含乳清蛋白、来自乳的抗体或抗体的功能性组合物或食品的制作方法

专利名称：含乳清蛋白、来自乳的抗体或抗体的功能性组合物或食品的制作方法
技术领域：
本发明涉及含乳清蛋白、来自乳的抗体或抗体的功能性组合物或食品。
背景技术：
类风湿性关节炎是始于手或足的关节发红、疼痛、肿胀，进展为关节的破坏、变形，直到伴随疼痛出现关节功能麻痹的炎症性关节疾病。在其药物疗法中，为了消炎，实施了将肾上腺皮质激素药、免疫抑制剂、酸性抗炎剂、有机金化合物、抗细胞因子抗体等药剂组合进行的治疗。这些药物疗法均为所谓的对症疗法。
类风湿性关节炎的病因尚不明了，目前正在开展基于自身免疫与作为关节软骨主要成分的II型胶原的相关的学说的研究。
饮食中有许多抗原物质，但通常经口摄取时不产生相对于这些抗原的抗体。该现象称为口服免疫耐受。
抗体产生通过对抗体产生起促进作用的淋巴细胞(辅助性T细胞，Th)和起抑制作用的淋巴细胞(抑制性T细胞，Ts)进行调节。抑制性T细胞为优势的状态时，抗体生成受到抑制，因此为了抑制II型胶原的自身抗体的产生，正在尝试以活化II型胶原的抑制性T细胞为目的，给予动物由来的来自II型胶原的肽、II型胶原的改性物。作为其例子，例如有JP-A 07-138187、JP-A 09-059176、JP-A 09-255581，这些均为以口服免疫耐受为目的的现有技术。
本发明人等为了有助于类风湿性关节炎的预防、治疗，进行了病因的解析。基于以下假说，对类风湿性关节炎的病因开始了研究内在要因是患者的体质；遗传要因是类风湿性关节炎患者中有口服免疫破绽；外在要因是饮食中的来自不同种动物的II型胶原、以及细菌内毒素从肠道的吸收。
口服免疫的破锭为以下状态。可以认为对于经口摄取的抗原，口服免疫耐受为正常的免疫应答，但由于内因的、体质的、环境的要因，不能诱导正常的免疫耐受，产生了自身抗体。为了验证该假说，使用小鼠，对有关小鼠的胶原性关节炎，进行了类似抗原和细菌内毒素的关节炎诱发活性的研究。DBA/1系小鼠为具有容易发生II型胶原关节炎的具有遗传性状的小鼠。若将来自鸡的II型胶原、或经热改性的II型胶原经口给予该小鼠，则在小鼠的血液中产生小鼠的II型胶原的抗体，同时关节炎发病。该关节炎在结合应用细菌内毒素(也称脂聚糖或LPS)时加重。另外即使去除来自鸡的II型胶原，仅长期给予细菌内毒素也诱发了关节炎(K.Terato等.Br.J.Rheum.35，828-838，1996)。
这些结果显示类风湿性关节炎的发病与II型胶原的抗体，同时与细菌内毒素引起的免疫系统的非特异性活化或疲惫相关联，并且有口服免疫耐受不成立的情况。该实验显示对上述JP-A 07-138187、JP-A 09-059176、JP-A 09-255581中所示的试图调节为免疫耐受的热改性II型胶原也有不能诱导免疫耐受的情况。
消化道免疫是免疫的第一线，全身免疫的百分之七十集中在消化道。如果能强化消化道免疫，则全身免疫系统也可以得到强化。如果免疫系统被强化，消化道中分泌的抗体量增多，可以防止有害菌的增殖，肠内环境良好，即显示出整肠作用。而且，如果肠内环境良好，则可以活化消化道免疫。这样，免疫调节作用与整肠作用相关，通过使它们分别提高、良性循环，可以使身体更健康。
即使抗体在机体内产生，但随着年龄的增加产生量减少，因此高龄者的免疫功能降低。另外，由于应激反应或使用具有免疫抑制作用的药品也使抗体产生降低。
通过摄取来自乳的抗体，可以提高免疫系统的第一线——消化道免疫，可以期待增进健康，疾病的早日恢复，健康长寿。例如，有人报道了通过使人、动物摄取来自乳的抗体，对消化道内因病原菌或病毒引起的疾病的治疗和预防有效、或者保持消化道内的微生物平衡、有利于增进健康(Korhonen H等.Bovine milk antibodies forhealth，British J.Nutrition，84，suppl.1，S135-S146(2000))。另外，已知消化道中寄生大肠杆菌以外的革兰阴性菌，作为革兰阴性菌的菌体成分——内毒素(endotoxin)转移到体内，会出现内毒素性休克或血栓形成等重症的病态，但有人报道通过在外科手术之前摄取来自乳的抗体，该抗体可以使内毒素的毒性无害化，防止因内毒素引起的伤害(Bolke E，等.Shock 17，9-12(2002))。
成人中，消化道、呼吸器官等粘膜中分泌的抗体的合成速度是每1kg体重为24mg/日(ウイリアムE.ポ-ル编/多田富雄监译、基础免疫学(东京大学出版会)1986年，上181页)，成人消化道内每日分泌约1000mg，因此为了使疾病快速恢复、增进健康，优选摄取补充该量的几成的抗体。
通常，从外部给予抗体而成立的免疫称为被动免疫，在机体内产生抗体而成立的免疫称为主动免疫。上述的抗体摄取相当于被动免疫。
另一方面，以往的免疫活化物质是使主动免疫活化的物质。例如，已知落叶松蕈、桑黄、冬菇、平菇、光帽鳞伞蘑菇、松蘑等所谓的菇类或面包酵母、啤酒酵母、圆酵母等酵母类含有β-葡聚糖，显示其作用。另外，酵母中也有含有大量谷胱甘肽的酵母，谷胱甘肽也具有免疫活化作用。乳酸菌、双歧杆菌、纳豆菌等细菌类作为益生菌直接摄取活菌，则具有免疫活化作用或整肠作用。并且，即使细菌类作为灭活菌摄取也看到同样的作用，作为其有效成分，已知有细胞壁和其构成成分的肽聚糖等。本发明人等已经公布了通过酶分解细胞壁，可以进一步增强免疫活化作用(JP-A 2000-4830号、JP-A 2000-210050)。本发明人等还公布了通过口服来自细菌的DNA(脱氧核糖核酸)也具有免疫活化作用(JP-A 2000-262247)。
但是，这些菌类因摄取方法不同其效果有很大不同，而且，个体之间的效果差异大。还已知谷胱甘肽、乳铁蛋白等也具有免疫活化作用，但其效果不能令人充分满足。也发现将多种免疫活化物质组合使用的情况，因均为活化主动免疫的组合，摄取者自身抗体产生有一定极限，因此不能实现大的协同效果。特别是摄取者为高龄者时，自身的抗体产生能力变弱，因此难以得到效果。为此，强烈希望有具有更强的免疫调节作用或整肠作用的功能性组合物出现。
已知乳酸菌或双歧杆菌具有整肠作用、降低血中胆固醇的作用、降压作用、抗癌作用等，同时具有免疫活化作用(高野俊明等，乳酸菌的科学与技术，311-334页，1996年，学会出版中心)，通过在食品中至少含有107/g以上可以期待免疫活化作用。通过使乳酸菌或/和双歧杆菌在食品中含有107/g以上，还可以看到抑制其它杂菌、特别是食物中毒菌的增殖的效果。
含有乳酸菌、双歧杆菌的食品包括以酸乳酪为首的多种食品，但是使乳酸菌、双歧杆菌所具有的功能与抗体所具有的功能组合的食品还是未知的。
乳清蛋白的氨基酸序列接近于人乳，营养价值丰富、包含全部必须氨基酸、吸收率非常好，而且支链氨基酸的含有率也高，因此作为用于补充蛋白质的营养辅助食品，主要针对体育选手或运动负荷高的人，已实现商品化。但是，乳清蛋白有风味上的问题(JP-A2003-23963)，这些商品中也大多残留因乳清蛋白而引起奶臭或涩味、收敛味。因此，也有施加香草等风味来改善风味、容易摄取的商品，这些商品也只是遮蔽了强烈的风味，仍然残留乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味。而且，乳清蛋白添加到水、牛乳等中时吸水性差，容易成为“面疙瘩”状态。
成人消化道中每日分泌超过1000mg的免疫抗体，但中年过后随着年龄的增加抗体的分泌量减少，因此就高龄者而言摄取含抗体的乳清蛋白来补充抗体，这对维持健康非常有益。但是，高龄者可以每日美味摄取的使用乳清蛋白的食品还未商品化。
就降低乳臭而言，例如有人提出了以下的方法JP-A 11-178506中，用于改良粉乳类或由粉乳类制备的饮料食物的风味而添加二氢查尔酮的方法；JP-A 2002-2531413、JP-A 2002-2531644中，添加磷酸化糖、磷酸化低聚糖或它们的无机化合物来提高含乳、粉乳的食品的乳感的方法；JP-A 2002-335903中，为了改善含乳类的饮料食物的味质而添加β-葡糖低聚糖的方法；JP-A 2003-210119中，为了抑制奶或动物性蛋白质的臭气而添加绿原酸的方法，它们使乳臭降低，最终改善为接近于牛乳的香味。
另外，作为降低涩味的方法，有人提出了添加α-结合半乳糖低聚糖的方法(JP-A 2003-250486)，其主要降低果汁、咖啡、啤酒的涩味、苦味，没有涉及来自乳清蛋白的涩味。
即使在乳制品中，从乳清蛋白的制备步骤中推定、抗体转移可以期待提高其含量。但是，就抗体相对于全部乳清蛋白的比率为10％(桑田有，月刊フ-ドケミカル7(2)，68-77(1991)，为蛋白质含量80％质量的WPC时，总量不失活地转移，则WPC中含有8.0％质量)，市售的乳清蛋白几乎不包含抗体。对于市售的乳清蛋白、WPC(乳清蛋白浓缩物、蛋白含量80％质量)、WPI(乳清蛋白分离物、蛋白含量90％质量)中的抗体含量，WPC中最大为5.5％质量、WPI中最大为2.4％质量，制造步骤中抗体的30％以上热灭活。另外，市场上有含有10％质量以上抗体的IgG浓缩乳清蛋白销售，这是通过色谱装置由乳清蛋白进一步将抗体组分分离，虽然装置规模大，但是单位时间可处理的量少，因此非常昂贵。如果仅使用现有的WPC或WPI的制造设备即可以制备比抗体含量以往的乳清蛋白高的物质，则容易享受上述的抗体所带来的功能。
大部分来自乳的粉末蛋白即使分散、溶解于水中，也容易在水中成“团”，难以均匀分散。即，容易产生“面疙瘩”，为难分散性，使其均匀分散需要较强的、长时间的搅拌。
作为改善水分散性的方法，有人提出了将难分散性食品在单糖类、二糖类或糖醇的水溶液中练合，或者喷雾后进行干燥，使这些糖类在表面被覆的方法(JP-A 61-134319)，但被覆上述糖液则需要长时间干燥。这些糖类为吸湿性强的物质，有保存上不优选等各种的课题。
还有人提出了在难分散性食品中混合粒径为149μm筛下的赤藓糖醇结晶，改善水分散性的方法(JP-A 11-18698)，这样的微粉赤藓糖醇容易产生结块，难以操作，分散性的改善效果也不十分令人满意。JP-A 11-123053中记载了制备与糖醇粉末的粉体混合物，可以改良乳清蛋白的分散溶解性，但该混合物的分散性改善效果也不充分。
附图简述

图1为按照不同个体表示实施例3-2的效果试验中的感官评价的评价分数的图表。
图2为表示糖的添加时间(1～9(图2中，带圆圈的数字))的乳清蛋白制造步骤的作业流程图。WPC乳清蛋白浓缩物，WPI乳清蛋白分离物，RC乳清酪素乳清，UF超滤法，IX离子交换法，MF精密过滤法。
图3为表示在鲜乳中添加0～8％质量乳糖，在65℃下经30分钟加热时的抗体残存率的图表。
图4为表示本发明的功能性组合物对实施例7-8中进行的IL-12产生的影响的图表。
图5为表示实施例10-1、比较例10-1、比较例10-2中测定的粪便中双歧杆菌菌数和产气荚膜梭状芽孢杆菌菌数的图表。
图6为表示在食品中添加乳清蛋白，在60～72℃下经30分钟加热时的各食品中的抗体残存率的图表。
图7为表示在牛乳中添加乳清蛋白和蔗糖，在60～80℃下经30分钟加热时的抗体残存率的图表。
图8为表示在牛乳中添加乳清蛋白和赤藓糖醇，在60～80℃下经30分钟加热时的抗体残存率的图表。

