本发明涉及微生物菌剂技术领域，特别涉及厚垣孢轮枝菌生物农药新剂型及其制备方法。
背景技术：
根结线虫主要为害各种蔬菜、果树、林木、中草药和花卉的根部，表现为侧根和须根较正常增多，并在植株幼根的须根上形成球形或圆锥形大小不等的白色根瘤，有的呈念珠状。被害植株地上部生长矮小、缓慢、叶色异常，结果少，产量低，甚至造成植株提早死亡。目前已知为害蔬菜、果树、林木、中草药和花卉的线虫主要有爪哇根结线虫、花生根结线虫、北方根结线虫、南方根结线虫等16种根结线虫。线虫寄主范围广泛，常为害瓜类、茄果类、豆类及萝卜、葫萝卜、莴苣、白菜、柑橘等67科191属286种寄主植物，还能传播一些真菌性和细菌性病害，甚至传播病毒病害。
厚垣孢轮枝菌(verticilliumchlamdosporium)属于内寄生性真菌，是一些植物寄生线虫的重要天敌，能够寄生于线虫的卵，侵染幼虫和雌虫，可明显减轻多种作物根结线虫、胞囊线虫、茎线虫等植物线虫病的危害。广泛应用于烟草、花生、豆类、番茄、黄瓜、西瓜、茄子、生姜、香蕉、甘蔗等农作物根结线虫、胞囊线虫的防治，也可用于园林植物、花卉、果树和中草药根结线虫病的防治。
厚垣孢轮枝菌是活体菌剂，厚垣孢轮枝菌的制剂必须充分考虑厚垣孢轮枝菌的存活率；在使用后，存在诸多因素与厚垣孢轮枝菌竞争，因此在制剂中添加能使孢子存活、免受环境因子伤害的物质，抑制与厚垣孢轮枝菌竞争的微生物的物质，能够有效改善厚垣孢轮枝菌制剂的实际使用效果。
技术实现要素：
(一)解决的技术问题
本发明的目的是提供厚垣孢轮枝菌生物农药新剂型及其制备方法，所制得的生物制剂具有活性高、易储存、效果稳定的特点。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
厚垣孢轮枝菌生物农药新剂型及其制备方法，步骤如下：
s1、将厚垣孢轮枝菌发酵液与载体混合干燥，得到厚垣孢轮枝菌原粉，以所述厚垣孢轮枝菌原粉重量为基准，水分控制在20～25wt.％，载体含量60～65wt.％，厚垣孢轮枝菌孢子的含量为(2-5)×109个/g；
s2、黄腐酸30～40wt.％、淀粉40～50wt.％、活性炭10～15wt.％、糊精4～6wt.％粉碎混合后得到助剂；
s3、将厚垣孢轮枝菌原粉与助剂按质量比1:1.5～2混合均匀，调节水分至15～20wt.％，得到厚垣孢轮枝菌原制剂；
s4、厚垣孢轮枝菌原制剂制成粉剂、颗粒剂、片剂或可湿性粉剂。
优选的，将s3中得到的厚垣孢轮枝菌原制剂进行喷雾干燥，喷雾干燥的温度为40～50℃，使水分降至8wt.％以下，即可得到厚垣孢轮枝菌粉剂。
通过上述技术方案：所述的黄腐酸是药效活化剂，厚垣孢轮枝菌为嗜酸性微生物，有利于厚垣孢轮枝菌的萌发及生长，起到克服厚垣孢轮枝菌药效迟缓、抑制诸多竞争微生物活性的作用；
所述的淀粉及糊精用于保护和延长厚垣孢轮枝菌孢子的存活期；
所述的活性炭作为光保护剂，活性炭保护孢子的活性。
优选的，将s3中得到的厚垣孢轮枝菌原制剂50～60wt.％加崩解剂2～5wt.％、润滑剂2～5wt.％、水30～40wt.％混合后，加入到包衣机里，造粒，干燥，即可得到厚垣孢轮枝菌颗粒剂。
优选的，将s3中得到的厚垣孢轮枝菌原制剂85～95wt.％加崩解剂3～7wt.％、润滑剂3～7wt.％混合后，压片，即可得到厚垣孢轮枝菌颗粒剂。
