专利名称：去除软体动物提取物中所含金属或类金属有害元素的方法
技术领域：
本发明涉及从生物活性提取物中去除有害元素的方法，特别是涉及一种去除软体动物提取物中所含金属或类金属有害元素的方法。
从食用水、生活用水或工业废水中除去有害元素的方法可见于多种文献。然而，对于从生物活性提取物中去除有害元素的方法的研究仍然相对缺乏。去除软体动物提取物中有害元素的方法尚未见报道。
本发明人通过大量的比较研究发现，采用常规水处理方法去除生物活性提取物中的有害元素，效果不理想。其主要原因在于，常规水处理方法对于有害元素缺乏选择性。一方面，对有害元素的清除难以达到所期望的清除水平，另一方面，营养物质或功效成分的损失量过高。
为实现上述目的，本发明提供一种去除软体动物提取物中所含金属或类金属有害元素的方法，该方法以常规方法所制备的软体动物的常规提取物或金属或类金属有害元素含量较高的其它半成品提取物为基础。这些常规方法包括匀浆法、水提取法、冻融提取法等。其中匀浆法包括在水、缓冲水溶液或水/醇溶液系统中将软体动物的软体组织充分均浆；水提取法包括低温及高温提取，如80℃恒温提取，高压和120℃下提取等；冻融法首先将软体组织进行低温冷冻，例如-15℃或更低的温度下冷冻预定时间后再解冻，重复该步骤使软体组织的细胞破裂而获得所需的提取物。这些常规方法可见于相关专业文献和著作。
本发明的要点在于，按下列主要步骤去除上述常规提取物中所含金属或类金属有害元素a、对提取物进行适当的醇/酸处理，从而将提取物分为可溶性物质与不溶物两部分。所述酸/醇处理是向提取物或提取液中加入适量的酸和醇。其中的酸包括无机酸如盐酸、硫酸等，并优选低浓度的盐酸；醇包括低级脂肪醇，优选乙醇。采用离心或静置分层的方法将这两部分分开。酸/醇处理后，有害金属或类金属元素主要被转移到可溶性组分中。适当的酸醇条件可以使不溶物中有害元素含量降低到可以接受的水平。可以对不溶物进行适当洗涤，使其pH基本恢复中性，而洗涤液合并进入可溶性组分。
b、回收可溶性组分中的醇，残留液过离子交换树脂柱，或调pH中性后过非极性吸附树脂柱，如H103型树脂柱。实验表明，合适条件下的过柱处理可以有效清除有害元素，并充分保留营养或功效成分。
c、步骤b中的流出液与常规方法所得的不溶物混合、干燥，即可获得有害元素含量水平足够低、而营养或功效成分充分保留的软体动物提取物。
步骤(a)中的酸/醇处理包括使提取物的悬浮介质中含约60％～80％的乙醇以及约0.1％～0.5％的酸，其中的酸为盐酸，其悬浮介质中含约75％的乙醇以及约0.2％的盐酸。
步骤(b)中的离子交换树脂包括强酸型阳离子交换树脂，其过柱前残留液的pH值约为3～5。
步骤(b)中的吸附树脂包括非极性吸附树脂。
本发明根据金属或类金属元素在生物体内的主要存在形式的相关理论研究成果，以含这些元素的化合物的理化性质为依据，比较多种工艺路线清除有害元素的效果，制定出一种工艺路线相对简明，效果却大大提高的新的方法，它与常规的提取生物活性物的方法相比，具有如下显著特点一、有效降低有害金属和类金属元素的含量。例如砷含量可以降低至约0.3ppm以下；铅含量可以降低到约1ppm以下；二、充分保留营养和功效成分。以匀浆法为例，最终提取物与软体组织直接干燥的重量比可达≥9∶10，即，以干物质计，其提取得率可达≥90％。
三、全部过程均在水-醇相中进行，适合工业化生产；四、除常规提取法中可能采用不同的高或低温处理获得初步提取物外，去除有害元素的所有处理步骤均在常温下进行，不仅使操作简便，也有利于保持牡蛎提取物的生物活性。
1、首先以匀浆法获得牡蛎提取物参见