发明内容
本发明提供含乳清蛋白、来自乳的抗体或抗体的功能性组合物或食品。包含以下发明方案。
本发明提供含有抗体和免疫活化物质作为有效成分的功能性组合物(发明方案7)。
本发明提供具有抗类风湿作用的抗体作为有效成分的类风湿性关节炎治疗剂组合物(发明方案6)。
本发明提供含有抗体的发酵食品的制备方法，其特征在于该方法无需将牛或牛以外的哺乳动物的鲜乳加热至63℃以上，在上述鲜乳中添加乳酸菌或双歧杆菌的一种或两种以上，使之发酵(发明方案11)。
本发明提供含有抗体的食品，其特征在于该食品含有1.5mg/g以上抗体和107/g以上选自乳酸菌和双歧杆菌的一种或两种以上的菌(发明方案12)。
本发明提供含有抗体的明确的食品，其特征在于该食品含有1.5mg/g以上来自乳的抗体，但是，不含107/g以上乳酸菌和双歧杆菌类(发明方案13)。
本发明提供乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白与糖、可可粉末、粉末状非凝固性不溶物、抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末或番茄粉末(发明方案4、9、15、1、2)。
本发明提供便臭改善剂，其特征在于该改善剂含有乳清蛋白(发明方案3)。
本发明提供水分散性优异的蛋白质组合物，其特征在于该组合物含有来自乳的粉末或颗粒状蛋白质以及粉末状非凝固性不溶物(发明方案8)。
本发明提供乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白、低聚糖和水溶性食物纤维(发明方案10)。
本发明提供乳清蛋白的制备方法，其特征在于通过在乳清蛋白的制备步骤中至少一个步骤添加糖，提高抗体的残存率(发明方案14)。
发明的详细说明以上说明本发明方案。各发明方案中公开的材料也可以用于其它的发明方案中。
发明方案6本发明的课题在于提供对类风湿性关节炎具有预防、治疗和复发预防功能的组合物。
本发明人等为了解决上述课题进行了深入的研究，结果发现分别将II型胶原、革兰阴性肠内细菌灭活菌体或者它们的混合物制成菌苗，免疫牛、山羊、绵羊、鸡，使其产生抗体，对于牛、山羊、绵羊该抗体以乳的形式分泌，对于鸡，以鸡卵黄抗体的形式分泌，通过将这些抗体制成食品或药品的组合物可以实现课题，从而完成本发明。即，发现通过摄取含有这些抗体的食品或药品，使来自食品的II型胶原、由口腔或肠内的细菌产生的内毒素分别与对应的抗体反应，使之失活或者可以防止从消化道吸收，结果发现可预防类风湿性关节炎、或者改善病情、对治疗有益，从而完成本发明。
即，本发明如下。
1)以具有抗类风湿作用的抗体为有效成分的类风湿性关节炎治疗剂组合物；
2)上述1)的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中具有抗类风湿作用的抗体为抗II型胶原抗体；3)权利要求9的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中抗II型胶原抗体为抗鸡II型胶原抗体、抗牛II型胶原抗体、抗猪II型胶原抗体至少其中之一；4)权利要求8的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中具有抗类风湿作用的抗体为抗细菌内毒素抗体；5)权利要求8的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中具有抗类风湿作用的抗体为将抗II型胶原抗体和抗细菌内毒素抗体以任意比例进行混合所得；和6)权利要求8的类风湿性关节炎治疗剂组合物，该组合物含有抗II型胶原抗体和抗细菌内毒素抗体的至少其中之一，总抗体量含有0.1％质量以上。
本发明可以提供类风湿性关节炎治疗剂组合物，该组合物以含有该组合物的食品或药物等形式摄取，使组合物中的抗体与来自食品的II型胶原、由口腔或肠内的细菌产生的毒素反应，可抑制关节炎的发病，用于预防或治疗类风湿性关节炎。
本发明中，将类风湿性关节炎的要因之一—上述判明的两种抗原接种家畜动物进行免疫，从家畜的乳、卵或血液中分离产生的这些抗原的抗体，将所得抗体制成用于食品或药品的组合物。以下，逐项加以说明。
1.免疫所用的抗原本发明中，优选使用动物的II型胶原和革兰阴性菌或其内毒素(LPS)作为抗原。
1)牛、猪和鸡的II型胶原可以使用市售品(Chondrex公司)。抗原可以单独也可以混合使用，将鸡、牛、猪的II型胶原以任意组合的方式混合的混合疫苗有效而且经济。
2)在为了产生细菌内毒素的抗体而进行的免疫中，所用的抗原是人体寄生性革兰阴性菌，为相当于以下所示属的细菌。即，将下述细菌的福尔马林处理或加热灭活菌制成灭活菌疫苗，所述细菌有梭杆菌属(Fusobacterium)、韦永氏球菌属(Veillonella)、巨球形菌属(Megasphaera)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、莫拉氏菌属(Moraxella)、布兰汉氏球菌属(Branhamella)、不动杆菌属(Acinetobacter)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)、大肠杆菌属(Escherichia)、哈夫尼菌属(Hafnia)、克雷白氏杆菌属(Klebsiella)、摩根氏菌属(Morganella)、变形菌属(Proteus)、普罗威登斯菌属(Providencia)、沙门氏菌属(Salmonella)、沙雷氏菌属(Serratia)、志贺氏菌属(Shigella)、耶尔森氏菌属(Yersinia)、弧菌属(Vibrio)、气单胞菌属(Aeromonas)、邻单胞菌属(Plesiomonas)、嗜血杆菌属(Haemophillus)、巴斯德氏菌属(Pasteurella)、绿脓杆菌(Pseudomonas)、军团菌属(Legionella)等。疫苗可以是单独也可以是混合疫苗，混合疫苗效率高。细菌的培养可以是专业书中记载的常规方法。
3)动物与微生物共生，在各动物种类的消化道中存在各动物所固有的微生物的同时，也由于人共通的微生物生存，它们成为抗原，动物产生抗体并保有。它们被称为自然抗体。与人共通的革兰阴性菌的内毒素抗体也以自然抗体的形式存在，因此可以使用这些动物。
2.动物的选择通常，已知对于自身或同种的抗原，即使注射，动物也不会产生抗体。而且，产生抗体的量，因抗原与免疫动物种的种差异间隔越大则有大幅度增多的倾向。因此，例如制备牛II型胶原的抗体，优选用牛II型胶原免疫鸡，以鸡卵卵黄抗体的形式回收。制备鸡II型胶原的抗体，则用鸡II型胶原免疫牛，可以在乳汁或血清中得到抗体。如此，对于用II型胶原免疫的动物，接种来自不同种的II型胶原。如果来自不同种，则可将多种胶原混合，制成混合疫苗注射，这不仅效率高而且经济。
因为细菌成分对所用的动物来说都具有抗原性，可以将它们作为疫苗，混合并免疫注射。
3.抗原接种方法使动物即乳牛、乳山羊、绵羊、鸡的摄取方法，抗原均可以是水溶液或悬浮液，优选胶原这样的蛋白性抗原与各种免疫佐剂混合给予。每次的免疫是将蛋白干燥重量10～1000μg溶解或悬浮成0.1～10ml，使用等容量的弗罗因德完全佐剂和不完全佐剂、TiterMax Gold或Ribi Adjuvant R-730等，以油包水型乳液的形式，分为皮内、皮下、肌肉内1处至10处，每处注射0.1～10ml。实施每周一次或两个月一次注射。
制备内毒素的抗体是将0.1～10ml的0.01％～10％湿重的一种灭活菌液乃至多种灭活菌液的混合物按照1～4周一次给予皮内、肌肉内、皮下或静脉内。也可以将内毒素的抗体的制备与佐剂一起通过免疫进行。灭活菌液中使用弗罗因德完全佐剂和不完全佐剂、TiterMaxGold或Ribi Adjuvant R-730等，以油包水型乳液的形式，分为皮内、皮下、肌肉内1处乃至10处进行注射。实施每周一次或两个月一次注射。
4.抗体的采集1)乳汁抗体的采集利用通常的方法，用手或挤乳机挤乳。
因为抗体在超过72℃的加热下失活，所以在最终制品之前要避免过度的加热。鲜乳的灭菌适合在72℃以下的处理、紫外线照射灭菌或放射线照射灭菌。乳汁可通过离心除去脂肪，喷雾干燥，制备脱脂乳；或除去脂肪后加入盐酸，pH值调节为4.6，将析出的酪蛋白过滤除去，再通过超滤除去乳糖、矿物质等低分子成分，制备乳清；或再通过超滤除去乳清蛋白、乳球蛋白，将得到的以抗体蛋白为主的组分等进行低温喷雾干燥或冷冻干燥，制成抗体含量从0.1％水平至约含有90％的粉末状抗体组合物。通常从除去了初乳的1吨牛鲜乳中可以得到10～100g、平均30g的总抗体。另外，还可以使用含有抗体的市售乳清、乳清蛋白浓缩物(WPC)、乳清蛋白分离物(WPI)。
2)血清抗体的采集免疫动物的血液中抗体含量高，是优异的原料。
将采集的血液离心，制备血清，然后用硫酸铵1/3饱和沉淀，过滤采集γ-球蛋白组分，溶解于水，然后脱盐，低温喷雾干燥或冷冻干燥，制备粉末。通常抗体含量70～90％、由1kg血液可以得到总抗体约15g。
3)鸡卵抗体的采集使用GIT试剂盒[コスモバイオ(株)]，利用免疫鸡卵的卵黄，通常由1kg鸡卵可以得到0.9～1.5g纯度90％的IgY抗体。将抗体溶液低温喷雾干燥或冷冻干燥，制备粉末。
5.抗体的定量方法对于抗体的量，可以采用以下的两种方法测定与抗体的抗原特异性没有关系地测定总抗体量的方法；和作为相对于各抗原的抗体量的测定方法，通过ELISA法(Fujii K，等.J Immunol Methods 198912463-70)的测定方法。
1)总抗体量的测定蛋白G柱作为用于高效纯化抗体的抗体纯化用亲和柱在市场上销售(アマシヤムバイオサイエンス等)。使含有抗体的溶液以中性附近的pH过柱，则可以接近100％吸附抗体。洗涤柱后，用pH值为2.5～2.8的酸性溶液冲洗，抗体由柱游离、回收。由于1％抗体溶液的紫外线波长280nm的吸光度没有种类差异，均为约14，因此可以通过吸光度求出抗体的量。
2)总IgY的测定使用市售的卵黄抗体的吸附柱(HiTrap IgY Purification HP，アマシヤムバイオサイエンス)可以容易地定量。用含有0.5M硫酸钾的20mM磷酸缓冲液(pH7.5)使含抗体液吸附，用同液洗涤后，用20mM磷酸缓冲液(pH7.5)洗脱，利用吸光度算出回收的IgY抗体。
3)通过ELISA法测定亲和纯化的特异性抗体使胶原和细菌内毒素(LPS)与アクテイゲル(ステロジ-ン)或CNBr活化(琼脂糖アマシヤムバイオサイエン)共价结合，用作抗体纯化用的抗原亲和柱。将纯化的抗体溶液过柱，仅使目的抗体吸附于柱，用中性缓冲剂冲洗不吸附于柱的免疫球蛋白等。用pH2.8的0.1M甘氨酸缓冲液洗脱与柱结合的抗体。将洗脱抗体再过蛋白G柱，以纯化的抗体作为标准品，通过ELISA(酶联免疫测定法)制作校准曲线、进行定量。各抗原孔的致敏条件、封闭溶液记载如下。
·抗胶原抗体的ELISA测定用0.15M磷酸钾缓冲液(pH7.2)稀释胶原，使其浓度为10μg/ml，取50μl该稀释液加入到ELISA板孔中，4℃过夜进行包被。封闭是将0.05M TRIS、0.15M NaCl加入到56℃、经30分钟加热的兔血清中，pH值调节至7.8，将该液作为封闭液。抗体测定检体的稀释也使用该封闭液。
·抗细菌内毒素抗体的ELISA测定将用三氯乙酸从革兰阴性菌菌体萃取的LPS加入到pH9.5的0.05M碳酸缓冲液中，制备分别含有5μg/ml浓度的溶液，包被ELISA平板孔。利用含0.1％牛血清白蛋白的磷酸缓冲生理盐水进行封闭。
抗体量按照专业书，分别使过氧化物酶标记的抗牛抗体、抗山羊抗体、抗绵羊抗体、抗IgY抗体反应，OPD作为底物显色，测定吸光度，通过使用抗体的标准品制作的校准曲线求出总抗体量或特异抗体量。
6.含抗体组合物的制备可以将含有抗革兰阴性菌内毒素的抗体的调整物与用II型胶原免疫的含抗体调整物的单独或两者混合，制备含抗体组合物。根据需要，还可以加入含抗体调整物以外的食品材料、赋型剂，制备食品、药品。优选最终制品的总抗体含量优选为1％以上。
发明方案7本发明的课题在于提供具有更强的免疫调节作用，具有更强的整肠作用的功能性组合物。
本发明人等进行深入研究的结果发现，通过将抗体与免疫活化物质混合，同时摄取，即通过使被动免疫物质与主动免疫活化物质组合与分别单独摄取相比，可以获得更强的免疫调节作用和整肠作用，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)含有抗体和免疫活化物质作为有效成分的功能性组合物；2)权利要求8的功能性组合物，其中抗体为来自乳的抗体；3)权利要求8或9的功能性组合物，其中免疫活化物质为乳酸菌、双歧杆菌以外的不产生毒素的细菌的菌体或菌体成分；4)权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为霉菌·酵母的菌体或菌体成分；5)权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为菇类的菌体或菌体成分；6)权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为选自细菌、霉菌·酵母和菇类的菌类的菌体的酶解物；和7)权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为SOD(超氧化物歧化酶)。
本发明通过将抗体与免疫活化物质混合，同时摄取，可以获得更强的免疫调节作用和整肠作用。免疫活化物质使消化道的主动免疫活性化，而抗体在消化道中以被动免疫的形式发挥作用，因此同时摄取该两者则表达强的免疫调节作用和整肠作用。
具体而言，抗体的摄取，即通过消化道内的被动免疫减少有害菌，可以改善肠内环境，另外，同时摄取的免疫活化物质容易发挥功能，与单独摄取免疫活化物质相比，免疫活化的效果更大。而且，免疫体系的Th1/Th2平衡中，Th1更占优势，使掌管免疫系统的巨噬细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)或杀伤细胞(CTL细胞)活化，增强白介素12(IL-12)或干扰素γ(IFN-γ)的产生，如此，可以改善全身的免疫功能。
本发明中，作为抗体可以使用来自卵、来自血清等的抗体，优选使用可容易获得的来自乳的抗体。因为乳清蛋白中高浓度含有来自乳的抗体，可以直接用作本发明的抗体。乳清蛋白可以使用通常的市售品，即乳清蛋白浓缩物(WPC)、乳清蛋白分离物(WPI)、脱盐乳清粉等，但优选抗体含量高的。关于从乳清中分离乳清蛋白的方法可以采用各种的方法，还可以使用超滤法、微量过滤法、交叉流微量过滤法、离子交换法等任意一种方法。
作为乳清蛋白原料的乳可以是牛、山羊、绵羊、马、水牛等任一种哺乳动物的乳，该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采取的乳、也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采取的乳。
本发明中，作为与抗体结合使用的免疫活化物质包含公知的免疫活化物质的任意物质，例如优选乳酸菌、双歧杆菌以外的不产生毒素的细菌类、霉菌·酵母类、菇类的菌体或菌体成分、选自细菌、霉菌·酵母和菇类的菌类的菌体酶分解物与SOD。
乳酸菌、双歧杆菌以外的不产生毒素的细菌为乳酸菌、双歧杆菌以外的细菌，只要是不产生毒素的菌即可，可以使用任一种细菌。例如，可以使用纳豆菌(纳豆芽孢杆菌(Bcaillus natto))、氨基酸生产菌(棒状杆菌属(Corynebacterium)、短杆菌属(Brevibacterium)、微杆菌属(Microbacterium))等。这些细菌类可以使用鲜菌、灭活菌、干燥物或有效成分的萃取液、其干燥物等。
霉菌·酵母类只要能食用可以使用任一种霉菌·酵母。例如可以是啤酒酵母、面包酵母、圆酵母、黑酵母、海洋性酵母、米曲霉、淀粉杆菌等。可以使用它们的干燥物或萃取液或者萃取液的干燥物，还可以使用它们的酵母培养液、培养液的萃取液、其干燥物等。
菇类只要能食用即可，可以使用任一种菇。例如可以是落叶松蕈、桑黄、猴头菇、裂褶菌、杂色革盖菌、葡萄状枝瑚菌、卷缩绣球菌、蛹虫草、蜜黄色假蜜环菌、松蘑、灰树花、小松蘑、冬虫夏草、灵芝、鹿角灵芝、平盖灵芝、桦褐孔菌(チヤ-ガ)、香菇、冬菇、光帽鳞伞蘑菇、聚生离褶伞、黑木耳、白黑木耳、刺芹侧耳、白黑拟牛肝菌等。可以使用含有这些菇类的子实体或菌丝体的菌体干燥物或萃取液或者萃取液的干燥物等。
可以使用上述的细菌、霉菌·酵母类、菇类的菌体的酶分解物。酶可以使用任一种的酶，优选将溶菌酶等糖苷酶型酶与菠萝蛋白酶等肽链内切酶型蛋白质分解酶组合使用。
作为SOD可以使用来自植物、来自动物、来自微生物等任一种的SOD。其中作为SOD，使用醇溶谷蛋白处理SOD(US-B6045809)，口服时，比未处理的SOD显示出更强的免疫活化作用，因此更优选。
作为其它的免疫活化物质还可以使用谷胱甘肽、溶菌酶、菠萝蛋白酶等蛋白质分解酶、乳铁蛋白、墨角藻糖胶、酪蛋白分解物、维生素A、维生素C、维生素E、维生素B类、类胡萝卜素、矿物质(铁、锌、硒)、辅酶Q10、α-硫辛酸、蜂巢蜡胶、蜂皇浆、牛磺酸、葡糖胺、薏米仁提取物、罗汉果提取物、甘草亭酸、猫爪草(Cats Claw)、紫锥菊、锯叶棕榈果、碧萝芷(Pycnogenol)、儿茶酸、葡萄籽萃取物等多酚，小球藻、螺旋藻等藻类，来自谷物(大麦、燕麦、薏米仁等)的β-葡聚糖等。可以使用它们的市售品。
还可以使用葡萄籽萃取物的酚化合物或多酚、来自橄榄的酚化合物或多酚作为免疫活化物质。
本发明中，作为功能性素材，可以添加下述物质天冬氨酸、精氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸、胆碱、茶氨酸、磷脂酰丝氨酸、辅酶Q、芦丁、叶黄素、虾青素、维生素D、维生素K、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十八烷醇、葡糖酸、银杏叶萃取物、橄榄、蛇麻草萃取物、大豆异黄酮、n-3不饱和脂肪酸、n-6不饱和脂肪酸、n-9不饱和脂肪酸、ケ-ル、大麦嫩叶等。
本发明中，对抗体与免疫活化物质的混合方法没有限定，而且，对组合物的形状也没有限定。
抗体优选在功能性组合物中含有10mg/g以上，更优选含有10mg/g～300mg/g。免疫活化物质优选在功能性组合物中含有1％质量以上，更优选含有1％质量～95％质量。
发明方案11本发明的课题在于提供可以保持鲜乳原来的美味，杀灭食物中毒菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等)或病原菌(结核杆菌等)等有害细菌，可在保持其活性的状态下摄取鲜奶中所含抗体的食品及其制备方法。
本发明人等为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现在鲜乳中添加乳酸菌或双歧杆菌的一种或两种以上进行发酵，则无需加热灭菌即可杀灭有害细菌，同时可以保持鲜乳原来的美味，而且没有预见到的新发现是，鲜乳在加热低于63℃时，鲜乳中所含抗体可以维持其活性，由此得到含有新型抗体的发酵食品，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)含有抗体的发酵食品的制备方法，其特征在于无需将牛或牛以外的哺乳动物的鲜乳加热至63℃以上，在上述鲜乳中添加乳酸菌或双歧杆菌的一种或两种以上进行发酵；2)上述1)的含有抗体的发酵食品的制备方法，该方法是在上述鲜乳中事先添加有机酸并将pH值调节至5.8以下，然后添加乳酸菌或双歧杆菌的一种或两种以上；3)上述1)或2)的含有抗体的发酵食品的制备方法，该方法为使上述鲜乳脱脂并发酵；4)含有抗体的发酵食品，该食品是通过上述1)～3)中任一项的制备方法而得到的。
权利要求14的发明可以提供发酵食品的制备方法，即通过添加乳酸菌等使之发酵，使牛或牛以外的哺乳动物的鲜乳中的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等或病原菌(结核杆菌等)的有害细菌灭活，通过直接摄取鲜奶中所含的抗体可以享受抗体所具有的健康功能，而且保持了鲜乳原来的美味。权利要求15的发明通过向鲜乳中添加有机酸使之在pH5.8以下进行发酵，可以阻害鲜奶中有害细菌的繁殖，可以为乳酸菌等的繁殖提供良好的环境。另外，权利要求16的发明通过使用脱脂的鲜乳，可以提供脂肪含量少的发酵食品。
本发明中，鲜乳是指将牛或牛以外的哺乳动物的乳挤出后未加热至63℃以上的乳，优选挤乳后48小时以内的乳。作为以牛乳为原料的代表性乳酸菌发酵食品--酸乳酪的情况，以鲜乳为原料时，通常被以混入的杂菌为首的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等其它食物中毒菌等有害细菌污染，事先实施超高温灭菌等加热处理用于将这些菌灭活。本发明中的鲜乳，由于如果加热至63℃以上则抗体失活，鲜乳所具有的良好风味飞散，而且还产生不快的加热气味，也使鲜乳本身味道的平衡破坏，因此无需加热至63℃以上，供于发酵。即使大肠杆菌等有害细菌混入，通过添加的乳酸菌等的发酵，也可以抑制其繁殖，在发酵中使之灭活，因此没有食物中毒的危险性。本发明中，由于未加热至63℃以上，因此鲜乳中的抗体没有失活，可以充分发挥抗体所具有的健康功能效果。
鲜乳优选事先添加有机酸使pH值维持在5.8以下，然后添加乳酸菌等使之发酵。通过使pH值维持在5.8以下，可以抑制有害细菌的繁殖，使食物中毒等的危险(风险)更小。可使用的有机酸例如可以是乳酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、己二酸、乙酸、葡萄糖酸、富马酸、磷酸，其中优选乳酸。
如果将鲜乳脱脂后使用则可以制备脂肪含量少的发酵食品，适合用作希望低热量食品的糖尿病患者或将体重减少作为目标的人的食品。脱脂的方法可以是离心等通常的乳脂肪成分的分离方法。
本发明中添加的乳酸菌可以是属于乳酸杆菌属(Lactobacillus)的德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lb.delbrueckii subsp.bulgaricus)、德氏乳杆菌乳亚种(Lb.delbrueckii subsp.lactis)、德氏乳杆菌德氏亚种(Lb.delbrueckii subsp.delbrueckii)、嗜酸乳杆菌(Lb.acidphilus)、干酪乳杆菌(Lb.casei)、路氏乳杆菌(Lb.reuteri)、短乳杆菌(Lb.brevis)、加氏乳杆菌(Lb.gasseri)、约氏乳杆菌(Lb.johnsonii)、阿拉伯糖乳杆菌(Lb.arabinosus)、瑞士乳杆菌(Lb.helveticus)；属于链球菌属(Streptococcus)的嗜热链球菌(Stc.thermophilus)；属于乳球菌属(Lactococcus)的乳酸乳球菌乳亚种(Lc.lactis subsp.lactis)、乳酸乳球菌乳脂亚种(Lc.lactis subsp.cremoris)、植物乳球菌(Lc.plantarum)、棉子糖乳球菌(Lc.raffinolactis)；片球菌属(Pediococcus)的嗜盐片球菌(P.halophilus)、戊糖片球菌(P.pentosaceus)；明串珠菌属(Leuconostoc)的肠系膜状明串珠菌(Leu.mesenteroides)、乳明串珠菌(Leu.lactis)；肠球菌属(Enterococcus)的粪肠球菌(Ec.faecalis)、屎肠球菌(Ec.faecium)。
双歧杆菌可以是双歧杆菌属(Bifidobacterium)的两歧双歧杆菌(B.bifidus)、长双歧杆菌(B.longum)、短双歧杆菌(B.breve)、婴儿双歧杆菌(B.infantis)、青春双歧杆菌(B.adolescentis)。
另外，还可以如所谓的ケフイアヨ-グルト等，添加酵母进行复合发酵。
发酵在通常的发酵条件下、即20～50℃、8～24小时进行发酵培养。
发酵时，只要在不影响发酵的范围内，可以在发酵前的鲜乳中添加砂糖等甜味剂、香精等通常在食品中添加的副原料进行发酵。
已知乳酸菌或双歧杆菌有整肠作用、降低血液胆固醇的作用、降压作用、抗癌作用、免疫活化作用等的效果(乳酸菌的科学与技术，学会出版中心)，本发明中得到的发酵食品是兼备乳酸菌或双歧杆菌所具有的健康功能和抗体所具有的健康功能，可以期待协同效果的非常有效的食品而且以鲜乳为原料、未加热至高温，因此是具有鲜乳原来美味的食品。
如上述所得的发酵食品，可以直接作为酸乳酪等食用。并且，还可以作为酸乳冻、酸乳蛋糕、冻酸乳酪或酸乳调味汁等食品原料使用。
在利用本发明的制备方法得到的含抗体发酵食品中，还可以添加砂糖等甜味剂、香精等通常在食品中添加的副原料，制备乳酸菌饮料、双岐杆菌饮料、酸性饮料。并且，还可以使含抗体发酵食品干燥，制成粉末，得到含抗体的全粉乳、脱脂粉乳等干燥食品。
发明方案12本发明的课题在于提供含有更高浓度的抗体，并且使抗体所具有的功能与乳酸菌、双岐杆菌所具有的功能组合而成的食品。
本发明人等发现如果配合如乳清蛋白这样的含有更高浓度抗体的食品原料，且与乳酸菌、双歧杆菌组合则可以解决上述课题，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)含有抗体的食品，其特征在于该食品含有1.5mg/g以上抗体和107/g以上选自乳酸菌和双歧杆菌的一种或两种以上的菌。
2)权利要求18的含有抗体的食品，该食品含有3mg/g以上抗体。
3)权利要求18或19的含有抗体的食品，其中抗体为乳清蛋白中的抗体。
4)权利要求18～20中任一项的含有抗体的食品，其中抗体为初乳中的抗体。
5)权利要求18～21中任一项的含有抗体的食品，该食品还含有其它的具有免疫活化功能的成分。
根据本发明，通过同时含有高浓度抗体和乳酸菌、双歧杆菌，可以提供可以同时强化从体外摄取抗体获得免疫的被动免疫和由乳酸菌、双歧杆菌引起的激活体内免疫的主动免疫的两种免疫，发挥免疫活化作用的协同效果的食品。通过含有107/g以上乳酸菌、双歧杆菌的一种或两种以上，还可以得到抑制其它杂菌、特别是食物中毒菌的繁殖的效果。根据权利要求19的发明可以提供抗体浓度更高的食品。根据权利要求20的发明可以提供含有乳清蛋白中的高浓度抗体的食品。根据权利要求21的发明可以提供直接含有初乳中的高浓度抗体的高抗体含量的食品。根据权利要求22的发明通过进一步混合上述以外的具有免疫活化功能的成分，可以提供发挥更优异免疫活化功能的食品。
本发明的含抗体食品中，作为抗体优选含有抗体浓度高的抗体原料例如乳清蛋白、初乳中所含的抗体。由于乳清蛋白、初乳的抗体浓度高，优选作为含高浓度抗体食品的抗体原料。对于市售的乳清蛋白来说，鲜乳中所含的抗体转移至此，以高浓度存在，无变性、失活，保持其活性。乳清蛋白可以使用市售品，但由于高温下抗体发生变性，因此优选在制备工序中热历程少的市售品，例如优选配合用离子交换法或超滤膜法制备的乳清蛋白。更优选的是含有1％以上的保持活性的抗体的乳清蛋白。
成为乳清蛋白的原料的乳可以是牛、山羊等任一种哺乳动物的乳。该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的奶，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的奶。
当将初乳用作抗体原料时，可以是牛、山羊等任一种哺乳动物的初乳，该初乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的初乳，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的初乳。初乳是指分泌开始后至第4～5天期间所分泌的乳。已知初乳与常乳比较含有数十至百倍的高浓度的抗体(太田实，化学与生物37(2)，107-112(1999))。
乳清蛋白、初乳和含有它们的食品原料只要在不降低抗体含量的范围内可以加热灭菌，但加热温度优选物品温度不能在76℃以上。还可以实施利用过滤或电子射线、γ射线、紫外线、高电压脉冲、振动磁场、闪光脉冲、超声波、高压处理等的非加热灭菌。
本发明的含抗体食品中，在1g食品中含有1.5mg以上抗体。优选含量为1.5～500mg/g。抗体含量在3mg/g以上时，可以更期待抗体的免疫活化功能，也提高与乳酸菌或双歧杆菌的协同效果，更优选。更优选的含量为3～500mg/g。
本发明中，作为乳酸菌可以使用发明方案11中的乳酸菌。还可以利用其他乳酸菌。
作为双歧杆菌可以使用发明方案11中的双歧杆菌。还可以利用其他双歧杆菌。
乳酸菌和双歧杆菌可以是细菌素生产株，也可以是不生产细菌素的菌株。另外，乳酸菌和双歧杆菌无论是活菌还是灭活菌只要判明具有免疫活化作用，可以添加其任意一种。
本发明的含抗体食品，在1g食品中含有107/g以上选自乳酸菌和双歧杆菌的菌的一种或两种以上。通过使这些乳酸菌或/和双歧杆菌的含量为107/g以上，可以期待免疫活化作用等效果。优选的含量为107～1012/g。
本发明的含抗体食品中，只要是含有抗体和选自乳酸菌与双歧杆菌的任意一种或两种以上的菌类的食品，对这些菌类添加形态没有特别限定，可以是添加到成为含抗体食品的主要原料的牛乳或豆乳等中进行发酵的发酵食品，也可以是在主要原料中混合菌体培养液或干燥菌体的非发酵食品。此外，还可以将本发明的含抗体食品的成分作为主要成分。
