专利名称：细菌培养基及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种细菌培养基及其制备方法，特别是一种以营养琼脂培养基为基础培养基的细菌培养基及其制备方法。
背景技术：
目前，现有技术中细菌培养基大部分以琼脂为基质，并添加一些细菌生长所需的营养物，然后在无菌实验室中按照严格的无菌操作程序对细菌进行培养、观察与测定。上述背景技术中存在着检测程序繁琐、不能直接观察和计算测定结果的缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种易于观察菌落情况，同时避免培养基失水、影响测定结果的细菌培养基及其制备方法。
本发明的整体构思是它以营养琼脂培养基为基础培养基，基础培养基中还添加有保水剂和染色剂，其中，营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂的重量比为36-40∶1000∶0.1-5∶0.01-0.1。
细菌培养基的制备方法，包括下面的步骤a、先将营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂按36-40∶1000∶0.1-5∶0.01-0.1的重量比称重后，分开放置；b、将称量好的营养琼脂和水混合制备营养琼脂培养基；c、向上述步骤中制备好的营养琼脂培养基中加入称量好的保水剂；d、对c步骤中制备的含保水剂的培养基进行灭菌；e、将已称量的染色剂灭菌后，加入d步骤制备的培养基中，即制成细菌培养基。
本发明的其他构思是细菌培养基中营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂的重量比为36-40∶1000∶0.1-1∶0.01-0.1。
保水剂可选用淀粉接枝共聚丙烯酸(盐)超强吸水剂、改性纤维素类高吸水树脂、 丙烯衍生物和无机物等复合成高吸水树脂，染色剂可选用石碳酸复红、刚果红、石碳酸马尾藻红、结晶紫、甲基兰、红四氮唑。
制备细菌培养基时，将营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂按36-40∶1000∶0.1-1∶0.01-0.1的重量比称量。
将营养琼脂与水混合放置8-12分钟，然后加温，使营养琼脂充分溶解。
加入保水剂时，先将保水剂粉碎成80-100目的颗粒后再添加到营养琼脂培养基中，搅拌8-12分钟。
对含有保水剂的培养基灭菌时，采用高压灭菌12-18分钟，压强，温度115-230℃。
向含保水剂的培养基中添加染色剂时，先将染色剂配制成5％水溶液后灭菌，再加入含保水剂的营养琼脂培养基。
本发明取得的技术进步在于细菌培养基中的保水剂可维持培养基的水分，避免培养基因失水干燥影响测定结果的准确性；染色剂可将大部分菌落染成红色或粉红色，便于观察检测结果；同时它的制备方法工艺设计合理、操作简单方便。
具体实施例方式
以下对本发明的实施例做进一步的描述本实施例中，细菌培养基以营养琼脂培养基(GB4789.28-1994)为基础培养基，基础培养基中还添加有保水剂和染色剂，其中，营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂的重量比为38∶1000∶3∶0.01。
制备细菌培养基时，应按照下面的步骤a、制备营养琼脂培养基；b、将制备好的营养琼脂培养基∶水∶保水剂∶染色剂按38∶1000∶3∶0.01的重量比称重后，分开放置；c、将称量好的营养琼脂培养基和水混合，放置10分钟后，隔石棉铁丝网微火煮沸，使完全溶解；d、将保水剂粉碎成100目的颗粒后，添加到上述步骤中制备好的营养琼脂培养基中，搅拌10分钟；e、对d步骤中制备的含保水剂的培养基，采用高压灭菌15分钟，压强1.385×105Pa，温度125℃。
f、将称量好的染色剂配制成5％水溶液后灭菌，加入e步骤中制备的含保水剂的培养基中，即得到细菌培养基。
保水剂可选用北京理工大学生产的改性纤维素类高吸水树脂，染色剂可选用石碳酸复红。
本发明所制备的细菌培养基可置于检测板、平面培养皿或其它培养基载体。
权利要求
1.一种细菌培养基，它以营养琼脂培养基为基础培养基，其特征在于基础培养基中还添加有保水剂和染色剂，其中，营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂的重量比为36-40∶1000∶0.1-5∶0.01-0.1。
2.根据权利要求1所述的细菌培养基，其特征在于营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂的重量比为36-40∶1000∶0.01-1∶0.01-0.1。
3.根据权利要求1或2所述的细菌培养基，其特征在于保水剂可选用淀粉接枝共聚丙烯酸(盐)超强吸水剂、改性纤维素类高吸水树脂、丙烯衍生物和无机物等复合成高吸水树脂，染色剂可选用石碳酸复红、刚果红、石碳酸马尾藻红、结晶紫、甲基兰、红四氮唑。
4.根据权利要求1所述的细菌培养基的制备方法，其特征在于它包括下面的步骤a、先将营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂按36-40∶1000∶0.1-5∶0.01-0.1的重量比称重后，分开放置；b、将称量好的营养琼脂和水混合制备营养琼脂培养基；c、向上述步骤中制备好的营养琼脂培养基中加入称量好的保水剂；d、对c步骤中制备的含保水剂的培养基进行灭菌；e、将已称量的染色剂灭菌后，加入d步骤制备的培养基中，即制成细菌培养基。
5.根据权利要求4所述的细菌培养基的制备方法，其特征在于将营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂按36-40∶1000∶0.1-1∶0.01-0.1的重量比称量。
6.根据权利要求4所述的细菌培养基的制备方法，其特征在于先将营养琼脂与水混合放置8-12分钟，然后加温，使营养琼脂充分溶解。
7.根据权利要求4所述的细菌培养基的制备方法，其特征在于加入保水剂时，先将保水剂粉碎成80-100目的颗粒后再添加到营养琼脂培养基中，搅拌8-12分钟。
8.根据权利要求4所述的细菌培养基的制备方法，其特征在于对含有保水剂的培养基灭菌时，采用高压灭菌12-18分钟，压强，温度115-230℃。
9.根据权利要求4所述的细菌培养基的制备方法，其特征在于向含保水剂的培养基中添加染色剂时，先将染色剂配制成5％水溶液后灭菌，再加入含保水剂的营养琼脂培养基。
全文摘要
本发明涉及一种细菌培养基及其制备方法，特别是一种以营养琼脂培养基为基础培养基的细菌培养基及其制备方法。它以营养琼脂培养基为基础培养基，在基础培养基中添加有保水剂和染色剂，营养琼脂∶水∶保水剂∶染色剂的重量比为36－40∶1000∶0.1－5∶0.01－0.1；制备时将按重量比称量好的上述各组分混合、灭菌。它克服了现有技术中不易观察和计算测定结果、检测程序繁琐的缺点，具有维持培养基水分、便于观察检测结果，制备方法工艺设计合理、操作简单方便的特点。
文档编号C12N1/20GK1557943SQ20041001213
公开日2004年12月29日 申请日期2004年1月29日 优先权日2004年1月29日
发明者胡常英, 马清河, 马允莉, 付丽萍, 王洁, 孙淑琴 申请人:胡常英