图1，新鲜牡蛎软体1kg，另加500ml 1％HCl，组织匀浆机充分匀浆。将3倍量(v/v，约2000ml)95％乙醇加入该组织匀浆液中，4℃下静置过夜。倾出上清液，沉淀以90％乙醇洗涤至近中性，洗涤液与上清液合并，减压回收乙醇。残留液过强酸型阳离子交换树脂柱(732型)，收集流出液减压浓缩后与沉淀合并，喷雾干燥，得约170g浅黄色粉末。另取新鲜牡蛎软体1kg，80℃烘箱直接干燥，得干燥固体约190g。计算得率约为90％。
ICP检测Pb 0.56ppm； 原子荧光光度法检测As 0.24ppm；蛋白含量(凯氏法)49％； 多糖(硫酸-苯酚法)21％。
2、去除粉末状牡蛎水提取物中所含有害金属或类金属元素煎煮获得的牡蛎提取物1kg(喷雾干燥粉末，蛋白含量[凯氏法测定，参见《中华人民共和国药典》一部附录]37％；多糖含量[蒽酮法测定]26％；As 7.45ppm；Pb 4.82ppm[ICP法测定])，另加300ml1％HCl，和1800ml 95％乙醇，室温搅拌10min，4℃下静置过夜或室温下静置3-hr后离心(3000rpm×15min)，取出上清液，沉淀以90％乙醇洗涤至近中性，洗涤液与上清液合并，减压回收乙醇。1N NaOH调pH至中性。残留液过H103型吸附树脂柱，水洗，流出液减压浓缩后与沉淀合并，喷雾干燥，得约870g浅黄色粉末。得率约为87％。
ICP检测Pb 0.75ppm； 原子荧光光度法检测As 0.30ppm；蛋白含量(凯氏法)42％； 多糖(硫酸-苯酚法)23％。
权利要求
1.去除软体动物提取物中所含金属或类金属有害元素的方法，其特征在于，该方法包括下列步骤a、将由常规方法所制备的软体动物提取物，或将金属或类金属有害元素含量较高的其它半成品提取物进行醇/酸处理，使提取物分为可溶性物质与不溶物两部分，并采用离心或静置分层的方法将这两部分分开，使有害金属或类金属元素主要被转移到可溶性组分中；b、回收可溶性组分中的醇，残留液过离子交换树脂柱，或调pH中性后过吸附树脂柱；c、将离子交换树脂或吸附树脂柱流出液浓缩，并与步骤(a)的不溶物合并后干燥。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中的酸/醇处理包括使提取物的悬浮介质中含约60％～80％的乙醇以及约0.1％～0.5％的酸。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，其中的酸为盐酸。
4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，其悬浮介质中含约75％的乙醇以及约0.2％的盐酸。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)中的离子交换树脂包括强酸型阳离子交换树脂，其过柱前残留液的pH值约为3～5。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)中的吸附树脂包括非极性吸附树脂。
全文摘要
一种去除软体动物提取物中所含金属或类金属有害元素的方法,该方法包括下列步骤:a．将由常规方法所制备的软体动物提取物,或将金属或类金属有害元素含量较高的其它半成品提取物进行醇/酸处理,使提取物分为可溶性物质与不溶物两部分,并采用离心或静置分层的方法将这两部分分开;b．回收可溶性组分中的醇,残留液过离子交换树脂柱,或调pH中性后过吸附树脂柱;c．将离子交换树脂或吸附树脂柱流出液浓缩,并与步骤(a)的不溶物合并后干燥。本发明既能够有效清除软体动物提取物中的有害元素,同时又能够最大限度的保留相关营养或功效成分,且工艺路线相对简明,并适合工业化生产需求。
文档编号A23L1/015GK1377605SQ0113018
公开日2002年11月6日 申请日期2001年12月30日 优先权日2001年12月30日
发明者赵金华, 康晖, 李靖 申请人:深圳海王药业有限公司