本发明的含抗体食品可以进一步含有抗体、乳酸菌、双歧杆菌以外的具有免疫活化功能的成分(以下称为其它免疫活化成分)。通过进一步含有其他免疫活化成分，可以进一步提高免疫活化功能。其他免疫活化成分可以是落叶松蕈、桑黄、灵芝等担子菌类；DNA、核苷酸等核酸组合物；蜂胶；壳多糖；壳聚糖；乳铁蛋白；墨角藻聚糖；紫锥菊；タヒボ；米糠；酵母；维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、多酚等类SOD样物质；SOD；石莲花等免疫活化功能的已知成分。
另外，本发明可以添加上述发明方案7中记载的功能性素材。
本发明的含抗体食品为发酵食品时，对其制备方法没有限定，可通过通常的制备方法制备。此时，乳清蛋白或初乳等的抗体原料优选将发酵培养基经加热灭菌后再添加。只要是加热灭菌后，可以在发酵前添加，也可以在发酵后添加，还可以在发酵中途添加。
当发酵前将乳清蛋白或初乳等添加到发酵培养基中时，随后通常添加乳酸菌等发酵引子，在20～50℃下发酵培养8～24小时。还可以如所谓的ケフイアヨ-グルト等这样，添加酵母进行复合发酵。
当为非发酵食品时，可以只将乳清蛋白或初乳和菌体培养液或干燥菌体添加到含抗体食品的其它原料中进行制备。对这些菌类的添加方法没有制限。这里所说的非发酵食品是指与其他原料分开，使乳酸菌或/和双歧杆菌增殖，将得到的这些菌类制成非发酵状态添加到其他原料中。非发酵状态可以举出菌体培养液的冷却或菌体的干燥等。
本发明中，作为食品，除了可以作为发酵的食品、酸乳酪等食用之外，还包含酸乳冻、酸乳蛋糕、冻酸乳酪、干燥发酵乳或酸乳调味汁等。另外，在非发酵的情形中有各种形态的食品，例如可以举出加工乳、冰淇淋、点心类、清凉饮料水、片剂、粉末食品等。
本发明的含抗体食品可以含有砂糖等甜味剂、香精、增粘多糖类等通常在食品中添加的副原料。
发明方案13本发明的课题在于提供含有高浓度抗体的食品及其制备方法，其中所述食品为可以保持味道并食用的明确的食品。
本发明人等发现通过将如乳清蛋白这样的含有更高浓度抗体的食品原料在一定条件下配合在加工食品中，可以解决上述课题，还发现根据加热条件可以使抗体不失活、50％以上残存，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)含抗体的明确的食品，其特征在于该食品含有1.5mg/g以上来自乳的抗体，但是不含有107/g以上乳酸菌和双歧杆菌类。
2)上述1)的含抗体的明确的食品，该食品含有3mg/g以上来自乳的抗体。
3)上述1)的含抗体的明确的食品，该食品含有10mg/g以上来自乳的抗体。
4)上述1)～3)中任一项的含抗体的明确的食品，其中来自乳的抗体为乳清蛋白中的抗体。
5)上述1)～4)中任一项的含抗体的明确的食品，该食品还含有来自乳的抗体以外的具有免疫活化功能的成分。
6)上述1)～5)中任一项的含抗体的明确的食品，其中含抗体的明确的食品为乳制品或冰点心。
7)上述1)～6)的含抗体的明确的食品的制造方法，其特征在于该方法在50％以上抗体残存的条件下对含有来自乳的抗体的明确的食品或者该明确的食品中含有来自乳抗体的部分进行加热灭菌。
8)上述7)的含抗体的明确的食品的制造方法，其中加热灭菌在使含有抗体部分的糖含量调节为7.5％质量以上的条件下进行。
根据权利要求23的发明，通过含有高浓度的抗体，可以提供能够期待免疫活化作用的食品。根据权利要求24的发明可以提供抗体浓度更高的食品。另外，根据权利要求25的发明可以提供抗体浓度特别高的食品。根据权利要求26的发明可以提供含有乳清蛋白中的高浓度抗体的食品。并且，根据权利要求27的发明，通过进一步混合来自乳的抗体以外的具有免疫活化功能的成分，可以提供可以发挥更优异免疫活化功能的食品。按权利要求28的发明，含抗体的明确的食品既可以保持作为乳制品、冰点心的美味又可以享受免疫活化效果。根据权利要求29的发明可以制备即使加热也使抗体50％残存的食品。根据权利要求30的发明，在7.5％质量的糖存在下可以提高抗体的稳定性，因此可以制备抗体残存量高的明确的食品。
本发明的含抗体食品中，作为来自乳的抗体优选含有抗体浓度高的抗体原料，例如乳清蛋白、初乳中所含的抗体。由于乳清蛋白、初乳的抗体浓度高，优选作为含高浓度抗体食品的抗体原料。市售的乳清蛋白中，鲜乳所含的抗体转移到其中，以高浓度存在，无变性、失活保持其活性。乳清蛋白可以使用市售品，但由于高温下抗体发生变性，因此优选在制备工序中热历程少的市售品，例如将用离子交换法或超滤膜法制备的乳清蛋白进行混合。更优选的是保持活性的抗体含有1％以上的乳清蛋白。
成为乳清蛋白原料的乳可以是牛、山羊、绵羊、马等任一种哺乳动物的乳。该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的奶。
当将初乳用作原料时，可以是牛、山羊、绵羊、马等任一种哺乳动物的初乳，该初乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的初乳，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的初乳。初乳是指分泌开始后至第4～5天期间所分泌的乳。已知初乳与常乳比较含有数十至百倍的高浓度的抗体(太田实，化学与生物37(2)，107-112(1999))。
本发明的含抗体的明确的食品在1g食品中含有1.5mg以上来自乳的抗体。优选含量为1.5～200mg/g。抗体含量在3mg/g以上时，可以更期待抗体的免疫活化功能，更优选。更优选的含量为3～200mg/g。抗体含量在10mg/g以上时，可以进一步期待高抗体的免疫活化功能，进一步优选。进一步优选的含量为10～200mg/g。
本发明的含抗体食品可以进一步含有抗体以外的具有免疫活化功能的成分。通过进一步含有抗体以外的免疫活化成分，可以进一步提高免疫活化功能。抗体以外的免疫活化成分例如可以是香菇、冬菇、落叶松蕈、桑黄、灵芝等担子菌类；原核细胞的DNA、真核细胞的DNA、核苷酸等核酸组合物；蜂巢蜡胶；壳多糖；壳聚糖；乳铁蛋白；墨角藻聚糖；紫锥菊；タヒボ；米糠；酵母；维生素C、维生素E、类胡萝卜素、绿茶成分、多酚等SOD样物质；含SOD的药物组合物(US-B6045809)；石莲花、人参、郁金等中药成分等已知具有免疫活化功能的成分，只要具有免疫活化功能即可，对它们没有特别限定。还可以使用它们的萃取物、其干燥粉末等。
本发明还可以添加上述发明方案7中记载的功能性素材。
本发明中，明确的食品是“被明确地认知为食品的物质”的统称，从外观、形状和成分本质方面看，是社会上一般的看法上被容易认为“食品”的物质，也是日本厚生省药务局监视指导课、东京都卫生局药务部监修的“医药品·化妆品等广告的实际‘94’”(药业时报社)中记载的用语。包含不是医药品或营养辅助食品中通常使用的形态--片剂、胶囊剂、粉末等形状的饮料食品、加工食品、烹调食品、点心、饮料、调味料等。
本发明的明确的食品有各种形态的食品，例如可以举出加工乳、乳饮料等乳制品(乳酸菌、双歧杆菌类的含量为不足107/g的物质)；果汁饮料、蔬菜汁饮料、清凉饮料、豆奶等嗜好饮料；调味汁、撒在饭上的粉状食品等调味料；冰淇淋、软冰糕等冰点心；果冻等甜点心类；人造奶油、涂味食品、顶端配料调味汁(浇头)、炼乳、加糖后起泡的奶油、调咖啡的人造奶、巧克力、口香糖等点心等。
对本发明的含抗体的明确的食品的制备方法没有限定，可以利用常规制备方法。可以在明确的食品的制备或调理时添加抗体原料的乳清蛋白或初乳作为原料之一到，通过进行制备、调理而得到。在调理或制备时，优选添加抗体原料后在抗体50％以上残存的条件下进行加热灭菌。作为抗体50％以上残存的加热灭菌条件，例如可以举出60℃、30分钟或者与其同等以下的加热条件，但图6所示，根据食品不同，可以进一步提高温度。由于通过含有7.5％以上糖，抗体对热变得稳定，使在更高温度下的加热成为可能，所以可以添加糖进行加热灭菌。
另外，在将含乳清蛋白或初乳等抗体的部分添加到其它食品原料之前，事先将含该抗体的部分在抗体50％以上残存的条件下进行加热灭菌，不含抗体的部分(上述其它食品原料部分)在通常的灭菌条件下进行加热灭菌，之后通过将两者无菌混合，可以得到含抗体的明确的食品。
还可以实施利用过滤或电子射线、γ射线、紫外线、高电压脉冲、振荡磁场、闪光脉冲、超声波、高压处理、DP CO2(密相CO2)等的非加热灭菌来得到含抗体的明确的食品。
图6表示向食品中添加乳清蛋白在各温度下加热30分钟时各食品中的抗体残存率。作为食品，分别选择市售的牛乳、肉汤、蔬菜果汁饮料，分别添加2％质量、3％质量、3％质量的乳清蛋白，另外，对于乳清蛋白的10％质量水溶液，测定在60～72℃范围内进行加热时各食品中的抗体量，算出抗体的残存率。抗体量的测定方法按照后述实施例中所示的方法。图6中，●表示牛乳中添加2％质量乳清蛋白(pH6.5)；■表示肉汤中添加3％质量乳清蛋白(pH5.3)；▲表示蔬菜果汁饮料中添加3％质量乳清蛋白(pH4.5)；◆表示乳清蛋白的10％质量水溶液(pH6.4)。
从图6中可以明确，在牛乳(乳清蛋白添加后的pH6.5)中，在68℃下加热30分钟，抗体50％以上残存；在乳清蛋白的10％质量水溶液(同pH6.4)中，在67℃下加热30分钟，抗体50％左右残存；在肉汤(同pH5.3)的情况下，在66℃加热30分钟，抗体50％残存。而在蔬菜果汁饮料(同pH4.5)中，60℃、30分钟的加热得到50％以上残存率。这样，通过选择各对象食品加热灭菌的条件可以使抗体50％以上残存。从以上的结果来看，即使对象食品不同，通过进行预备试验，可以决定抗体50％以上残存的加热条件，优选在与该条件同等或比该条件低的条件下进行加热灭菌。
另一方面，本发明人等对能使抗体的热稳定性提高的物质进行了检索，结果发现通过添加糖可以实现此目的。
图7表示向市售的牛乳中添加乳清蛋白再添加蔗糖，在各温度下加热30分钟时抗体的残存率。在该试验中，由于蔗糖以未添加、3％质量、5.5％质量、10.5％质量、25.5％质量、40.5％质量添加，与牛奶中原来所含4.5％质量的糖加在一起，则在牛乳中的糖含量分别成为4.5％质量、7.5％质量、10％质量、15％质量、30％质量、45％质量。向这些牛乳中均添加2％质量的乳清蛋白，测定在60～80℃范围内加热时各牛乳中的抗体量，算出抗体的残存率。图7中，●表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加2％质量乳清蛋白；■表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加3.0％质量蔗糖、2％质量乳清蛋白；▲表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加5.5％质量蔗糖、2％质量乳清蛋白；◆表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加10.5％质量蔗糖、2％质量乳清蛋白；○表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加25.5％质量蔗糖、2％质量乳清蛋白；□表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加40.5％质量蔗糖、2％质量乳清蛋白。
图8表示使用赤藓糖醇代替蔗糖，进行与上述同样的试验的结果。除此之外，使用果糖、半乳低聚糖时也得到了同样的稳定性。图8中，●表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加2％质量乳清蛋白；■表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加3.0％质量赤藓糖醇、2％质量乳清蛋白；▲表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加5.5％质量赤藓糖醇、2％质量乳清蛋白；◆表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加10.5％质量赤藓糖醇、2％质量乳清蛋白；○表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加25.5％质量赤藓糖醇、2％质量乳清蛋白；□表示牛乳(含糖4.5％质量)中添加40.5％质量赤藓糖醇、2％质量乳清蛋白。
如图7和图8所示，只要糖含量为7.5％质量，在70℃下加热30分钟，无论哪一种抗体都50％以上残存。而且，随着糖含量增加抗体的热稳定性也提高，糖含量为45％质量时，即使在77℃下加热30分钟抗体也有50％以上残存。
从以上的结果可以明确，在含抗体的明确的食品的制备或调理工序中，如果将含有抗体的部分的糖含量调节为7.5％质量以上，则能够提高抗体对热的稳定性，可以在更高的温度下进行加热，在相同加热温度中可以使产品食品中的抗体残存率提高。
发挥所述效果的糖可以使用葡萄糖、果糖等单糖类；蔗糖、乳糖等二糖类；果低聚糖、异麦芽低聚糖等低聚糖类；甘油、山梨糖醇、赤藓糖醇等糖醇类。糖可以添加单独一种或将多种混合添加，也可以利用食品原料中原来含有的糖。
还可以含有甜味剂、酸味剂、香精、增粘多糖类等通常食品中添加的原料。
发明方案4发明的课题在于提供从低年龄层到高龄者均可以接受，使乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、えぐみ、收敛味减低，改善风味，而且可以改善吸水性、分散性，使在食品中混合时的“面疙瘩”状态短时间内消除，容易混合容易食用的乳清蛋白食品。
本发明人等为了解决上述课题进行了深入地研究，结果发现通过将低聚糖等糖添加到乳清蛋白中，减低乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、えぐみ、收敛味的同时，提高吸水性，可以使在水或牛乳、番茄汁等液状食品或者酸乳酪等糊状食品中混合时的“面疙瘩”状态短时间内解消，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白和糖，其中糖相对于100质量份乳清蛋白为5～1000质量份。
2)上述1)的乳清蛋白食品，其中糖为一种或两种以上的难消化性糖类。
3)上述2)的乳清蛋白食品，其中难消化性糖类选自果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖。
4)上述1)～3)中任一项的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
5)上述1)～4)中任一项的乳清蛋白食品，其中抗体的含量为5mg/g以上。
6)上述1)～5)中任一项的乳清蛋白食品，其特征在于抗体的含量为10mg/g以上。
7)上述1)～5)中任一项的乳清蛋白食品，其特征在于抗体的含量为50mg/g以上。
根据权利要求32的发明，通过将乳清蛋白与糖混合，可以减低乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、えぐみ、收敛味，改善风味，而且使乳清蛋白更美味、在液状食品或糊状食品中混合时的吸水性得到改善容易混合。根据权利要求33的发明，通过使添加的糖为难消化性糖类，可以期待抗体所具有的免疫活化功能与难消化性糖类所具有的生理功能的协同效果。根据权利要求34的发明可以更显著地改善风味。根据权利要求36的发明，通过将含有糖的乳清蛋白食品制成颗粒状，进一步提高吸水性，使与液状食品或糊状食品的混合变得更容易、容易食用。根据权利要求37的发明，通过使抗体的含量为5mg/g以上，可以充分地得到抗体所具有的免疫活化功能。根据权利要求38的发明，通过使抗体的含量为10mg/g以上，可以更充分地得到抗体所具有的免疫活化功能。根据权利要求39的发明，通过使抗体的含量为50mg/g以上，可以进一步充分地得到抗体所具有的免疫活化功能。
乳清蛋白通常可以从干酪乳清、酸乳清等乳清中分离(分馏)，使得到的乳清蛋白溶液干燥来制备，但本发明中的乳清蛋白可以是从任一种乳清中分馏而得到的乳清蛋白。对从乳清中将乳清蛋白分馏的方法没有限定。除了使乳糖结晶、使之除去的方法之外，还可以使用例如微量过滤法、交叉流微量过滤法、离子交换法、超滤法等任一种方法。成为乳清的原料的乳可以是牛、山羊、绵羊、马、水牛等任一种哺乳动物的乳，该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的奶，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的奶。
乳清蛋白可以使用市售品的乳清蛋白。这些乳清蛋白可以举出乳清蛋白浓缩物(WPC)、乳清蛋白分离物(WPI)、脱盐乳清粉等。
乳清蛋白中残存鲜乳所含的抗体，由于在干燥粉末中它们被浓缩物含有，因此可以作为抗体的好的补充源利用。
本发明中所用的糖，除了后述的难消化性糖类之外，还可以使用葡萄糖、果糖、蔗糖、异构糖、糊精等任一种的糖类，只要是作为食品能使用的糖即可。这些糖可以一种或两种以上结合使用。通过含有糖，可以使乳清蛋白的乳臭或涩味、えぐみ、收敛味减轻，使吸水性提高，改善乳清蛋白在液状食品或糊状食品中混合时的分散性。
难消化性糖类只要是可作为食品使用的难消化性糖类即可，可以使用其任一种。例如可以举出果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、大豆低聚糖、半乳低聚糖、大豆低聚糖、木低聚糖、密三糖、异麦芽酮糖(帕拉金糖)、黑低聚糖、龙胆低聚糖、海藻糖、偶合糖(coupling sugar)、果胶低聚糖、环糊精等低聚糖；山梨糖醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇、还原异麦芽酮糖、乳糖醇、甘露糖醇、木糖醇等糖醇；菊糖；难消化性糊精；抗性淀粉等。这些糖可以使用通常的市售品。本发明中难消化性糖类是指机体内的消化酶难以消化的糖类，所以脂溶性物质或被玉米蛋白、麦胶蛋白等プロミラン覆盖的易消化性糖类，在这里也可以作为难消化性糖类使用。
难消化性糖类成为肠内双歧杆菌的增殖因子，该双歧杆菌作用于消化道免疫系统使主动免疫活性化。另一方面，乳清蛋白中的抗体可以增强被动免疫，因此通过同时摄取难消化性糖类和乳清蛋白，可以使主动免疫和被动免疫同时激活，期待强的免疫活化作用。另外，由于难消化性糖类还具有整肠作用、促进矿物质吸收作用、抗龋齿作用、抑制血液中胆固醇升高作用、改善肝功能作用等功能，所以可以使乳清蛋白的风味和吸水性改善，结合免疫活化作用，有望取得这些作用的协同效果。
难消化性糖类中，由于果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖对风味的改善优异，因此优选。特别是不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖即使比其它低聚糖量少也可以看到风味的改善效果。
本发明的乳清蛋白食品中，优选这些糖类相对于100质量份乳清蛋白为5～1000质量份，更优选为5～900质量份。当糖类的含量不足5质量份时，乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味的降低效果和吸水性的改善效果不充分。另一方面，如果超过1000质量份则乳清蛋白的含有比例变少，由于乳清蛋白食品中的抗体含量降低，所以摄取乳清蛋白的目的难以实现，因此不优选。
本发明的乳清蛋白食品可以通过在粉末状乳清蛋白中添加糖并混合来制备。还可以通过在从乳清中分馏的乳清蛋白溶液中添加上述糖，进行干燥制成粉末的方法来制备。对添加糖的乳清蛋白溶液进行干燥的方法没有限定，例如可以通过喷雾干燥法、冷冻干燥法等方法。
本发明的乳清蛋白食品，如果将其形状制成颗粒状则可以进一步提高乳清蛋白的吸水性，容易与其它食品混合。由于乳清蛋白的吸水性差，如果单独添加到水、牛乳等中则容易形成“面疙瘩”状态。但是，含有上述低聚糖等糖的乳清蛋白食品其吸水性得到改善，如果再将其制成颗粒状则吸水性进一步改善，分散性得以改善，所以即使添加到水、牛乳、番茄汁、酸乳酪等其它食品中也不形成“面疙瘩”，容易混合。
颗粒化可以通过喷雾造粒法、挤出造粒法等通常的方法进行。虽然上述低聚糖等糖可以成为颗粒化时的粘结剂，但也可以添加CMC(羧基甲基纤维素)等作为粘结剂。在颗粒化中，优选品温在低于70℃的条件下进行颗粒化。如果品温超过70℃则乳清蛋白中的抗体有失活的可能性。如果品温不超过70℃，只要将处理量、送风温度、送风量等设定为适宜的条件即可。
本发明的乳清蛋白食品在1g食品中含有5mg以上来自乳的抗体，可以期待抗体的免疫活化功能，因此优选。来自乳的抗体在10mg以上时可以更期待抗体的免疫活化功能，更优选，特别优选含有50mg以上。在1g乳清蛋白食品中，优选的抗体含量为5～500mg，进一步优选10～500mg，特别优选50～500mg。
本发明的乳清蛋白食品可以含有高甜度甜味剂、酸味剂、香精、乳化剂、增粘多糖类等通常食品中添加的食品添加物原料。
本发明的乳清蛋白食品，通过消去乳清蛋白所具有的奶臭与涩味、えぐみ、收敛味，改善风味，得到更美味、容易摄取的食品。另外，将其添加到其它食品中时，与乳清蛋白单独的粉末相比吸水性良好。并且，如果将其形状制成颗粒状，则进一步提高吸水性，容易与液状食品或糊状食品混合。此外，乳清蛋白食品中含有的糖如果使用难消化性糖类则成为肠内双歧杆菌的增殖因子，具有抗龋齿、低能量、整肠作用等生理功能，所以本发明的乳清蛋白食品也可以发挥这些生理功能。
发明方案9发明方案9包含4的1)～4)、还追加下述。
5)上述1)～3)中任一项的乳清蛋白食品，其中乳清蛋白为颗粒状，糖为粉末。
6)上述5)的乳清蛋白食品，其中相对于100质量份乳清蛋白，糖为30质量份以上。
7)上述1)～6)中任一项的乳清蛋白食品，其中来自乳的抗体含量为5mg/g以上。
8)上述1)～7)中任一项的乳清蛋白食品，其中来自乳的抗体含量为10mg/g以上。
9)上述1)～8)中任一项的乳清蛋白食品，其中来自乳的抗体含量为50mg/g以上。
根据权利要求40的发明，通过将乳清蛋白制成颗粒状，向其中添加糖粉末，进一步提高吸水性，使粉末在不容易分散的牛乳中等也变得容易分散。根据权利要求41的发明，可以制成分散性更优异的易溶性乳清蛋白食品。根据权利要求37的发明，通过使来自乳的抗体含量为5mg/g以上，可以充分地得到该抗体所具有的免疫活化功能。根据权利要求38的发明，通过使来自乳的抗体含量为10mg/g以上，可以更充分地得到该抗体所具有的免疫活化功能。根据权利要求39的发明，通过使来自乳的抗体含量为50mg/g以上，可以进一步充分地得到该抗体所具有的免疫活化功能。
本发明中，乳清蛋白、糖可以使用发明方案4的乳蛋白、糖。糊精有各种DE(葡萄糖当量)值的市售品，均可以使用，还可以使用环状糊精或簇糊精(cluster dextrin)。
作为难消化性糖类，除了方案4中举出的之外，还可以举出海藻酸；聚葡萄糖；阿拉伯糖基木聚糖；普鲁蓝；カ-ドラン(西班牙葡萄酒)等。
糖类可以使用与方案4同样的量和混合方法。
本发明的乳清蛋白食品，可以将乳清蛋白制成颗粒状，向其中添加上述粉末状糖。由此，乳清蛋白食品的吸水性进一步提高，容易与其它食品混合。特别是即使将乳清蛋白粉末添加到难以分散的牛乳中等也可以迅速混合。对颗粒的粒径没有限定，但通常优选平均粒径为0.02～2mm左右。若糖相对于100质量份颗粒状的乳清蛋白为30质量份以上，则可以得到吸水性优异的乳清蛋白食品，因此优选。糖增多则损害颗粒状乳清蛋白的特性，因此优选糖在300质量份以下。
来自乳的抗体、其它添加物也可以与发明方案4同样使用。
发明方案15本发明人等通过向乳清蛋白中添加一种或两种以上选自果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖的低聚糖，发现可以降低乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味的同时，提高吸水性，使在牛乳等液状食品或酸乳酪等糊状食品中混合时的“面疙瘩”状态短时间内消除，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白和低聚糖，该低聚糖为一种或多种选自果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖，其中低聚糖相对于100质量份乳清蛋白为5～900质量份。
2)权利要求35的乳清蛋白食品，其形状为颗粒状。
根据本发明，通过添加规定量的一种或两种以上选自果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖的低聚糖，可以降低乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味，改善风味，而且，使乳清蛋白更美味，改善在液状食品或糊状食品中混合时的吸水性、容易混合。通过制成颗粒状进一步提高吸水性，更容易与液状食品或糊状食品混合、容易食用。
本发明中，可以使用上述的通常的乳清蛋白。从牛乳中分离的方法可以使用微量过滤法、交叉流微量过滤法、离子交换法等任意一种方法。
本发明中，所用的乳清蛋白原料乳可以是牛、山羊、绵羊、马等任一种哺乳动物的乳。该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳。
本发明所用的果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖的低聚糖可以使用通常的市售品。特别是，不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖的低聚糖即使以比其它低聚糖更少的量少可以看到风味的改善效果。
本发明的乳清蛋白食品，相对于100质量份乳清蛋白含有5～900质量份这些低聚糖。如果低聚糖的含量不足5质量份则乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味的降低效果和吸水性的改善效果不充分。另一方面，如果超过900质量份则乳清蛋白的含量变低，摄取乳清蛋白的目的难以实现。
如果将本发明的乳清蛋白食品形状制成颗粒状则可以进一步提高乳清蛋白食品的吸水性，容易与其它食品混合。由于乳清蛋白的吸水性差，如果单独添加到水、牛乳等中则容易形成“面疙瘩”状态。但是，含有上述低聚糖的乳清蛋白食品其吸水性得到改善，如果制成颗粒状后再添加到牛乳或酸乳酪等其它食品中，则可以进一步改善吸水性，不形成“面疙瘩”，容易混合。
上述低聚糖成为颗粒化时的粘结剂，还可以添加CMC(羧基甲基纤维素)或糖等作为粘结剂。颗粒化可以利用喷雾造粒法、挤出造粒法等通常的方法。
本发明的乳清蛋白食品可以含有方案4的通常食品中添加的原料。
发明方案3本发明的课题在于提供消臭效果高的便臭改善剂。
本发明人等从各个角度对乳清蛋白的功能性进行了研究，结果发现该乳清蛋白具有显著的改善便臭的作用，从而完成了本发明。进一步细查明确了乳清蛋白中所含抗体为主要的有效成分。
即，本发明如下。
1)便臭改善剂，其特征在于该便臭改善剂含有乳清蛋白。
2)上述1)的便臭改善剂，该便臭改善剂以乳清蛋白中的抗体为有效成分。
3)权利要求42或43的便臭改善剂，该便臭改善剂包含0.5％质量以上的抗体。
4)权利要求42～44中任一项的便臭改善剂，该便臭改善剂还含有难消化性糖类。
根据本发明，通过将乳清蛋白中的抗体用作有效成分，可以提供优异的便臭改善剂。若抗体含量为0.5％质量以上则其改善效果显著，进一步混合难消化性糖类则其改善效果更大。
本发明中，乳清蛋白可以使用通常的市售品，即乳清蛋白浓缩物(WPC)、乳清蛋白分离物(WPI)、脱盐乳清粉等，但优选抗体含量高的。关于从乳清中分离乳清蛋白的方法可以使用微量过滤法、交叉流微量过滤法、离子交换法等任一种的方法。
本发明中，所用的乳清蛋白原料乳可以是牛、山羊、绵羊、马、水牛等任一种哺乳动物的乳。该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳。
通常，乳清蛋白用于火腿、肠等物性改良或制面包、酸乳酪等品质改良中，近来，发现其氨基酸序列与人乳接近，营养价值丰富，包含所用的必需氨基酸，吸收率非常好，而且支链氨基酸的含有率也高，因此作为用于补充蛋白质的营养辅助食品，主要针对体育选手或运动负荷高的人制成商品。
乳清蛋白中还残存有来自原料鲜乳的抗体。本发明的便臭改善效果由于所述乳清蛋白中含有的抗体而发挥作用。因此，优选本发明的便臭改善剂中含有0.5％质量以上乳清蛋白的抗体用于改善便臭。另外，成人每日摄取50mg以上乳清蛋白的抗体则对改善便臭是有效的。
本发明的便臭改善，若混合难消化性糖类则其效果更显著。难消化性糖类只要是能作为食品使用的难消化性糖类即可，可以使用任一种的糖类。例如可以举出果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、大豆低聚糖、半乳低聚糖、大豆低聚糖、木低聚糖、密三糖、异麦芽酮糖(帕拉金糖)、黑低聚糖、龙胆低聚糖、海藻糖、偶合糖(coupling sugar)、果胶低聚糖、环糊精等低聚糖；山梨糖醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇、还原异麦芽酮糖、乳糖醇、甘露糖醇、木糖醇等糖醇；菊糖；难消化性糊精；抗性淀粉等。这些糖可以使用通常的市售品。本发明中难消化性糖类是指机体内的消化酶难以消化的糖类，所以脂溶性的物质、被プロミラン覆盖的玉米蛋白、麦胶蛋白等易消化性糖类，在这里也可以作为难消化性糖类使用。优选难消化性糖类相对于100质量份乳清蛋白添加5～1000质量份。
