 40g/L，琼脂 8.0g/L，pH5.8，光照60001x，温度23±2°C，壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.lmg/L+NAA0.1mg/L+Ag5.0mg/L中进行生根培养，附加蔗糖15g/L，琼脂6.0g/L, ρΗ5.8，光照80001χ,温度25±2°C，生根率 95%。
[0008]实施例2
取石菖蒲优良当年生枝条且直径为0.5cm半木质化的带芽茎段为外植体，剪取2-3cm，每段带I个芽，在自来水中保存ld，洗衣粉浸泡lOmin，流水冲洗0.5h，超净工作台上70%的酒精处理35s，0.5%的氯化汞处理lOmin，无菌水冲洗5次，消毒过的石菖蒲带芽茎段接入NT+2，4-D0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH5.8，光照20001x，温度22土 1°C，诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH5.8，光照40001x，温度22± 1°C，增殖后的芽苗接入培养基 NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BAl.0mg/L 中进行壮苗，附加蔗糖 40g/L，琼脂 8.0g/L，pH5.8，光照60001x，温度23±2°C，壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.2mg/L+NAA0.2mg/L+Ag6.0mg/L中进行生根培养，附加蔗糖15g/L，琼脂6.0g/L, ρΗ5.8，光照80001χ,温度25±2°C，生根率 96%。
[0009]实施例3
取石菖蒲优良当年生枝条且直径为0.5cm半木质化的带芽茎段为外植体，剪取2-3cm，每段带I个芽，在自来水中保存ld，洗衣粉浸泡lOmin，流水冲洗0.5h，超净工作台上70%的酒精处理35s，0.5%的氯化汞处理lOmin，无菌水冲洗5次，消毒过的石菖蒲带芽茎段接入NT+2，4-D0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH5.8，光照20001x，温度22土 1°C，诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH5.8，光照40001x，温度22± 1°C，增殖后的芽苗接入培养基 NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BAl.0mg/L 中进行壮苗，附加蔗糖 40g/L，琼脂 8.0g/L，pH5.8，光照60001x，温度23±2°C，壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.2mg/L+NAA0.1mg/L+Ag5.0mg/L中进行生根培养，附加蔗糖15g/L，琼脂6.0g/L, ρΗ5.8，光照80001χ,温度25±2°C，生根率 98%。
【权利要求】
1.一种石菖蒲组织培养的快速繁殖方法，包括石菖蒲无菌外植体的获得、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、壮苗、生根培养，其主要步骤如下: (1)取石菖蒲带芽茎段，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒过的石菖蒲带芽茎段接入NT+2，4-D0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，ρΗ5.8，光照20001χ，温度22 +TC ； (3)取步骤(2)诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，ρΗ5.8，光照40001χ，温度22 +TC ； (4)取步骤(3)增殖后的芽苗接入培养基NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BAl.0mg/L中进行壮苗，附加蔗糖40g/L，琼脂8.0g/L, ρΗ5.8，光照60001χ，温度23±2°C ； (5)取步骤(4)壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.1-0.2mg/L+NAA0.1-0.2mg/L+Ag5.0-6.0mg/L中进行生根培养，附加蔗糖15g/L，琼脂6.0g/L,pH5.8，光照80001x，温度25±2°C。
2.按照权利要求1所述的一种石菖蒲组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(O中所述石菖蒲的消毒处理为取石菖蒲优良当年生枝条且直径为0.5cm半木质化的带芽茎段为外植体，剪取2-3cm，每段带I个芽，在自来水中保存ld，洗衣粉浸泡lOmin，流水冲洗.0.5h，超净工作台上70%的酒精处理35s，0.5%的氯化汞处理lOmin，无菌水冲洗5次。
【文档编号】A01H4/00GK104221877SQ201410540502
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司