优选的，将s3中得到的厚垣孢轮枝菌原制剂55～65wt.％、丁基萘磺酸钠3～6wt.％、崩解剂3～6wt.％、维生素c0.1～0.2wt.％、水20～30wt.％混合干燥，干燥后水分含量降至≤8wt.％得到厚垣孢轮枝菌可湿性粉剂。
优选的，所述厚垣孢轮枝菌发酵液的菌种为厚垣孢轮枝孢(verticilliumchlamdosporium)，该菌株于2017年06月07日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏单位地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏登记号为cgmccno.14131。
优选的，所述载体为白炭黑、硅藻土、高岭土、凹凸棒土中的一种或多种混合。
优选的，所述的助崩解剂选自氯化钠、氯化镁、氯化铝、氯化钙或硫酸铵中的一种或多种混合。
优选的，所述的润滑剂选自聚乙二醇、十二烷基硫酸镁、滑石粉、硬脂酸镁、氢化植物油中的一种或多种混合。
(三)有益效果
综上所述，本发明具有以下有益效果：
其一、所述的黄腐酸是药效活化剂，起到克服厚垣孢轮枝菌药效迟缓、抑制诸多竞争微生物活性的作用；
其二、所述的淀粉及糊精用于保护和延长厚垣孢轮枝菌孢子的存活期，使得厚垣孢轮枝菌制剂存储时间更长；
其三、活性炭作为光保护剂，保护了厚垣孢轮枝菌孢子的活性，使得药效更稳定；
其四、黄腐酸作用于根部具有防治根腐病、黑斑病的效果。
具体实施方式
实施例1：
厚垣孢轮枝菌粉剂的制备方法：
s1、将厚垣孢轮枝菌发酵液与载体混合干燥，得到厚垣孢轮枝菌原粉，以所述厚垣孢轮枝菌原粉重量为基准，水分控制在20～25wt.％，载体含量60wt.％，厚垣孢轮枝菌孢子的含量为(2-5)×109个/g；
s2、黄腐酸35wt.％、淀粉45wt.％、活性炭15wt.％、糊精5wt.％粉碎混合后得到助剂；
s3、将厚垣孢轮枝菌原粉与助剂按质量比1～2混合均匀，调节水分至15～20wt.％，得到厚垣孢轮枝菌原制剂；
s4、将厚垣孢轮枝菌原制剂进行喷雾干燥，喷雾干燥的温度为45℃，使水分降至8wt.％以下，即可得到厚垣孢轮枝菌粉剂。
实施例2：
厚垣孢轮枝菌颗粒剂的制备方法：
s1、将厚垣孢轮枝菌发酵液与载体混合干燥，得到厚垣孢轮枝菌原粉，以所述厚垣孢轮枝菌原粉重量为基准，水分控制在20～25wt.％，载体含量60wt.％，厚垣孢轮枝菌孢子的含量为(2-5)×109个/g；
s2、黄腐酸35wt.％、淀粉45wt.％、活性炭15wt.％、糊精5wt.％粉碎混合后得到助剂；
s3、将厚垣孢轮枝菌原粉与助剂按质量比1～2混合均匀，调节水分至15～20wt.％，得到厚垣孢轮枝菌原制剂；
s4、将s3中得到的厚垣孢轮枝菌原制剂60wt.％加氯化镁3wt.％、聚乙二醇3wt.％、水35wt.％混合后，加入到包衣机里，造粒，干燥，即可得到厚垣孢轮枝菌颗粒剂。
实施例3：
厚垣孢轮枝菌片剂的制备方法：
s1、将厚垣孢轮枝菌发酵液与载体混合干燥，得到厚垣孢轮枝菌原粉，以所述厚垣孢轮枝菌原粉重量为基准，水分控制在20～25wt.％，载体含量60wt.％，厚垣孢轮枝菌孢子的含量为(2-5)×109个/g；