难消化性糖类成为肠内双歧杆菌的增殖因子，还具有整肠作用。若同时摄取乳清蛋白和难消化性糖类，则两者的协同作用使便臭改善效果更显著。
本发明的便臭改善剂除了作为有效成分的乳清蛋白之外，还可以含有赋形剂、甜味剂、酸味剂、香精、乳化剂、增粘多糖类、着色剂等通常食品中添加的食品添加物原料。
本发明中，对便臭改善剂的形态没有限定。例如可以是片剂、粉末、颗粒、胶囊剂，也可以是糊状、液状。添加乳清蛋白后只要不进行抗体失活的加热加工工序，可以制成加工食品的形态。
发明方案1发明的课题在于提供从低年龄层到高龄者均可以接受的、使乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味减低改善风味；而且改善吸水性，混合在食品中时的“面疙瘩”状态短时间内消除、容易混合；并且看起来美味的乳清蛋白食品。
本发明人等为了解决上述课题对各种的食品素材进行了筛选，结果发现通过将可可粉添加到乳清蛋白中，可以减低乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味的同时，改善吸水性，使在水、牛乳、豆乳等液状食品中混合时的“面疙瘩”状态短时间内消除，并且因可可粉引起的着色而感到看起来美味和愉悦，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)乳清蛋白·可可食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白和可可粉，其中可可粉相对于100质量份乳清蛋白为1～10000质量份。
2)权利要求46的乳清蛋白·可可食品，其形状为颗粒状。
根据本发明，通过添加规定量的可可粉，可以减低乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味改善风味，而且由于吸水性得到了改善，在水、牛乳、豆乳等液状食品中混合时的面疙瘩状态消除，容易混合。另外，可可粉的褐色色调可以打动食用人的视觉，引起食欲，赋予愉悦与变化。通过制成颗粒状进一步提高吸水性可以更容易与其它液状食品混合、容易食用。
本发明中，乳清蛋白可以使用通常的市售品，上述发明方案4、9、15中使用的乳清蛋白。
本发明中，所用的乳清蛋白原料乳可以是牛、山羊、绵羊、马等任一种哺乳动物的乳，该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳、也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳。
本发明中，可可粉可以使用一般的可可粉。可可粉例如可以如下制备用滤清器分选可可豆，用分离器将豆破碎除去皮等，用反应釜加入碱剂使之反应，然后用焙烧炉焙炒，用磨碎机磨碎，将所得可可块用可可压榨机榨油，分离一部分可可脂，用可可粉碎机粉碎，制备细的颗粒，但对其制备方法没有限定。此外，可可粉富含多酚或食物纤维等功能性成分，是优良的功能性食品。也可以使用这些功能性成分的含量得到提高的可可粉。
通过将可可粉添加到乳清蛋白中，可可粉所具有的苦味使乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味消失的同时，可可粉所具有的风味和褐色的色调赋予乳清蛋白·可可食品更美味的感觉。而且，通过可可粉的添加，提高吸水性，与液状食品容易混合。
本发明的乳清蛋白·可可食品相对于100质量份乳清蛋白含有1～10000质量份可可粉。如果可可粉的含量不足1质量份，则乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味的降低效果和吸水性的改善效果不充分，着色也不充分。另一方面，如果超过10000质量份则乳清蛋白的含量变低，摄取乳清蛋白的意义小了。
如果将本发明的乳清蛋白·可可食品的形状制成颗粒状，则可以使乳清蛋白·可可食品的吸水性进一步提高，与液状食品的混合变得容易。由于乳清蛋白的吸水性差，如果单独添加到水、牛乳、豆乳等中则容易形成“面疙瘩”状态。但是，含有可可粉的乳清蛋白·可可食品其吸水性得到改善，如果再将其制成颗粒状则吸水性进一步改善，即使添加到其它食品中也不形成“面疙瘩”，变得容易混合。
可可粉包含糖、纤维，颗粒化时这些成分成为粘结剂，还可以添加CMC(羧基甲基纤维素)或糖等作为粘结剂。颗粒化可以利用喷雾造粒法、挤出造粒法等通常的方法。
本发明的乳清蛋白·可可食品，可以含有脱脂粉乳、全脂粉乳、奶油粉末等乳制品；蔗糖、乳糖、赤藓糖醇、斯特维亚菊萃取物等甜味剂，柠檬酸、苹果酸等酸味剂，食盐，碳酸钙，香精，增粘多糖类等通常食品中添加的原料。
如上所述，本发明的乳清蛋白·可可食品中，乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味消失，更美味、容易摄取。添加到其它食品中时与乳清蛋白单独的粉末相比，吸水性变佳。而且，因可可粉的着色看起来有美味的感觉。如果将其形状制成颗粒状，则吸水性进一步提高，与液状食品容易混合。
发明方案2本发明的课题在于提供从低年龄层到高龄者均可以接受的、使乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味减低改善风味；而且改善吸水性，混合在食品中时的“面疙瘩”状态短时间内消除、容易混合；并且看起来美味的乳清蛋白食品。
本发明人等为了解决上述课题对各种的食品素材进行了筛选，结果发现通过将一种或多种选自越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末、草莓粉末的粉末添加到乳清蛋白中，可以减低乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味，同时改善吸水性，使在牛乳等液状食品或酸乳酪对糊状食品中混合时的“面疙瘩”状态短时间内消除，并且因来自天然素材的色素的着色而令人感觉到看起来美味和愉悦，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白和一种或多种选自越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末、草莓粉末的粉末，其中粉末相对于100质量份乳清蛋白为1～900质量份。
2)权利要求48的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
根据本发明，通过按规定量添加一种或多种选自越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末、草莓粉末的粉末，可以减低乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味，改善风味；而且通过改善吸水性在液状食品或糊状食品中混合时，面疙瘩状态消除，容易混合。并且这些粉末的红色～紫色的色调可以打动食用者的视觉，引起食欲，给于享受和变化。通过制成颗粒状使吸水性进一步提高，更容易与其它的液状食品或糊状食品混合，容易食用。
本发明中，乳清蛋白可以使用通常的市售品，也可以使用上述发明方案4、9、15中的乳清蛋白。
本发明中，所用的乳清蛋白原料乳可以使用与上述发明方案1同样的原料乳。
本发明中，越橘粉末可以使用通常的市售品。通过向乳清蛋白中添加越橘粉末，越橘粉末所具有的风味消除乳清蛋白所具有的奶臭与涩味、收敛味的同时，由于越橘粉末所具有的风味与色调通过乳清蛋白食品而感到美味。而且，越橘粉末的添加使吸水性提高，容易与液状食品或糊状食品进行混合。
本发明中，木莓粉末可以使用通常的市售品。通过向乳清蛋白中添加木莓粉末，木莓粉末所具有的风味消除乳清蛋白所具有的奶臭与涩味、收敛味的同时，由于木莓粉末所具有的风味与色调通过乳清蛋白食品而感到美味。而且，木莓粉末的添加使吸水性提高，容易与液状食品或糊状食品进行混合。
本发明中，乌饭树粉末可以使用通常的市售品。通过向乳清蛋白中添加乌饭树粉末，乌饭树粉末所具有的风味消除乳清蛋白所具有的奶臭与涩味、收敛味的同时，由于乌饭树粉末所具有的风味与色调通过乳清蛋白食品而感到美味。而且，乌饭树粉末的添加使吸水性提高，容易与液状食品或糊状食品进行混合。
本发明中，草莓粉末可以使用通常的市售品。通过向乳清蛋白中添加草莓粉末，草莓粉末所具有的风味消除乳清蛋白所具有的奶臭与涩味、收敛味的同时，由于草莓粉末所具有的风味与色调通过乳清蛋白食品而感到美味。而且，草莓粉末的添加使吸水性提高，容易与液状食品或糊状食品进行混合。
本发明的乳清蛋白食品，相对于100质量份乳清蛋白，含有1～900质量份一种或多种选自越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末、草莓粉末的粉末。如果上述粉末的含量不足1质量份，则乳清蛋白所具有的奶臭或涩味、收敛味的降低效果和吸水性的改善效果不充分，着色也不充分。另一方面，如果超过900质量份则乳清蛋白的含量变低，摄取乳清蛋白的目的难以达到。
优选将本发明的乳清蛋白食品的形状制成颗粒状，这与上述发明4同样。
上述粉末中含有各种来自植物的糖、淀粉、纤维，颗粒化时这些成分成为粘结剂，还可以添加CMC(羧基甲基纤维素)或糖等作为粘结剂。颗粒化可以利用喷雾造粒法、挤出造粒法等通常的方法。
本发明的乳清蛋白食品，可以含有蔗糖、赤藓糖醇、斯特维亚菊萃取物等甜味剂；柠檬酸、苹果酸等酸味剂；香精、增粘多糖类等通常食品中添加的原料。
如上所述，本发明的乳清蛋白食品将乳清蛋白所具有的奶臭与涩味、收敛味消除，成为更美味、更容易摄取的食品。添加到其它食品中时，与乳清蛋白单独的粉末相比，吸水性变佳。而且，因天然素材的着色看起来有美味的感觉。如果将其形状制成颗粒状，则吸水性进一步提高，容易与液状食品或糊状食品混合。
发明方案8本发明的课题在于提供可以更简便地改善对于水的分散性的来自乳的蛋白质。
本发明人等为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现通过向来自乳的粉末或颗粒状蛋白中混合粉末状非凝固性不溶解物，可以改善粉末蛋白的水分散性，通过进一步混合难消化性糖类，可以进一步改善分散性，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)水分散性优异的蛋白组合物，其特征在于该组合物含有来自乳的粉末或颗粒状蛋白和粉末状非凝固性不溶解物。
2)上述1)的蛋白组合物，其中上述粉末状非凝固性不溶解物为纤维素类。
3)上述1)或2)的蛋白组合物，其中上述来自乳的粉末或颗粒状蛋白为乳清蛋白。
4)上述1)～3)中任一项的蛋白组合物，该组合物还含有难消化性糖类。
根据本发明，可以使来自乳的粉末或颗粒状蛋白容易分散在水或饮料、咖啡等中，再添加到酸乳酪等糊状食品中时也容易混合、分散。另外，粉末状非凝固性不溶解物也大多具有食物纤维的作用，还可以期待整肠作用或改善便秘的效果。若进一步含有难消化性糖类，不仅有助于改善水分散性，而且可以期待整肠作用、促进矿物质吸收作用、抗龋齿作用、抑制血液中胆固醇升高作用、改善肝功能作用等功能。
本发明中使用的粉末状非凝固性不溶解物可以举出除了豆腐渣、小麦麸子、脱脂大豆、纤维素等来自植物的之外，还可以是壳聚糖、硅胶、碳酸钙、碳酸镁等，对它们没有限定。特别是使用市售的アゼセル(旭化成工业公司制造)等微结晶纤维素或KCフロツフ(日本制纸ケミカル)等粉末纤维素等纤维素类可以得到高的效果。
对本发明中使用的来自乳的粉末或颗粒状蛋白没有限定，例如可以是脱脂粉乳、全脂粉乳、乳清粉末、乳蛋白、乳清蛋白、酪蛋白等。特别是乳清蛋白的氨基酸序列接近于人乳，营养价值丰富，包含全部必须氨基酸、吸收率非常好，而且支链氨基酸的含有率也高，因此更优选。乳清蛋白可以使用市售的乳清蛋白，例如可以是乳清蛋白浓缩物(WPC)、乳清蛋白分离物(WPI)、脱盐乳清粉等。
优选使粉末状非凝固性不溶解物在蛋白组合物中混合1～50％质量。若少于1％质量则分散性的改善效果不充分，若多于50％质量则蛋白含量相对减少，粉末蛋白的价值变薄。
本发明的蛋白组合物若进一步含有难消化性糖类则可以进一步改善对水的分散性。难消化性糖类只要是作为食品可以使用的难消化性糖类即可，可以使用任意一种糖类。例如可以是果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、大豆低聚糖、半乳低聚糖、大豆低聚糖、木低聚糖、密三糖、异麦芽酮糖(帕拉金糖)、黑低聚糖、龙胆低聚糖、海藻糖、偶合糖(coupling sugar)、果胶、环糊精等低聚糖；山梨糖醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇、还原异麦芽酮糖、乳糖醇、甘露糖醇、木糖醇等糖醇；菊糖；难消化性糊精；抗性淀粉等。这些糖可以使用通常的市售品。本发明中难消化性糖类是指机体内的消化酶难以消化的糖类，所以被玉米蛋白、麦胶蛋白等プロミラン或硬化油脂包覆的易消化性糖类，在这里也可以作为难消化性糖类使用。
通过添加难消化性糖类，不仅可以改善分散性，而且还可以期待整肠作用、促进矿物质吸收作用、抗龋齿作用、抑制血液中胆固醇升高作用、改善肝功能作用等功能。另外，如果乳清蛋白选择来自乳的粉末或颗粒状蛋白，乳清蛋白中的抗体可以增强被动免疫，另一方面，难消化性糖类成为肠内双歧杆菌的增殖因子，该双歧杆菌作用于消化道免疫系统使主动免疫活化，因此通过同时摄取乳清蛋白和难消化性糖类，可以使被动免疫和主动免疫同时激活，期待强的免疫活化作用。
本发明的蛋白组合物，可以含有高甜度甜味剂、酸味剂、香精、乳化剂、增粘多糖类等通常食品中所添加的食品原料或食品添加物原料。
粉末蛋白与粉末状非凝固性不溶解物或消化性糖类等的混合方法可以利用通常的粉末混合的方法，例如可以是利用V型、水平圆筒型、垂直螺杆型、双层圆锥型混合机等的混合方法。
本发明的蛋白组合物可以是粉末的组合物，但为颗粒状时可以进一步提高分散性。可以事先将粉末蛋白颗粒化，将所得颗粒状蛋白与粉末状非凝固性不溶解物或难消化性糖类等混合，也可以将粉末蛋白与粉末状非凝固性不溶解物或难消化性糖类等混合后，进行颗粒化。另外，还可以将粉末蛋白与粉末状非凝固性不溶解物或难消化性糖类等混合，颗粒化后，再制成混合有粉末蛋白、粉末状非凝固性不溶解物、难消化性糖类等的组合物。
发明方案10本发明的课题在于提供具有更强的整肠作用的乳清蛋白食品。
本发明人等进行了深入研究，结果发现通过同时摄取乳清蛋白与低聚糖和水溶性食物纤维三者，可以得到更强的整肠作用，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白与低聚糖和水溶性食物纤维，和2)上述1)的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
根据权利要求54的发明，乳清蛋白本身也可以发现整肠作用，但通过同时摄取低聚糖和水溶性食物纤维，可以发挥乳清蛋白、低聚糖和水溶性食物纤维的协同效果，可以提供发挥更强的整肠作用的食品。根据权利要求55的发明，可以提供混合在其它食品中摄取时分散性好的乳清蛋白食品。
本发明中，使用的乳清蛋白原料乳可以是牛、山羊、绵羊、马等任一种哺乳动物的乳。该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳。
这些来自乳的乳清蛋白，可以是通常市售的来自牛乳的乳清蛋白，也可以使用上述发明方案4的乳清蛋白。
乳清蛋白中残存有来自原料鲜乳的抗体。所述乳清蛋白中所含的抗体也对本发明乳清蛋白食品的整肠效果做出贡献。因此，本发明中使用的乳清蛋白优选含有0.5％质量以上的抗体。
本发明中使用的低聚糖为人体内的消化酶难消化的二糖类-十糖类，只要是通常在食品中使用的低聚糖均可使用。作为它们的例子，例如可以是果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、麦芽低聚糖、异麦芽低聚糖、大豆低聚糖、半乳低聚糖、大豆低聚糖、木低聚糖、密三糖、水苏糖、异麦芽酮糖(帕拉金糖)、黑低聚糖、龙胆低聚糖、海藻糖、偶合糖(coupling sugar)、果胶低聚糖、海藻酸低聚糖、瓜尔胶低聚糖、岩藻糖低聚糖、环糊精等。
本发明中，食物纤维是指不被人体内的消化酶分解的不消化的碳水化合物、是超过十个分子的糖类结合而成的物质，不同于难消化性糖类。食物纤维大致可区分水溶性食物纤维和水不溶性食物纤维，本发明中使用水溶性的食物纤维。水溶性食物纤维例如可以是果胶、瓜尔胶、サイリウム、半乳甘露聚糖、木聚葡糖、刺槐豆胶、葡甘露聚糖、聚葡萄糖、可溶性半纤维素、海藻酸钠、硫酸软骨素、低分子海藻酸、低分子瓜尔胶、长纤维(フアイバロン)等。含有这些水溶性食物纤维的食品素材例如可使用琼脂、豆类加工品、薯类加工品等。
本发明的乳清蛋白食品相对于100质量份乳清蛋白，优选含有5～1000质量份低聚糖、5～1000质量份水溶性食物纤维。低聚糖、水溶性食物纤维的含量不足5质量份则整肠效果不充分，而超过1000质量份则乳清蛋白的含量变低，摄取乳清蛋白的目的难以达到。
如果将本发明的乳清蛋白食品的形状制成颗粒状，要与其它食品、特别是水分含量多的食品混合摄取时，可以提高乳清蛋白食品的分散性，容易与其它食品混合。乳清蛋白的水分散性差，本发明中，由于含有低聚糖和食物纤维，因此与乳清蛋白单独时相比分散性有所改善。但是，若制成颗粒状添加到牛乳或酸乳酪等其它食品中，则分散性进一步改善，不形成“面疙瘩”，变得容易混合。
上述低聚糖成为颗粒化时的粘结剂，还可以添加CMC(羧基甲基纤维素)或糖等作为粘结剂。颗粒化可以利用喷雾造粒法、挤出造粒法等通常的方法来进行。对颗粒的大小也没有限定，优选平均粒径为0.02～2mm左右。
本乳清蛋白食品可以含有甜味剂、酸味剂、香精、增粘多糖类等通常食品中所添加的原料。
对本发明的乳清蛋白食品的形态没有限定。例如除了上述的颗粒之外，可以是片剂、糖果、粉末、胶囊剂，还可以是糊状、液状。乳清蛋白添加后，只要是不进行使抗体失活等的加热加工工序，可以制成任一种加工食品的形态。
发明方案14本发明人等为了解决上述课题对各种的食品素材进行了筛选，结果发现通过向乳清蛋白中添加选自抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末、番茄粉末的粉末，可以减低乳清蛋白所具有的乳臭或涩味、收敛味的同时，改善吸水性，使在牛乳等液状食品或酸乳酪等糊状食品中混合时的“面疙瘩”状态短时间内消除，并且因来自天然素材的色素的着色而看起来美味和愉悦，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白和选自抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末、番茄粉末的粉末，其中粉末相对于100质量份乳清蛋白为1～900质量份。
2)权利要求56的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
根据本发明，通过添加规定量选自抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末、番茄粉末的粉末，可以减低乳清蛋白所具有的乳臭或涩味、收敛味，改善风味，而且，通过改善吸水性，在液状食品或糊状食品中混合时，面疙瘩状态消除，容易混合。并且，抹茶、芦荟粉末的绿色，郁金粉末、南瓜粉末的黄色，红葡萄果汁粉末、番茄粉末的红色可以打动食用者的视觉，引起食欲，赋予愉悦与变化。通过制成颗粒状，进一步提高吸水性，可以更容易与其它液状食品或糊状食品混合、容易食用。
本发明中，乳清蛋白可以使用通常的市售品，也可以使用上述发明方案4的乳清蛋白。
本发明中，使用的乳清蛋白原料乳可以是牛、山羊、绵羊、马等任一种哺乳动物的乳。该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳。
本发明中，抹茶可以使用通常的市售品。通过将抹茶添加到乳清蛋白中，抹茶所具有的苦味可以消除乳清蛋白所具有的乳臭与涩味、收敛味，同时抹茶所具有的风味和绿色的色调通过乳清蛋白食品而赋予其美味的感觉。另外，添加抹茶可以提高吸水性，与液状食品或糊状食品容易混合。抹茶的风味和色调特别可以打动高龄者的嗜好，是优选的乳清蛋白食品。
本发明中，芦荟粉末可以使用通常的市售品。通过将芦荟粉末添加到乳清蛋白中，芦荟粉末所具有的苦味可以消除乳清蛋白所具有的乳臭与涩味、收敛味，同时芦荟粉末所具有的风味和绿色的色调通过乳清蛋白食品而赋予其美味的感觉，另外，添加芦荟粉末可以提高吸水性，与液状食品或糊状食品容易混合。
本发明中，郁金粉末可以使用通常的市售品。通过将郁金粉末添加到乳清蛋白中，郁金粉末所具有的苦味可以解消乳清蛋白所具有的乳臭与涩味、收敛味，同时郁金粉末所具有的风味和黄色的色调通过乳清蛋白食品而赋予其更美味的感觉，另外，添加郁金粉末可以提高吸水性，与液状食品或糊状食品容易混合。
本发明中，南瓜粉末可以使用通常的市售品。通过将南瓜粉末添加到乳清蛋白中，南瓜粉末所具有的略微甜味可以消除乳清蛋白所具有的乳臭与涩味、收敛味，同时南瓜粉末所具有的风味和黄色的色调通过乳清蛋白食品而赋予其美味的感觉，另外，添加南瓜粉末可以提高吸水性，与液状食品或糊状食品容易混合。
本发明中，使用的红葡萄果汁粉末可以由通常市售的葡萄果汁制备。对成为原料的红葡萄没有限定。通过将红葡萄果汁粉末添加到乳清蛋白中，红葡萄果汁粉末所具有的鞣酸成分可以消除乳清蛋白所具有的乳臭与涩味、收敛味，同时红葡萄果汁粉末所具有的风味和红色的色调通过乳清蛋白食品而赋予其更美味的感觉。而且，吸水性提高，与液状食品或糊状食品容易混合。
本发明中，使用的番茄粉末可以使用通常的市售品。通过将番茄粉末添加到乳清蛋白中，番茄粉末所具有的独特味道可以消除乳清蛋白所具有的乳臭与涩味、收敛味，同时番茄粉末所具有的风味和红色的色调通过乳清蛋白食品而赋予其更美味的感觉。另外，添加番茄粉末可以提高吸水性，与液状食品或糊状食品容易混合。
本发明的乳清蛋白食品相对于100质量份乳清蛋白，含有1～900质量份选自抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末、番茄粉末的粉末。如果上述粉末的含量不足1质量份，则乳清蛋白所具有的乳臭或涩味、收敛味的降低效果和吸水性的改善效果不充分，着色也不充分。另一方面，如果超过900质量份则乳清蛋白的含量变低，摄取乳清蛋白的目的难以达到。
优选本发明的乳清蛋白食品的形状为颗粒状，这与上述发明方案4同样。与液状食品或糊状食品的混合变得容易。
上述粉末中包含分别来自植物的糖、淀粉、纤维，颗粒化时这些成分成为粘结剂，还可以添加CMC(羧基甲基纤维素)或糖等作为粘结剂。颗粒化可以利用喷雾造粒法、挤出造粒法等通常的方法来进行。
本发明的乳清蛋白食品可以含有蔗糖、赤藓糖醇、斯特维亚菊萃取物等甜味剂；柠檬酸、苹果酸等酸味剂；香精、增粘多糖类等通常食品中添加的原料。
本发明的乳清蛋白食品具有上述同样的优点。
发明方案5本发明的课题在于提供可以仅使用现有的制造设备即可制备在制备工序中抗体的热失活少、可提高抗体残存率的乳清蛋白的方法。
本发明人等进行了深入研究，结果发现在乳清蛋白的制备工序中，通过添加糖可以抑制抗体因热而引起的失活，仅使用现有的制造设备就可以提高抗体的残存率，从而完成了本发明。
即，本发明如下。
1)乳清蛋白的制备方法，其特征在于该方法为通过在乳清蛋白制备工序中的至少一个环节添加糖，提高抗体的残存率；2)上述1)的乳清蛋白的制备方法，该方法为在鲜乳加热灭菌前添加糖；
3)上述1)的乳清蛋白的制备方法，该方法为在乳清加热前添加糖；4)上述2)或3)的乳清蛋白的制备方法，其中糖为乳糖；5)上述1)的乳清蛋白的制备方法，该方法为在乳清蛋白干燥前添加糖；6)上述5)的乳清蛋白的制备方法，其中糖为难消化性糖类；和7)上述1)～6)的乳清蛋白的制备方法，其中抗体的残存率为原料乳中所含抗体的70％以上。
根据本发明可以提供乳清蛋白的制备方法，该方法为仅使用现有的制造设备，通过在乳清蛋白的制备工序中添加糖，可以提高抗体的热稳定性，抑制热失活，使鲜乳中的抗体残存率高。在鲜乳加热灭菌前或乳清加热前添加乳糖作为糖，可以发挥其效果，添加的乳糖可以在乳糖的分离工序中进行回收。而且，通过在乳清蛋白干燥前添加难消化性糖类作为糖，可以制备抗体的稳定性得到提高，同时可以期待抗体所具有的免疫活化功能和难消化性糖类所具有的生理功能的协同作用的乳清蛋白。并且，若使作为原料使用的鲜乳中所含的抗体残存70％以上，则可以得到抗体浓度高的乳清蛋白，要摄取一定量的抗体时所需乳清蛋白的量少，容易摄取抗体。
乳清蛋白是在由动物的乳或脱脂乳制造干酪或酪蛋白时作为副产品而得到的乳清中的蛋白质，通常，经过如图2所示的各种工序来制造。图2表示代表性的工序图，本发明中所说的乳清蛋白的制造工序不限定于图2所示的工序。例如，也包含在灭菌乳中接种乳酸菌使其发酵，然后添加粗凝乳酶，分离凝固的凝乳(干酪)和干酪乳清的工序等。乳清也称为ホエ-(乳清)，图2中也记作ホエ-。上述的现有乳清蛋白的制造设备通常是图2所示的用于制造WPC或WPI的设备，例如不包含色谱装置等使抗体浓度提高的特别设备。
本发明中，作为乳清蛋白原料的鲜乳可以是牛、山羊、绵羊、马、水牛等任一种哺乳动物的乳。该乳可以是从接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳，也可以是从未接受过疫苗接种的哺乳动物采集的乳。优选使这些鲜乳中的抗体的70％以上保持活性状态残存于乳清蛋白中。
本发明的特征在于通过在乳清蛋白制备工序的至少其中一个工序中添加糖可以提高抗体的残存率，除了添加糖之外，可以与如图2所示工序的现有的乳清蛋白制备方法同样地进行制备。本发明中，添加的糖只要是乳糖、难消化性糖类、葡萄糖、果糖、蔗糖、异构化糖、糊精等作为食品使用的糖即可，均可使用。对这些糖的添加方法没有限定。通过添加糖可以抑制因加热而引起的抗体的热失活，使所得乳清蛋白中的抗体残存量得到提高。
糖的添加量优选设定为与本来所含糖合在一起的糖含量在6.5％质量以上，进一步优选设定为糖含量在6.5～12.5％质量的范围内。例如，添加到鲜乳中时，由于鲜乳中含有4.5％的糖，糖的添加量2～8％质量成为最优选的添加量。如果糖含量不足6.5％质量则抑制抗体损失的效果不充分。另一方面，如果超过12.5％质量则可能由于糖种类的不同存在糖沉淀的现象。
图3表示在鲜乳中添加0～8％质量乳糖，在65℃加热30分钟时的抗体残存率。乳等的法规中(关于乳和乳制品的成分标准等的法规)中，作为鲜乳加热灭菌的规定，规定了通过保持的方法在63℃加热灭菌30分钟或者利用具有与该条件同等以上的灭菌效果的方法进行加热灭菌。由于鲜乳中含有4.5％质量乳糖，横坐标表示与该量合在一起的乳糖含量。相对于不添加乳糖时抗体残存率不足80％，添加乳糖可以提高抗体的热稳定性、抑制灭菌工序中的抗体损失，可以提高所得乳清蛋白中的抗体残存率。
本发明的糖的添加时期可以在如上所述的乳清蛋白制备工序中的任一工序中添加，优选在伴随加热的工序之前添加中。具体而言，优选添加到图2中1～9(图2中用带圆圈儿数字表示。以下，同样)所示的任一时期。以下，按照工序对糖的添加时期和优选的糖种类加以说明。
首先，可以是图2中1所示的在鲜乳的加热灭菌之前添加。是对鲜乳进行清洁处理或成分调整等处理，然后在通过HTST灭菌法(高温瞬时灭菌法，72～75℃、15秒)、LTLT灭菌法(低温长时间灭菌法，65℃、30分钟)等的灭菌之前添加的情形。
使用灭菌乳，利用通常的方法可以进行之后的干酪、酪蛋白凝乳或酪素等的制造，可以从上述中分离得到干酪乳清、酸乳清或酪素乳清等乳清。
其次，作为添加时期，在上述1的时期没有添加时，根据需要可以将分离的乳清(图2中，乳清)在加热前(图2的2、3和4)添加。
上述的情形(图2中的1和2～4所示时期的任一时期)中，如果使用乳糖作为添加的糖则可以抑制抗体的热失活，同时添加的乳糖在之后的工序中可以与鲜乳中所含的乳糖一起被回收，因此经济方面也有效，优选。
然后，根据需要从加热的乳清(溶液)中分离乳清蛋白溶液，对该分离或馏分的方法没有限定。例如可以是超滤法、离子交换法、精密滤法等。根据需要还可以进行浓缩。
另外，对干燥乳清蛋白溶液的方法没有限定。例如可以是喷雾干燥法、冷冻干燥法等。可以在该干燥之前(图2中的5、6、7、8、9所示的时期)添加糖。通过添加糖可以抑制干燥中的抗体损失。
在乳清蛋白溶液的干燥之前添加时，作为添加的糖优选难消化性糖类。难消化性糖类成为肠内双歧杆菌的增殖因子，该双歧杆菌作用于消化道免疫系统，使主动免疫活性化。另一方面，乳清蛋白中的抗体可以增强被动免疫，因此通过同时摄取难消化性糖类和乳清蛋白，可以使主动免疫和被动免疫同时激活，期待强的免疫活化作用。另外，由于难消化性糖类还具有整肠作用、促进矿物质吸收作用、抗龋齿作用、抑制血液中胆固醇升高作用、改善肝功能作用等功能，所以结合免疫活化作用，还可以期待它们的作用，所以可以期待提高了残存率的抗体的作用与这些作用发挥协同的效果。
难消化性糖类可以使用上述发明方案4中使用的物质。
实施例以下列举实施例进一步详细地说明本发明，但本发明并不受这些实施例的限定。实施例编号与上述发明方案编号相对应。
按下述表1-1所示配比(数值为质量比)制备5种类的乳清蛋白·可可食品和不含可可粉的乳清蛋白食品(比较例1-1)用于比较。表1中，Proliant(注册商标)8000为乳清蛋白(WPC，James Farrell & Co.制备)。
表1-1

