一种具有离心功能的微量精子冷冻装置的制作方法

文档序号:11906124阅读:326来源:国知局

本实用新型涉及一种精子冷冻装置,尤其是一种具有离心功能的微量精子冷冻装置。



背景技术:

目前,在进行辅助生殖技术助孕时,由于微量精子(来源于严重少精症、睾丸穿刺和附睾穿刺的精子)不易获取,且质量较差,有些严重少精子症和无精子症患者在取卵日不能提供足够的精子供ICSI受精,直接导致助孕失败。因此,对这些特殊患者进行精子冷冻保存意义重大。微量精子冷冻可减少无精症患者睾丸、附睾手术次数,降低反复手术的费用及手术的风险,减少取卵日无精子风险,保证卵子及时被利用。

与常规精液冷冻相比,微量精子冻存由于精子数量少,复苏后精子活率及回收率低,冷冻难度较大。微量精子冻存首先应选择合适的精子冻融载体。为了有效保存这些微量精子,国内外学者采用各种不同的载体来冷冻微量精子,这些载体包括了常规冷冻管、麦管、透明带、冷冻环和ICSI注射针等。精子头部直径4-5μm,尾部长40-50μm,应用常规冷冻管或麦管,冷冻前要用冷冻保护剂稀释,稀释及管壁粘附使得精子密度进一步降低,复苏后回收率低,甚至难以发现,且由于冷冻过程中细胞内冰晶形成等因素会导致复苏后精子细胞膜损伤严重,导致无法用于后续的辅助生殖治疗。另外一些研究利用人类和小鼠的空透明带冷冻微量精子,但人卵透明带较难获得,且可能存在污染的问题,难以推广应用。冷冻环、ICSI注射针也有被应用于微量精子冷冻,但精子加载难度较大。因此,需迫切寻求一种高效的微量精子的冷冻装置。

研究表明,减少精液冷冻损伤的关键是避免精子内冰晶的形成。精子冷冻中冰晶的形成导致机械损伤,精子顶体、质膜、线粒体及其DNA的完整性受到了影响,甚至导致细胞死亡。因此精子冷冻过程中,需要迅速跨越冰晶形成时期,降至玻璃化状态。要实现玻璃化降温必须要迅速,这就要求冷冻装置装载的体积要尽可能的小,并且冷冻载体的导热性能要好。经睾丸穿刺和附睾穿刺精子样本或自行排出的严重少精症精子样本总体积较大,约数毫升,含有较多其它非精子物质,冷冻时需经过离心、分管冷冻等多次转移操作,不利于微量精子的收集及造成微量精子的无端丢失。因此冷冻载体应避免多次转移,最大化地收集精子及最小化地降低精子丢失。而目前国内外未有可直接用于离心的精子冷冻载体。因此,只需微量冷冻液且可直接离心浓缩的玻璃化冷冻装置可以最大限度地减少精子冷冻-解冻过程中的冷冻损伤和提高回收率。



技术实现要素:

本实用新型的目的为了解决现有技术的缺陷,本实用新型提供了一种具有离心功能的微量精子冷冻装置。

为解决上述技术问题,本实用新型的技术方案是:

这种具有离心功能的微量精子冷冻装置,包括:冷冻载管和管盖,冷冻载管包括:金属环、内管、外管;

内管呈圆锥形,内管设于外管内,内管的开口设于内管上部,内管通过开口与外管固定连接,内管的底部呈尖锥形充分与液氮接触;

外管上面对应内管底部的位置镶嵌固定安装有由金属构成的环状金属环。

开口的直径设成适用于微量样本离心机的直径尺寸。

内管、外管管盖、连接绳由透明而薄且导热性高的材质构成。

管盖通过连接绳与内管的开口密封活动连接。

具有离心功能的微量精子冷冻装置还包括:熏蒸筛;所述的熏蒸筛由金属材质构成。

熏蒸筛的中间支柱设标记刻度,标记自由伸缩调节适合的熏蒸高度。

冷冻载管冷冻时放置在熏蒸筛内,在液氮蒸汽的作用下均匀,迅速降温。

具有离心功能的微量精子冷冻装置还包括:冷冻卡槽;所述的冷冻卡槽由铝质材料构成。

冷冻卡槽为多个与冷冻载管匹配固定连接的卡槽,依据冷冻载管的管数按需剪裁卡槽的大小以进行长期储存。

冷冻卡槽的上方设有标识区,以此进行冷冻信息的标记,节省冷冻空间。

本实用新型的有益效果:

①具有离心浓缩功能,能将200微升的微量精子离心成5微升立即冷冻,提高冷冻前精子浓度、减少所需的冷冻管数。

②从精液装管到最后解冻完成,冷冻及复苏整个过程不需要反复转移及更换,减少转移过程中精子的丢失,提高精子回收率。

③管壁薄、精液量少,温度传导速度快,可实现快速降温和复温,有效提高精子的存活率。

④采用密闭的精液冷冻管承载还可预防涨破的精液污染液氮,避免交叉污染,生物安全性高。

⑤载管可沉于液氮下,存储时避免漂浮而影响精液的冷冻效果。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本实用新型作进一步的说明。

图1是本实用新型的组合结构示意图。

具体实施方式

根据图1所示,本实用新型主要包括:冷冻载管1、金属环2、内管3、外管4、内管上部5、内管底部6、管盖7、连接绳8、开口9。

这种具有离心功能的微量精子冷冻装置,包括:冷冻载管1和管盖7,冷冻载管1包括:金属环2、内管3、外管4;

内管3呈圆锥形,内管3设于外管4内,内管3的开口9设于内管上部5,内管3通过开口9与外管4固定连接,内管3的底部呈尖锥形充分与液氮接触;

外管4上面对应内管3底部的位置镶嵌固定安装有由金属构成的环状金属环2。

开口9的直径设成适用于微量样本离心机的直径尺寸。

内管3、外管4管盖7、连接绳8由透明而薄且导热性高的材质构成。

管盖7通过连接绳8与内管3的开口9密封活动连接。

具有离心功能的微量精子冷冻装置还包括:熏蒸筛;所述的熏蒸筛由金属材质构成。

熏蒸筛的中间支柱设标记刻度,标记自由伸缩调节适合的熏蒸高度。

冷冻载管1冷冻时放置在熏蒸筛内,在液氮蒸汽的作用下均匀,迅速降温。

具有离心功能的微量精子冷冻装置还包括:冷冻卡槽;所述的冷冻卡槽由铝质材料构成。

冷冻卡槽为多个与冷冻载管1匹配固定连接的卡槽,依据冷冻载管1的管数按需剪裁卡槽的大小以进行长期储存。

冷冻卡槽的上方设有标识区,以此进行冷冻信息的标记,节省冷冻空间。

工作原理:

冷冻载管呈圆锥形,上部设计成适用于微量样本离心机的大小的直径,可直接用于离心浓缩精液,底部尖锥形可充分与液氮接触,实现迅速降温,选用透明而薄且导热性高的材质构成,底部镶嵌一金属环,可防止冷冻载管悬浮于液氮中,方便冷冻使用。

临床应用:

1、微量精子冷冻装置的应用

收集精液后,吸取精子悬液放入冷冻载管内,直接用低转离心浓缩。离心后尽可能去除上清液,然后再加入与精子沉淀1∶1体积的精子冷冻液,混匀,使最终悬液的总体积小于10μL。将装有精子悬液的冷冻载管置于液氮上方2-3cm熏蒸3-5min,然后直接投入液氮保存。解冻时直接将冷冻装置投入到预热好的37℃的水中放置约10min。最后将精子悬液吸出放置于培养皿中,加入少许培养液稀释培养。

2、微量精子复苏率评估

冷冻前和复苏后分别计算精子的存活率,以及冷冻后的存活指数(冷冻后的精子存活率/冷冻前的精子存活率)来评价微量精子的冷冻效果。

3、微量精子冷冻装置的应用效果评估

选取8例睾丸穿刺的精液,采用本新型冷冻装置进行微量冷冻保存。精子悬液分成两份,一份用于计数冷冻前精子的存活率,另一份用于微量冷冻。这8例患者精子冷冻前平均存活率为63.46%,解冻后平均存活率为54.02%,总的精子存活指数为0.85(该值为解冻后平均精子存活率/冷冻前平均精子存活率)。冷冻复苏后精子存活率、存活指数均符合世界卫生组织的标准。说明本新型冷冻装置作为微量精子冷冻载体是可行的、高效的。

综上所述,我们建立了一种高效、简便微量精子的冷冻装置,最大限度地减少精子冷冻-解冻过程中的冷冻损伤,提高了精子回收率,且复苏后具有良好的精子存活率,精子不易丢失,可用于后续的辅助生殖治疗,生物安全性高。这为微量精子的冷冻提供了技术支持和保障。国内外均未见相关的报道。

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