s2、黄腐酸35wt.％、淀粉45wt.％、活性炭15wt.％、糊精5wt.％粉碎混合后得到助剂；
s3、将厚垣孢轮枝菌原粉与助剂按质量比1～2混合均匀，调节水分至15～20wt.％，得到厚垣孢轮枝菌原制剂；
s4、将s3中得到的厚垣孢轮枝菌原制剂60wt.％加氯化镁3wt.％、聚乙二醇3wt.％、水35wt.％混合后，压片，即可得到厚垣孢轮枝菌颗粒剂。
实施例4：
厚垣孢轮枝菌可湿性粉剂的制备方法：
s1、将厚垣孢轮枝菌发酵液与载体混合干燥，得到厚垣孢轮枝菌原粉，以所述厚垣孢轮枝菌原粉重量为基准，水分控制在20～25wt.％，载体含量60wt.％，厚垣孢轮枝菌孢子的含量为(2-5)×109个/g；
s2、黄腐酸35wt.％、淀粉45wt.％、活性炭15wt.％、糊精5wt.％粉碎混合后得到助剂；
s3、将厚垣孢轮枝菌原粉与助剂按质量比1～2混合均匀，调节水分至15～20wt.％，得到厚垣孢轮枝菌原制剂；
s4、将s3中得到的厚垣孢轮枝菌原制剂60wt.％、丁基萘磺酸钠5wt.％、氯化镁5wt.％、维生素c0.2wt.％、水30wt.％混合干燥，干燥后水分含量降至≤8wt.％得到厚垣孢轮枝菌可湿性粉剂。
1、检测黄腐酸对厚垣孢轮枝菌活性的影响，结果如下：
结果与分析
从以上对比结果可以看出，黄腐酸的添加可有效增加厚垣孢轮枝菌孢子的萌发率及菌丝的生长速度，有效增强厚垣孢轮枝菌的活性。
2、检测淀粉和糊精对制剂的影响，结果如下：
结果与分析
从以上对比结果可以看出，淀粉及糊精的添加可延长厚垣孢轮枝菌孢子的存活期，从而降低了厚垣孢轮枝菌孢子的损失率，延长存储期。
2、对烟草根结线虫病的防治效果进行了试验，结果如下：
2.1、试验药剂
供试药剂：厚垣孢轮枝菌的四种制剂
对照药剂：普通厚垣孢轮枝菌粉剂
2.2、试验处理
(1)厚垣孢轮枝菌粉剂0.5千克/亩
(2)厚垣孢轮枝菌颗粒剂0.5千克/亩
(3)厚垣孢轮枝菌片剂0.5千克/亩
(4)厚垣孢轮枝菌可湿性粉剂0.5千克/亩
(5)普通厚垣孢轮枝菌粉剂0.5千克/亩
(6)空白对照
2.3、试验方法
供试作物为烟草(nicotianatabacum)，品种为感病品种nc82，棕壤土，移栽作物，田间管理按生产规范进行。设置四组四种剂型的测试实验、一组普通厚垣孢轮枝菌粉剂的对照实验、一组空白对照实验。移栽时生物杀线虫剂可与有机肥等混合一次施入穴中，但涕灭威要注意不要离根部太近。旺长期在烟株附近开穴施入生物杀线虫剂。
2.4、调查方法
第一次用药调查根结病情基数，生长中期及采完最后一片叶后立即调查各处理根结病情指数、病株率及土壤中幼虫数量，计算防治效果及增产、增值效果。同时注意药害调查。分级标准按全国烟草行业烟病害调查分级标准yc/t39-1996进行。病情指数和防治效果按烟草病害药效试验方法yc/t40-1996计算。
2.5、实验结果
2.6、结果与分析
根据以上田间拨根调查病情指数结果来看，本厚垣孢轮枝菌的对烟草根结线虫的控制效果好于普通厚垣孢轮枝菌粉剂的控制效果，且厚垣孢轮枝菌可湿性粉剂的控制效果最好，其中由于黄腐酸的添加，对烟草的根腐病产生了一定的防治效果。
本具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。