(风味改善的评价)将制备的各20g乳清蛋白·可可食品与6g蔗糖添加到加热至65℃的市售的100ml超高温灭菌牛乳(以下简称为“牛乳”)中，对均匀混合的物质通过10名专业评味者按照5分法进行感官评价。另外，将各20g乳清蛋白·可可食品与6g蔗糖添加到100ml冷水中，对均匀混合的物质也进行同样地评价。表1-2表示它们的平均分。分数高的表示风味良好。实施例与比较例相比均为高得分，即，5种乳清蛋白·可可食品均为乳清蛋白的风味得到改善的食品。
表1-2

在实施例1-1～1-5中，将添加有可可粉的乳清蛋白·可可食品与食用蔗糖一起加入到65℃的牛乳和冷水中，与乳清蛋白单独的粉末相比均不容易形成“面疙瘩”状态，吸水性得到了改善。
将实施例1-5中所示配比的40g乳清蛋白·可可食品与12g蔗糖加入到200ml 65℃的牛乳中时，不容易形成“面疙瘩”状态，可以容易地分散混合，全量均可以美味地饮用。
将实施例1-1中所示配比的乳清蛋白·可可食品通过喷雾造粒法进行颗粒化。当将该40g颗粒状乳清蛋白·可可食品加入到200ml冷的牛乳中时，可以迅速吸水、分散混合。
按下述表2-1所示配比(数值为质量比)制备5种类的乳清蛋白食品。表2-1中，Proliant(注册商标)8000为乳清蛋白(WPC，James Farrell&Co.制备)。此外，越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末、草莓粉末均为(株)常磐植物化学研究所制备。
表2-1

