苦参的良种培育方法与流程

文档序号:11781026阅读:788来源:国知局

本发明涉及中药材人工种植技术领域,尤其是一种苦参的良种培育方法。



背景技术:

苦参,又叫苦骨、牛参、川参,为豆科植物苦参(sophora flavescens ait.)的干燥根。具有清热、燥湿、杀虫、利尿之功效,治疗热毒血痢、肠风下血、黄疽尿闭、赤白带下、阴肿阴痒、小儿肺炎、疳积、急性扁桃体炎、痔满、脱肛、湿疹、湿疮、皮肤瘙痒、疥癣麻风、阴疮湿痒、瘰疬、烫伤等。由于人们对该类药物的需求不断增长,而野生资源又不足,因此,采取人工种植的方法培育加工苦参是一种有效途径。

人工栽培苦参有利用种子进行有性繁殖方式和利用植物细胞的全能性无性繁殖方式,无性繁殖方式能保存优质品种和缩短栽培时间,但是由于缺乏品种的提纯复壮,病毒累积严重,使得苦参的病虫害发生率上升,产量下降。所以需要对苦参进行无害化处理,培育出良种苦参进行栽培。



技术实现要素:

本发明提供一种苦参的良种培育方法,它可以解决苦参由于长期无性繁殖引起的病毒累积严重的问题。

为了解决上述问题,本发明所采用的技术方案是:这种苦参的良种培育方法,包括如下步骤:

A、植株筛选:在苦参成熟时或者萌芽时,选择无病虫害的植株;

B、预处理和消毒:取步骤A所得植株的根尖或者子芽1~2cm,用清水清洗干净,再用70%的酒精漂洗30s,然后用0.1%的HgCl2溶液灭菌3min,无菌水洗3遍及以上;

C、将步骤B所得的子芽置于显微镜下,用酒精浸泡后,再用灼烧冷却的镊子和剪刀剥离子芽外部叶片,切取带有1~2个叶原基的茎尖;或者将步骤B所得的根尖置于显微镜下,用酒精浸泡后,再用灼烧冷却的镊子和剪刀将根尖分生区细胞切成3~7个根尖小段,再用无菌水清洗3遍及以上;

D、培育:将步骤C所得茎尖放入诱导培养基中进行培养,所述诱导培养基是MS+6-苄基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.0mg/L,等到生长出不定芽后,继续在所述诱导培养基中培养35~40天,至生长出3~4 cm丛生芽,将所述丛生芽剪成2片叶,长约1.5 cm的小段接入增殖培养基,所述增殖培养基是MS全培养基,20天为一个转接周期,当增殖至适当的数量后,将幼苗分25~30株为一批,分批接入生根培养基中,所述生根培养基是1/2MS+萘乙酸1.0mg/L+多效唑 10mg/L,培养至有白色根系长出;

或者将步骤C所得根尖小段放入诱导培养基中进行培养15~25天,所述诱导培养基是MS+6-苄基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L,得到预生根,将所述预生根的根尖1~2cm切成3~7个根尖小段接入所述诱导培养基培养15~25天,重复上述步骤至得到适当数量的预生根后,将所述预生根25~30个为一批,分批接入增殖培养基,所述增殖培养基是MS+6-苄基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L,培养至长出3~4 cm丛生芽;

E、将步骤D所得长叶长根的幼苗放入阳光下3~5天,取出幼苗,将其移栽至育苗床,行距5~6cm、株距5~6cm,开深3~4cm,每处栽种一株幼苗,保持育苗床湿润;所述育苗床是由甘蔗叶作为基质,混合有蔗糖厂滤泥和/或者鱼塘淤泥、磷酸氢二钾、花生麸、腐殖质发酵而得;当幼苗长出6~7片复叶,60%植株出现五出复叶时,将其移栽至大田,即可。

上述技术方案中,更具体的技术方案还可以是:所述培育阶段的培养条件为温度23~28℃,光照强度1500~1800LUX。

进一步的:所述育苗床的各成分比重为甘蔗叶60~75重量份、蔗糖厂滤泥和/或者鱼塘淤泥20~25重量份、磷酸氢二钾5~10重量份、腐殖质5~10重量份、花生麸1~2重量份。

由于采用了上述技术方案,本发明与现有技术相比具有如下有益效果:

1、苦参的茎尖和根尖的分生组织中一般是无毒或仅含极低浓度的病毒粒子,利用细胞的全能性,通过茎尖或者根尖分裂分化可产生完整的、无病毒的植株。本发明不仅是通过茎尖培养的方式,还提出了根尖培养的方式,获得优良无病毒的苦参幼苗,将其进行种植,植株生长健壮,长势一致,病虫害发生率只有8%左右,远远低于普通无性繁殖35%左右的病虫害发生率。

2、用本发明培育的苦参的良种幼苗进行栽种,苦参的产量能增加30%左右,并能保持野生苦参的所有优良特性及有效中药成分含量。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步详述:

实施例一:

这种苦参的良种培育方法如下:

A、植株筛选:在在9月底至11月上旬苦参成熟时或者3月份萌芽时,选择无病虫害的植株;

B、预处理和消毒:取步骤A所得植株的根尖1~2cm,用清水清洗干净,再用70%的酒精漂洗30s,然后用0.1%的HgCl2溶液灭菌3min,无菌水洗3遍;

C、将步骤B所得的根尖置于显微镜下,用酒精浸泡后,再用灼烧冷却的镊子和剪刀将根尖分生区细胞切成5个根尖小段,再用无菌水清洗3遍;

D、培育:将步骤C所得根尖小段放入诱导培养基中进行培养15天,所述诱导培养基是MS+6-苄基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L,得到预生根,将所述预生根的根尖1~2cm切成5个根尖小段接入所述诱导培养基培养15~25天,重复上述步骤至得到适当数量的预生根后,将所述预生根30个为一批,分批接入增殖培养基,所述增殖培养基是MS+6-苄基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L,培养至长出3~4 cm丛生芽;

以上培养条件为温度23~28℃,光照强度1500~1800LUX;

E、将步骤D所得长叶长根的幼苗放入阳光下3~5天,取出幼苗,将其移栽至育苗床,行距5~6cm、株距5~6cm,开深3~4cm,每处栽种一株幼苗,保持育苗床湿润;所述育苗床是由甘蔗叶作为基质,混合有滤泥、磷酸氢二钾、花生麸、腐殖质发酵而得;其中甘蔗叶60~75重量份、鱼塘淤泥20~25重量份、磷酸氢二钾5~10重量份、腐殖质5~10重量份、花生麸1~2重量份;当幼苗长出6~7片复叶,60%植株出现五出复叶时,将其移栽至大田,即可。

实施例二:

这种苦参的良种培育方法如下:

A、植株筛选:在在9月底至11月上旬苦参成熟时或者3月份萌芽时,选择无病虫害的植株;

B、预处理和消毒:取步骤A所得植株的子芽1~2cm,用清水清洗干净,再用70%的酒精漂洗30s,然后用0.1%的HgCl2溶液灭菌3min,无菌水洗3遍;

C、将步骤B所得的子芽置于显微镜下,用酒精浸泡后,再用灼烧冷却的镊子和剪刀剥离子芽外部叶片,切取带有1~2个叶原基的茎尖;

D、培育:将步骤C所得茎尖放入诱导培养基中进行培养,所述诱导培养基是MS+6-苄基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.0mg/L,等到生长出不定芽后,继续在所述诱导培养基中培养35天,至生长出3~4 cm丛生芽,将所述丛生芽剪成2片叶,长约1.5 cm的小段接入增殖培养基,所述增殖培养基是MS全培养基,20天为一个转接周期,当增殖至适当的数量后,将幼苗分30株为一批,分批接入生根培养基中,所述生根培养基是1/2MS+萘乙酸1.0mg/L+多效唑 10mg/L,培养至有白色根系长出;

以上培养条件为温度23~28℃,光照强度1500~1800LUX;

E、将步骤D所得长叶长根的幼苗放入阳光下3~5天,取出幼苗,将其移栽至育苗床,行距5~6cm、株距5~6cm,开深3~4cm,每处栽种一株幼苗,保持育苗床湿润;所述育苗床是由甘蔗叶作为基质,混合有滤泥、磷酸氢二钾、花生麸、腐殖质发酵而得;其中甘蔗叶60~75重量份、鱼塘淤泥20~25重量份、磷酸氢二钾5~10重量份、腐殖质5~10重量份、花生麸1~2重量份;当幼苗长出6~7片复叶,60%植株出现五出复叶时,将其移栽至大田,即可。

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