(风味改善的评价)将制备的各5质量份乳清蛋白食品添加到市售的95质量份原味酸乳酪中，使其均匀，和添加到市售的95质量份超高温灭菌牛乳(以下简称为“牛乳”)中，使其均匀，通过10名专业评味者按照5分法进行感官评价。其平均分如表2-2所示。分数高的表示风味良好。实施例均为高得分，即，4种乳清蛋白食品均为乳清蛋白的风味得到改善的食品。
表2-2

本实施例中，将添加有越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末、草莓粉末的乳清蛋白食品加入到酸乳酪中用于食用时，与乳清蛋白单独的粉末相比均不容易形成“面疙瘩”状态，吸水性得到了改善。
将实施例2-1～2-4中所示配比的乳清蛋白食品通过喷雾造粒法制成颗粒状的乳清蛋白食品。分别将5质量份这些颗粒状乳清蛋白食品的加入到95质量份牛乳中时，均可以迅速吸水并沉降、分散混合在牛乳中。
将实施例2-4中所示配比的4g乳清蛋白食品加入到100g酸乳酪中时，不容易形成“面疙瘩”状态，可以容易地分散混合，可以美味的食用全量。
将作为乳清蛋白的ミラクテ-ル80(森永乳业(株)制备)在蔗糖与CMC(羧基甲基纤维素)的等量混合物中10倍分散，一边用流化床造粒机将品温调节到65℃一边制成颗粒状，以此作为便臭改善剂，用于以下的效果试验。该颗粒的抗体含量为0.5％质量。
(效果试验)作为被试验者，将20名男女(21～30岁12名；31～40岁4名；41～60岁4名)分成4组(每组5名)，试验组1为将5g实施例1中得到的颗粒(便臭改善剂，内含抗体25mg)、试验组2为10g(内含抗体50mg)、试验组3为20g(内含抗体100mg)，将其悬浮在100ml水中，每天早餐后饮用上述悬浮液。另外，对照组是每天早餐后将10g蔗糖与CMC的等比例(质量)粉末悬浮在100ml水中使其饮用。
对饮用前、饮用开始3天后、7天后的便臭按5阶段(0几乎没有臭味、1有轻度的臭味、2一般、3臭、4很臭)进行感官评价，求出其平均值。其结果如表1所示。
表3-1

从表3-1可知，各试验组的便臭得到了改善。特别是试验组2、试验组3的便臭改善效果显著。试验期间中，试验组的多数被试验者放屁的臭味也得到了改善，排便也得到了改善。
将作为乳清蛋白的8质量份ミラクテ-ル80(森永乳业(株)制备)与作为果低聚糖的2质量份メイオリゴCR(明治制果(株)制备)混合，用流化床造粒机一边将品温调节到65℃一边制成颗粒状，以此作为便臭改善剂，用于以下的效果试验。该颗粒的抗体含量为4.0％。
(效果的试验)作为被试验者，特别选择大便臭味强的4名男性(61-67岁)，以此作为试验组4，将5g实施例3-2中得到的颗粒(便臭改善剂，内含抗体200mg)悬浮在100ml水中，每天早餐后让试验组4饮用。然后，对饮用前、饮用开始3天后、7天后的便臭与实施例3-1的效果试验同样地按5阶段进行感官评价。其平均值如表3-2所示，个人的评价分作成图表如图1所示。
表3-2

表3-2和图1与表3-1进行对比可知，大便臭味强的人便臭改善的效果高。特别是其中1名通过服用7天200mg抗体，使便臭从很臭的水平(4)改善到几乎没有臭味的水平(0)。
以下列举实施例进一步具体地说明本发明，但本发明并不受这些实施例的限定。实施例中，抗体量的测定按照下面的方法。
(抗体量的测定法)取100mg乳清蛋白或含抗体颗粒化乳清蛋白食品，将其溶解在50ml磷酸缓冲液(50mM，pH6.8)中，搅拌2小时以上，然后将其中10ml以上用0.45μ膜滤器过滤。
另一方面，利用50mM磷酸缓冲液(pH6.8)平衡蛋白G柱(Amersham，HiTrap Protein G HP 1ml)，将用膜滤器过滤的10ml试样过柱，用该缓冲液(pH6.8)洗涤，然后用100mM甘氨酸盐酸缓冲液(pH2.7)使抗体洗脱。
测定洗脱液在280nm下的吸光度，1％抗体浓度时的吸光度为14，由此换算试样中的抗体浓度，然后计算乳清蛋白或含抗体颗粒化乳清蛋白食品中的抗体量。
(测定乳清蛋白中的抗体含量)按照上述测定方法，测定市售的乳清蛋白中的抗体含量时，ミラクテ-ル80(森永乳业(株)制备)、TATUA 902(タツアジヤパン(株))、Proliant 8000(James Farrell & Co.)分别为50mg/g、42mg/g、55mg/g。
利用下述表1所示配比(数字为质量比)制备5种类的乳清蛋白食品，测定了其1g中的抗体含量(mg)。表4-1中，Proliant(注册商标)8000为乳清蛋白(WPC，James Farrell & Co.制备)、メイオリゴ(注册商标)P为果低聚糖(明治制果(株)制备)、オリゴメイト(注册商标)55P为不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖(ヤクルト药品工业(株)制备)、乳果オリ ゴ(注册商标)LS-55P为乳果低聚糖(盐水港精糖(株)制备)、ミルクオリゴ为乳果糖(森永乳业(株)制备)、イソマルト(注册商标)900P为异麦芽低聚糖(日研化成(株)制备)。
表4-1

(风味改善的评价)将制备的各10质量份乳清蛋白食品添加到市售的90质量份原味酸乳酪中，使其均匀，还添加到市售的90质量份超高温灭菌牛乳(以下简称为“牛乳”)中，使其均匀，对其通过10名专业评味者以5阶段(1不佳、2略微不佳、3一般、4稍好、5好)进行感官评价。求出其平均值。其平均分如表2所示。实施例均为高得分，即，5种乳清蛋白食品的乳清蛋白的风味均得到改善。
表4-2

本实施例中，添加有果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖的乳清蛋白食品，加入到酸乳酪中用于食用时，与乳清蛋白单独的粉末相比均不容易形成“面疙瘩”状态，吸水性得到了改善，分散性良好。
将实施例4-1、实施例4-2、实施例4-3中所示配比的乳清蛋白食品通过流化床造粒机使品温调节到65℃进行造粒，制成颗粒状的乳清蛋白食品。将10质量份该颗粒状乳清蛋白食品加入到90质量份牛乳中时，可以迅速吸水并沉降、分散在牛乳中。
将干酪乳清(蛋白含量0.6％)浓缩，分离结晶的乳糖，得到乳清蛋白溶液。将其用固体含量换算，相对于100质量份乳清蛋白，添加10质量份トレハ(注册商标)(林原商事(株)制备的海藻糖)，喷雾干燥可以得到抗体含量为55mg/g的乳清蛋白食品的粉末。将5g该乳清蛋白食品加入到100g番茄饮料中时，迅速溶解，得到含有275mg抗体的番茄饮料。该番茄饮料的风味没有感觉到乳臭或涩味等。
将100质量份ミラクテ-ル80、20质量份菊糖富士FF(富士日本精糖(株)制备)、2质量份聚谷氨酸(明治制果(株)制备)、1质量份琥珀酸单甘油酯混合，利用流化床造粒机使品温调节到65℃进行造粒，得到抗体含量为40mg/g的颗粒状乳清蛋白食品。将5g该颗粒状乳清蛋白食品分散到100g酸乳酪中时，迅速均匀分散，得到含有200mg抗体的酸乳酪。该酸乳酪的风味没有感觉到えぐみ等。
将100质量份TATUA902与5质量份赤藓糖醇混合，利用流化床造粒机使品温调节到70℃进行造粒，得到抗体含量为38mg/g的颗粒状乳清蛋白食品。将5g该颗粒状乳清蛋白食品加入到100g冷咖啡中时，迅速溶解，得到含有190mg抗体的咖啡饮料。该咖啡饮料的风味没有感觉到えぐみ等。
将100质量份Proliant 8000与1000质量份メイオリゴ(注册商标)CR(明治制果(株)制备的果低聚糖)混合，得到抗体含量为5mg/g的乳清蛋白食品。将5g该乳清蛋白食品分散到100g豆乳中时，迅速均匀分散，得到含有25mg抗体的豆乳饮料。该豆乳饮料的风味没有感觉到乳臭或えぐみ等。
(抗体量的测定法)利用蛋白G柱从抗牛IgG兔免疫血清(ヤガイ制备)中分馏吸附馏分，以此作为一次抗体，HRP标记抗牛IgG抗体(コスモバイオ制备)作为二次抗体，用通常的方法通过ELISA进行定量。作为抗体标品，利用蛋白G柱按照常规方法对从牛的初乳中所得乳清粉末进行3次吸附洗脱，然后透析去除低分子馏分，使用所得蛋白G吸附馏分，用该标品求出标准曲线，测定试样中的抗体浓度。
相对于100L鲜乳(乳脂肪3.4％、抗体含量0.21mg/ml)添加2.0kg乳糖，将其在72℃下加热15秒钟进行灭菌。之后，利用通常的方法离心得到脱脂乳，添加乳酸进行酸性化后，压榨、分离酪蛋白凝乳，得到酸乳清，通过超滤分离乳糖，喷雾干燥得到乳清蛋白(WPC)。该乳清蛋白的抗体含量为57mg/g，从原料乳中所含的抗体量进行换算，其中的70％残存。

实施例5-1中所用的鲜奶不添加乳糖，利用与实施例5-1同样的方法处理，得到乳清蛋白(WPC)。该乳清蛋白的抗体含量为15mg/g，从原料乳中所含的抗体量进行换算，仅残存了其中的19％。
鲜乳在72℃下加热灭菌15秒钟，由该部分抗体已经损失的灭菌乳制造干酪，得到副产品干酪乳清(蛋白含量0.8％)。相对于100L该干酪乳清添加5.0kg乳糖，在65℃下洗涤、在53℃下超滤处理，分离乳糖。将其进行喷雾干燥得到乳清蛋白(WPC)。该乳清蛋白的抗体含量为70mg/g。
实施例5-2中所用的干酪乳清不添加乳糖，利用与实施例5-2同样的方法处理，得到乳清蛋白(WPC)。该乳清蛋白的抗体含量为38mg/g。
利用离子交换法从实施例5-2所用干酪乳清中得到乳清蛋白溶液。相对于100L该乳清蛋白溶液添加8.0kg果低聚糖，喷雾干燥得到乳清蛋白(WPI)。该乳清蛋白的抗体含量为62mg/g。
实施例5-2中所用的干酪乳清不添加果低聚糖，利用与实施例5-3同样的方法处理，得到乳清蛋白(WPI)。该乳清蛋白的抗体含量为9mg/g。
鲜乳在65℃下加热灭菌30分钟，按照常规方法，由部分抗体已经损失的该灭菌乳制造酪蛋白凝乳，得到副产品酸乳清(蛋白含量0.9％)。利用超滤法从该酸乳清中得到乳清蛋白溶液(该乳清蛋白溶液中含有3.5％质量乳糖)。相对于100L该乳清蛋白溶液添加3.0kg海藻糖，喷雾干燥得到乳清蛋白(WPC)。该乳清蛋白的抗体含量为60mg/g。
实施例5-4中所用的酸乳清不添加海藻糖，利用与实施例5-4同样的方法处理，得到乳清蛋白(WPC)。该乳清蛋白的抗体含量为42mg/g。
a)胶原对牛进行的免疫将2mg鸡II型胶原(コンドレツクス公司)溶解于1ml 0.05M乙酸中，制备2mg/ml的胶原乙酸溶液。将其与同量的2倍浓度的磷酸缓冲生理盐水(PBS)混合成为2ml，将其中1ml加入到1ml TiterMaxgold中，充分搅拌制成乳剂。选4头妊娠牛，将2ml乳剂注射到每头牛颈部皮下进行免疫，每1ml分注2处，分别在预产前60天、30天、生产后30天、60天注射，共4次。
b)大肠菌O-111B4菌株对牛进行的免疫使大肠杆菌O-111B4菌株在普通琼脂平板培养基上培养增殖，加入1％福尔马林及生理盐水溶液，取出，在80℃下加热灭菌1小时。洗涤加热菌液，然后将浊度调节为在660nm下吸光度为1.0。将1ml菌液加入到1ml TiterMax gold中，充分搅拌制成乳剂。选3头妊娠牛，将每1ml该菌液注射到每头牛的头皮下，分别在预产前60天、30天，共进行2次。
c)从鸡II型胶原免疫牛的初乳、大肠菌O-111B4菌株免疫牛的初乳中制备乳清将在上述a)、b)中免疫的各牛在生产后3天内的鲜乳挤出并收集。对其中的8升在20000g下离心30分钟，除去脂肪层得到脱脂乳。将脱脂乳在62.5℃加热灭菌30分钟，然后加入盐酸使pH值为4.6，通过在20000g下离心30分钟除去酪蛋白，然后加入氢氧化钠溶液使pH值为7.0，冷冻干燥，分别得到干燥物707g、780g。
抗LPS牛抗体的特异纯化在实施例1c)中制备的大肠杆菌免疫牛乳清中含有0.25％大肠杆菌内毒素O-111的抗体。将其调制成在50L磷酸缓冲生理盐水中含有1％的溶液，加到500ml的O-111固相亲和柱上、洗涤、pH2.8洗脱、中和后，进一步用蛋白G柱浓缩纯化，得到抗原特异抗体580mg。
抗鸡II型胶原牛抗体的特异纯化在实施例1c)中制备的由鸡II型胶原免疫牛的初乳而调制的乳清中含有0.6％鸡II型胶原的抗体。将其调制成在30L磷酸缓冲生理盐水中含有1％的溶液，加到500ml的O-111固相亲和柱上、依次洗涤柱、pH2.8洗脱、中和后，进一步用蛋白G柱浓缩纯化，得到抗原特异抗体930mg。
抗LPS牛抗体对小鼠抗胶原·单克隆抗体混合物引起的关节炎发病模型中的关节炎发病的阻止效果注射给予4mg小鼠关节软骨胶原的单克隆抗体(关节炎用鸡尾酒，コンドレツクス公司)则小鼠发生关节炎，第2天关节的肿胀最大。然而，减少关节炎用鸡尾酒的量，为2mg时关节炎完全不发病。可是，当该口服给予小鼠大肠杆菌LPS(E.Coli O-111B4 Sigma，3mg/每小鼠/每日，关节炎用鸡尾酒投药日为0日，大肠杆菌LPS给予日分别在0、1、2日)时，小鼠发生关节炎，第6天关节的肿胀达到最高。将一组3只6周龄BALB/c雄性小鼠作为一组，设定关节炎用鸡尾酒组、关节炎用鸡尾酒与LPS口服并用组、关节炎用鸡尾酒与LPS口服再口服抗LPS抗体的3组，通过测定双爪容积来评价关节炎的肿胀。在LPS给药日使抗LPS抗体即实施例6-2所示的纯化特异抗体以3mg/每小鼠/每日进行口服摄取。结果如表6-1所示。
表6-1

如表6-1所示，口服LPS的促进关节炎发病效果受到口服特异纯化的抗LPS抗体的阻止。
抗型胶原抗体和抗LPS抗体对长期口服鸡II型胶原、LPS引起的小鼠关节炎发病的阻止效果在鸡II型胶原中加入LPS，口服给予小鼠，与II型胶原单独给予组相比使抗体生成和关节炎发病增强(K.Terato等.Br J.Rheum.35，828-838，1996)。因此，使用DBA/1小鼠分别研究所对应的抗体对关节炎发病的抑制作用。将关节炎易发系的6只DBA/1雄性6周龄小鼠作为一组，设定胶原(鸡II型胶原、コンド レツクス公司)单独组、胶原中加入LPS(E.Coli O-111B4 Sigma)组和在上述中进一步添加抗胶原抗体(实施例6-3)、抗LPS抗体(实施例6-2)进行给予的组，经过14周、2周为一个周期，进行4个周期的口服免疫。为了促进胶原、LPS的口服吸收，口服免疫期间的口服给予是包括对照组1在内的所有组中均加入40μg吲哚美辛，口服给予的总容积为0.4ml。在16周的第1天眼底采血得到血清后，为了使之在一周内发生关节炎，口服给予LPS诱发关节炎。在各免疫周期的第1天和17周的第1天对关节肿胀(记载文献如表6-2)进行评点。动物组的构成与处置条件、足趾容积如表6-2所示。给予量为所有小鼠平均的口服给予量。
表6-2显示通过胶原和LPS的长期给予引起的口服致敏，即使在分别单独给药时也发生关节炎，如果同时给予上述两者则关节炎强烈发病。与此相对，将抗胶原抗体与抗细菌内毒素抗体(抗LPS抗体)结合使用可以阻止关节炎发病。
表6-2

*相对于对照组的显著差异p＜0.05；**p＜0.01@Fujii K等J Immunol Methods 1989；12463-70#Terato K等J Exp Med 1985；162637-46[实施例6-6]抗类风湿性关节炎治疗组合物准备通过市售的牛II型胶原、猪II型胶原免疫鸡而得到的总抗体量为50％抗体含量的鸡卵含抗体粉末以及由鸡II型胶原和市售大肠杆菌疫苗(imocoliv，ゼンノウ)免疫牛而得到的鲜乳总抗体含量为5％的乳清粉末，将它们以1∶9的比例混合，添加赋形剂，在约65℃的温度下、按照规定方法调节颗粒使总抗体含量为0.1％。
(抗体量的测定法)取100mg乳清蛋白或含有抗体的功能性组合物，将其溶解在50ml磷酸缓冲液(50mM，pH6.8)中，搅拌2小时以上，然后将其中10ml以上用0.45μ膜滤器过滤。另一方面，利用50mM磷酸缓冲液(pH6.8)平衡蛋白G柱(Amersham，HiTrap Protein G HP 1ml)，将上述用膜滤器过滤的10ml试样过柱，用该缓冲液(pH6.8)洗涤，然后用100mM甘氨酸盐酸缓冲液(pH2.7)使抗体洗脱。
测定洗脱液在280nm下的吸光度，1％抗体浓度时的吸光度为14由此换算试样中的抗体浓度，然后计算乳清蛋白或功能性组合物中的抗体量。
(测定乳清蛋白中的抗体含量)按照上述测定方法，测定市售的乳清蛋白中的抗体含量时，Proliant 8000(James Farrell & Co.制备)、含IgG浓缩乳清蛋白((株)アオテアロア)分别为50.0mg/g、166mg/g。
利用下述表7-1所示配比(数字为质量比)制备4种类的功能性组合物。表7-1中也同时显示了功能性组合物的抗体含量。在以下的试验中使用Proliant 8000作为比较例7-1、纳豆菌的冷冻干燥菌体作为比较例7-2、蘑菇属干燥粉末作为比较例7-3、啤酒酵母粉末作为比较例7-4、酪蛋白分解物作为比较例7-5、醇溶蛋白处理SOD作为比较例7-6(オキシカイン(注册商标)、イゾセル公司(法国)制备)。并且调制2种的免疫活化物质的组合物，用作比较例7-7。
表7-1
(对IgG抗体生成的作用)对6周龄的BALB/c系雄性小鼠1组6只，给予分别添加有1％质量实施例7-1～7-5、比较例7-1～7-5的混合饲料，喂养2周。对照例给予不添加任何物质的饲料，同样喂养。之后，用包含10μg卵白蛋白、1mg氢氧化铝的0.1ml生理盐水进行免疫，免疫的14天后从眼底静脉丛采血分离血清。该血清中的抗卵白蛋白IgG抗体(抗EAIgG)浓度如下求出。
即，向平底96孔微量反应板(Nunc，439454)中加入溶解于0.05M碳酸钠缓冲液(pH9.5)的50μl 0.1mg/ml的卵白蛋白溶液，4℃下过夜。用洗涤液(0.9％氯化钠、0.05％Tween20)洗涤后，加入200μl含有1mg/ml牛血清白蛋白的磷酸缓冲生理盐水(PBS)，37℃放置1小时进行封闭。洗涤后，加入利用含有10mg/ml牛血清白蛋白、0.05％Tween20、3％氯化钠的PBS(溶液A)稀释的上述血清，37℃放置1小时。洗涤后，加入通过溶液A稀释10000倍的50μl过氧化物酶标记抗小鼠IgG山羊抗体(生化学工业制备)的稀释液，37℃放置1小时，然后洗涤，加入100μl底物溶液(40mg邻苯二胺、20μl 30％过氧化氢/100ml枸橼酸-磷酸钠缓冲液)，室温放置，测定492nm的吸光度。
利用卵白蛋白与弗罗因德完全佐剂同时免疫的小鼠血清，由卵白蛋白结合琼脂糖4B亲和柱纯化IgG抗体，使用该抗体制作标准曲线求得抗体浓度。血清中的抗EAIgG浓度的测定结果(各组的平均值±标准偏差)如表7-2所示。
(对IgE抗体生成的作用)实施例7-6中采集的血清中的抗卵白蛋白IgG抗体(抗EAIgE)浓度如下求得。即，向平底96孔微量反应板(Nunc，439454)中加入溶解于PBS的50μl抗小鼠IgE抗体，4℃下放置过夜。用洗涤液(0.9％氯化钠、0.05％Tween20)洗涤后，加入200μl兔血清，37℃放置1小时进行封闭。洗涤后，加入利用含有1％兔血清、0.05％Tween20、3％氯化钠的PBS(溶液B)稀释的上述血清，37℃放置1小时。洗涤后，加入通过溶液B稀释的50μl结合有生物素的卵白蛋白稀释液，37℃放置1小时，洗涤后，加入通过溶液B稀释2500倍的50μl过氧化物酶标记抗生物素(西格马公司制备)的稀释液，37℃放置1小时，然后洗涤，加入100μl底物溶液(40mg邻苯二胺、20μl 30％过氧化氢/100ml枸橼酸-磷酸钠缓冲液)，室温放置，测定492nm的吸光度。该吸光度的值(各组的平均值±标准偏差)一并显示于表7-2中。吸光度与抗体浓度成正相关，吸光度大表示抗体浓度高。
从表7-2可知实施例与比较例相比，血清中的抗卵白蛋白IgG浓度增高，抗卵白蛋白IgE浓度降低。IgG参与机体防御病毒或细菌等的机制，IgE参与引起变应性症状的机制。IgG增高、IgE降低表示免疫体系的Th1/Th2平衡中Th1发挥优势作用，表示实施例7-1～7-5还较比较例7-1～7-7具有更健全的免疫调节作用。
表7-2

(对IL-12生成的影响)作为被试验者，将男女15名(21～30岁9名；31～40岁3名；41～60岁3名)分成3组(各组5名)，将比较例7-1、比较例7-2、实施例7-1的粉末每日10g悬浮在100ml水中，每天早餐后让各组分别饮用，连续饮用2周，对连续饮用前与连续饮用后诱导IL-12的生成进行如下的测定。
即，从各被试验者进行肝素采血，用HISTOPAQUE-1077(西格马公司制备)按照常规方法制备PBMC(Peripheral Blood MononuclearCells末梢血单核细胞)。利用添加有10％FCS(Fetal Calf Serum胎牛血清)的RPMI-1640培养基，将PBMC调整为2×106/ml，分注到24孔板上、每孔1ml。向其中添加0.01KE的OK-432，在CO2保温箱中37℃培养24小时，然后冷冻过夜。将其解冻，使用人IL-12 ELISA试剂盒(R&D Systems公司制备)测定培养上清中的IL-12浓度。结果(各组的平均值±标准偏差)如图4所示。
其中，已知IL-12是由巨噬细胞分泌的细胞因子“生理活性物质”，可激活直接攻击癌细胞的自然杀伤细胞(NK细胞)或杀伤-T细胞(CTL细胞)，又能增强干扰素(IFN-γ)的生成的非常强力的免疫活性物质。
OK-432是指作为“ピシバニ-ル-”(商品名，中外制药(株))市售的抗癌剂，是将化脓链球菌(A组3型)Su菌株在青霉素G的存在下、进行一定条件的处理、冷冻干燥而得到的菌体制剂。藤本等还将OK-432用作免疫活性测定时的刺激物质(触发点)(J.Immunol.Jun15；158(12)5619-26)。
从图4可知比较例7-1、比较例7-2中通过连续饮用，IL-12浓度上升，而连续饮用实施例7-1的组合物时IL-12浓度上升较比较例7-1、比较例7-2更大，认为免疫应答性变得更强。
(整肠作用的研究)作为被试验者，将男女15名(21～30岁9名；31～40岁3名；41～60岁3名)分成3组(各组5名)，将比较例7-1、比较例7-2、实施例7-1的粉末每日10g悬浮在100ml水中，每天早餐后让各组分别饮用，连续饮用2周，对连续饮用中的后一周进行有关排便的问卷调查。应说明的是，对连续饮用前的一周也进行同样的问卷调查。调查项目有(1)排便次数、(2)排便量、(3)粪便颜色、(4)粪便臭味，结果(各组的平均值±标准偏差)如表7-3所示。
(1)排便次数中，通过饮用比较例7-1、比较例7-2可见有次数增加的趋势，而饮用实施例7-1则显著增加。(2)对于排便量，通过饮用比较例7-1、比较例7-2、实施例7-1均未发现大的差异。(3)关于粪便颜色，通过饮用比较例7-1、比较例7-2可见颜色变得良好，而饮用实施例7-1则可以明显改善颜色。(4)粪便臭味，比较例7-1的改善效果较比较例7-2的大，而实施例7-1可以进一步大大改善粪便臭味。
汇总(1)～(4)，即使是比较例7-1、比较例7-2也可见一些整肠作用，而通过饮用实施例7-1的组合物可见明显的整肠作用，显示了抗体与菌体同时摄取的优势性。
表7-3中，(2)排便量是比作直径40mm的乒乓球的个数换算的数值的平均值；(3)粪便颜色是表示黄色0、淡土黄色1、土黄色2、棕色3、深棕色4的数值的平均值；(4)粪便臭味是表示几乎没有臭味0、有轻度的臭味1、一般2、臭味3、很臭4的数值的平均值。
表7-3

(分散性的测定法)将15℃的水加入到200ml玻璃烧杯中，使用磁力搅拌器(アドバンテツク公司制备SR200)，用刻度3边搅拌边添加试样，测定从试样添加后开始到试样均匀分散为止的时间。
按下述表8-1所示配比(数值为质量比)制备5种类的乳清蛋白组合物。表8-1中，乳清蛋白(WPC)使用了James Farrell & Co.制备的Proliant 8000。此外，アビセルRC-30为旭化成工业社制的微结晶纤维素、KC フロツクW-10MG为日本制纸ケミカル社制的粉末纤维素、メイオリゴCR为明治食品マテリア社制的结晶果低聚糖。
(分散性的测定)按照上述方法，测定实施例8-1～8-5、比较例8-1中制备的粉末蛋白组合物的分散性，结果如表8-2所示。组合物的添加量调整为蛋白的量相同。由分散时间可知实施例8-1～8-5分别与比较例8-1相比分散性均得到了改善。
表8-1


表8-2
(颗粒化1)按照实施例8-1的配比将乳清蛋白(WPC，粉末)与KCフロツクW-10MG混合，然后利用喷雾造粒法制备颗粒，同样进行分散性的测定，分散时间为2分00秒，分散性更加得到了改善。
(颗粒化2)使用采用喷雾造粒法进行颗粒化的乳清蛋白(WPC)，按照实施例8-1的配比(KCフロツクW-1 0MG为粉末)制备蛋白组合物，同样进行分散性的测定，分散时间为1分50秒，分散性进一步得到了改善。
(抗体量的测定法)与上述实施例4同样地进行测定。
(测定乳清蛋白中的抗体含量)与参考例4-1同样。
与实施例4-1～4-5、表4-1同样。
风味改善的评价与实施例4、表4-2同样。
与实施例4-6～4-8同样。
与实施例4-9同样。
与实施例4-10同样。
与实施例4-11同样。
与实施例4-12同样。
以下的实施例中，吸水性的测定按照下面的方法。
(吸水性的测定法)将5℃的牛乳加入到100ml玻璃烧杯中，使用磁力搅拌器(アドバンテツク公司制备SR200)，用刻度3边搅拌边添加试样使乳清蛋白含量为2.5g，测定从试样添加后开始到试样均匀分散为止的时间。
按下述表9-3所示配比(数值为质量比)制备5种类的乳清蛋白食品。表9-3中，WPC颗粒通过喷雾造粒法将Proliant 8000制成颗粒状(平均粒径为0.2mm左右)使用。对所得乳清蛋白食品和实施例9-6～9-8中使用的颗粒状(平均粒径为0.2mm左右)乳清蛋白食品(实施例9-18～9-20)，按照上述方法测定了各自的吸水性。其结果如表9-4、9-5所示。
表9-3

表9-4

表9-5

如表9-4、9-5所示的那样，通过在WPC颗粒中添加粉末的糖类，可以看到比仅WPC颗粒和WPC与糖混合而成的颗粒更加改善吸水性。
按下述表10-1所示配比(数值为质量比)制备3种类的乳清蛋白食品。表1中，Proliant(注册商标)8000为乳清蛋白(WPC，James Farrell& Co.制备)。メイオリゴ(注册商标)P为果低聚糖(明治制果(株)制备)。
表10-1

(双歧杆菌、产气荚膜梭状芽孢杆菌的测定法)双歧杆菌菌数的测定将BL琼脂培养基“ニツスイ”(日水制药(株))灭菌后，冷却至50℃，添加5％BS培养基用添加液(30％丙酸钠、6％氯化锂、0.1％硫酸巴龙霉素、0.1％硫酸新霉素)、5％马脱纤维血液，分注到培养皿上制成平板。用コンラ-ジ棒(CONRADISTICK)(接种环)涂布稀释的试样，在37℃下进行厌氧培养20小时，估算菌数。
产气荚膜梭状芽孢杆菌菌数的测定将含有卡那霉素的CW琼脂基础培养基“ニツスイ”(日水制药(株))灭菌，分注到培养皿上制成平板。用コンラ-ジ棒涂布稀释的试样，在37℃下进行厌氧培养20小时，估算菌数。
使实施例10-1、比较例10-1、比较例10-2的粉末按照表10-2所示的顺序各2周(总计6周)，各自1天10g悬浮在100ml水中，每天早餐后让3名被试验者饮用。对各2周中的后1周采取粪便。应说明的是，试验开始前的1周也采取了粪便。用上述方法测定这些粪便中的双歧杆菌菌数、产气荚膜梭状芽孢杆菌菌数，将各试验区的值平均。这些测定结果如图5的图表所示。
表10-2

如图5所示的那样，与试验开始前相比，摄取比较例10-1、比较例10-2的乳清蛋白食品则作为有益菌的双歧杆菌稍有增加，但是通过摄取实施例10-1的乳清蛋白食品而大大增加。另一方面，与试验开始前相比，摄取比较例10-1、比较例10-2的食品则作为有害菌的产气荚膜梭状芽孢杆菌减少，摄取实施例10-1的食品则进一步减少。
由上述可知，摄取实施例10-1所示的乳清蛋白食品比摄取比较例10-1、比较例10-2的食品可以大大改善肠内环境。
(整肠作用的研究1)作为被试验者，将男女15名(21～30岁9名；31～40岁3名；41～60岁3名)分成3组(各组5名)，将实施例10-1、比较例10-1、比较例10-2的乳清蛋白食品粉末每日10g悬浮在100ml水中，每天早餐后让各组分别饮用，连续饮用2周，对连续饮用中的后一周进行有关排便的问卷调查。应说明的是，对连续饮用前的一周也进行同样的问卷调查。调查项目有(1)排便次数、(2)排便量、(3)粪便颜色、(4)粪便臭味，结果(各组的平均值±标准偏差)如表10-3所示。
(1)排便次数中，通过饮用比较例10-1、比较例10-2的乳清蛋白食品粉末可见有次数增加的趋势，而饮用实施例10-1的食品则显著增加。(2)排便量通过饮用比较例10-1、比较例10-2、实施例10-1的食品均未发现大的差异。(3)粪便颜色通过饮用比较例10-1、比较例10-2可见颜色变得良好，而饮用实施例10-1的食品则可以明显改善颜色。(4)粪便臭味可以通过比较例10-1、比较例10-2改善，而实施例10-1可以进一步大大改善粪便臭味。
汇总(1)～(4)，即使是比较例10-1、比较例10-2的乳清蛋白食品也可见一些整肠作用，而通过饮用实施例10-1的乳清蛋白食品可见明显的整肠作用，显示了抗体、低聚糖和食物纤维三者同时摄取的优势性。
表10-3中，各数值含意如下。
(3)粪便颜色；0黄色、1淡土黄色、2土黄色、3棕色、4深棕色(4)粪便臭味；0几乎没有臭味、1有轻度的臭味、2一般、3臭味、4很臭表10-3
(整肠作用的研究2)将实施例10-1、比较例10-1的メイオリゴP置换为乳果糖制备乳清蛋白食品，进行与实施例10-2同样的试验时，得到与实施例10-2同样的结果，显示了抗体、低聚糖和食物纤维三者同时摄取的优势性。
(整肠作用的研究3)将实施例10-1、比较例10-1的メイオリゴP置换为海藻糖制备乳清蛋白食品，进行与实施例10-2同样的试验时，得到与实施例10-2同样的结果，显示了抗体、低聚糖和食物纤维三者同时摄取的优势性。
(整肠作用的研究4)将实施例10-1、比较例10-2的果胶置换为海藻酸钠制备乳清蛋白食品，进行与实施例10-2同样的试验时，得到与实施例10-2同样的结果，显示了抗体、低聚糖和食物纤维三者同时摄取的优势性。
(整肠作用的研究5)将实施例10-1、比较例10-2的果胶置换为葡甘露聚糖制备乳清蛋白食品，进行与实施例10-2同样的试验时，得到与实施例10-2同样的结果，显示了抗体、低聚糖和食物纤维三者同时摄取的优势性。
(抗体量的测定法)利用蛋白G柱从抗牛IgG兔免疫血清(ヤガイ制备)中分馏吸附馏分，以此作为一次抗体，HRP标记抗牛IgG抗体(コスモバイオ制备)作为二次抗体，用通常的方法通过ELISA进行定量。
(大肠杆菌、大肠杆菌菌群数的测定法)使用ESコリマ-ク琼脂培养基(荣研器材(株)制)测定。
(金黄色葡萄球菌数的测定法)使用食盐卵琼脂基础培养基(ニツスイ(株)制)。
(利斯特氏菌的鉴定法)利用牛津(オツクスフオ-ド)琼脂培养基(Difco)直接分离培养，对产生的菌落进行鉴定试验。
(抗体的分离)将牛的初乳离心除去脂肪成分，向该脱脂乳中添加盐酸，在pH值为4.6的条件下使酪蛋白沉淀、去除。向上清中添加氢氧化钠使pH值为7.0，然后冷冻干燥，得到初乳乳清粉末。将该初乳乳清粉末再溶解，利用蛋白G柱按照常规方法进行3次吸附洗脱，然后透析去除低分子馏分得到蛋白G吸附馏分，以此作为牛乳中的抗体标品。使用该标品求出标准曲线，测定试样中的抗体浓度。
(对乳酸菌发酵除菌的确认1)得到鲜乳、利用ELISA法测定抗体量时得知该鲜乳中含有151μg/ml抗体。大肠杆菌菌群数为20/ml、金黄色葡萄球菌数为50/ml。向该1L鲜乳中加入50ml事先培养的乳酸菌(干酪乳杆菌，Lactobacillus casei)发酵剂，在37℃下使之发酵15小时时，得到了具有良好风味的酸乳酪。测定该酸乳酪中的抗体量时得知该酸乳酪中含有144μg/ml抗体，在发酵中抗体没有发生损失。另外，大肠杆菌菌群数、金黄色葡萄球菌数均变成10/ml以下(检出下限以下)，确认了通过乳酸菌可以去除大肠杆菌菌群、金黄色葡萄球菌。
应说明的是，鲜乳中不添加乳酸菌发酵剂在37℃下放置15小时时，大肠杆菌菌群数变成1.1×107/ml、金黄色葡萄球菌变成2.3×106/ml。
(对乳酸菌发酵除菌的确认2)
在与实施例11-1中使用的相同鲜乳中按50/ml的浓度添加大肠杆菌。在该1L添加大肠菌的鲜乳中添加88％乳酸液(ベ-ガン通商(株)制备)，使pH值为5.8，再添加1％甘油。向其中加入50ml事先培养的乳酸菌(路氏乳杆菌，Lactobacillus reuteri)发酵剂，在37℃下使之发酵24小时时，大肠杆菌数、大肠杆菌菌群数、金黄色葡萄球菌数均变成10/ml以下(检出下限以下)，确认了通过乳酸菌可以去除这些菌。另外，该酸乳酪虽然酸味稍强但风味好。
(对乳酸菌发酵除菌的确认3)得到其它的鲜乳、分析利斯特氏杆菌时得知该鲜乳中利斯特氏杆菌为阳性。向该1L鲜乳中加入20ml事先培养的乳酸菌(粪肠球菌，Enterococcus faecalis)发酵剂、20ml双歧杆菌(Bifidobacteriumbifidum)发酵剂，在37℃下使之发酵20小时时，利斯特氏杆菌变成阴性。另外，大肠杆菌数、大肠杆菌菌群数、金黄色葡萄球菌数也变成10/ml以下(检出下限以下)，确认了这些菌已灭活。
分别向1L超高温灭菌(130℃、2秒钟)牛乳、低温灭菌(66℃、30分钟)牛乳、未灭菌的鲜乳中各加入20ml事先培养的乳酸菌(干酪乳杆菌，Lactobacillus casei)发酵剂，在37℃下使之发酵15小时，得到酸乳酪。将上述酸乳酪在冰箱内冷却后，让20岁年龄层的女性10人试食。选择认为最好吃的酸乳酪，对味道、风味进行评语。结果如下。
(选择认为最好吃的酸乳酪的人数)由超高温灭菌牛乳制作的酸乳酪(A) 0人由低温灭菌牛乳制作的酸乳酪(B)1人由未灭菌牛乳制作的酸乳酪(C) 9人(对各酸乳酪的评语)
(A)酸味强；略带煳味；味道不浓。
(B)略有ぽつたり感觉。味道醇和。
(C)味道浓厚且略带甜味。有独特的新鲜香味。
(抗体量的测定法)利用蛋白G柱从抗牛IgG兔免疫血清(ヤガイ制备)中分馏吸附馏分，以此作为一次抗体，HRP标记抗牛IgG抗体(コ スモバイオ制备)作为二次抗体，用通常的方法通过ELISA进行定量。作为抗体标品，利用蛋白G柱按照常规方法对从牛的初乳中所得乳清粉末进行3次吸附洗脱，然后透析去除低分子馏分，使用所得蛋白G吸附馏分，用该标品求出标准曲线，测定试样中的抗体浓度。
(测定乳清蛋白中的抗体量)按照上述测定方法，测定市售乳清蛋白中的抗体量，结果如下。
WPC(乳清蛋白浓缩物)3.9％WPI(乳清蛋白分离物)1.1％含IgG浓缩乳清蛋白14.5％[实施例12-1](含乳清蛋白发酵食品1)向市售的超高温加热(130℃、2秒钟)灭菌的1L牛乳中添加50g乳清蛋白、50gサンラクトN-5(太阳化学株式会社制备)。向其中加入50ml事先培养的乳酸菌(干酪乳杆菌，Lactobacillus casei)发酵剂，在37℃下使之发酵15小时时，得到具有良好风味的酸乳酪。在该1g酸乳酪中包含1.6mg的抗体和8×109个乳酸菌。
(含乳清蛋白发酵食品2)向市售的1L调制豆乳中添加100g乳清蛋白、100gミラクテ-ル80(森永乳业株式会社制备)。向其中加入50ml事先培养的乳酸菌(嗜酸乳杆菌，Lactobacillus acidphilus)发酵剂，在37℃下使之发酵15小时时，得到酸乳酪状的豆乳发酵食品。在该1g豆乳发酵食品中包含3.4mg的抗体和2×107个乳酸菌。
为了比较，在未添加乳清蛋白的1L调制豆乳中加入50ml事先培养的乳酸菌(嗜酸乳杆菌，Lactobacillus acidphilus)发酵剂，在37℃下使之发酵24小时时，与添加乳清蛋白的调制豆乳相比，固化度弱、脱水多。而且未能检测出抗体。
(含乳清蛋白发酵食品3)向市售的超高温加热灭菌的1L牛乳中加入50ml事先培养的乳酸菌(加氏乳杆菌，Lactobacillus gasseri)发酵剂，在37℃下使之发酵15小时。在该发酵液中添加25g含乳-IgG浓缩乳清蛋白((株)アオテアロア)和20ml蘑菇萃取物，充分搅拌，得到酸乳酪饮料。在该1g酸乳酪饮料中包含3.3mg的抗体和4×109个乳酸菌。
(含乳清蛋白的非发酵食品)将双歧杆菌(长双歧杆菌，Bifidobacterium Longum)在添加有0.2％浓度酵母萃取物的脱脂乳中培养。将该培养液冷却至5℃制成不发酵状态，将上述50ml与950ml市售的超高温加热灭菌的牛乳冷却至5℃而得到的冷却牛乳混合，并且添加25g含乳-IgG浓缩乳清蛋白((株)アオテアロア)，充分搅拌，得到非发酵饮料。在该1g非发酵饮料中包含3.5mg的抗体和3×107个双歧杆菌。
(含初乳的发酵食品)将0.9升一般鲜乳与0.1升挤出的牛的初乳进行混合，向其中加入50ml事先培养的乳酸菌(干酪乳杆菌，Lactobacillus casei)发酵剂，在37℃下使之发酵15小时，得到酸乳酪。在该1g酸乳酪中包含1.7mg的抗体和9×108个乳酸菌。
(抗体量的测定法)
利用蛋白G柱从抗牛IgG兔免疫血清(ヤガイ制备)中分馏吸附馏分，以此作为一次抗体，HRP标记抗牛IgG抗体(コスモバイオ制备)作为二次抗体，用通常的方法通过ELISA进行定量。作为抗体标品，利用蛋白G柱按照常规方法对从牛的初乳中所得乳清粉末进行3次吸附洗脱，然后透析去除低分子馏分，使用所得蛋白G吸附馏分，用该标品求出标准曲线，测定试样中的抗体浓度。
(测定乳清蛋白中的抗体量)按照上述测定方法，测定市售的乳清蛋白中的抗体含量时，サンラクトN-5(太阳化学(株))、ミラクテ-ル80(森永乳业(株))、ALACEN 392(フオンテラジヤパン(株))、TATUA 902(タツアジヤパン(株))分别为3.9％质量、3.9％质量、3.7％质量、3.8％质量。另外，含乳-IgG浓缩乳清蛋白((株)アオテアロア)的抗体含量为15.5％质量。
(含抗体的加工乳)向市售的超高温加热灭菌的1升牛乳中添加80g含乳-IgG浓缩乳清蛋白((株)アオテアロア)和20g果低聚糖、充分搅拌。此时的糖含量为6.2％质量。将其在65℃下进行30分钟的加热灭菌，得到含抗体的加工乳。在该1g含抗体加工乳中包含10.4mg来自乳的抗体，抗体的残存率为90％。
(含抗体的蔬菜果汁饮料)向400g葫萝卜汁、100g菠菜汁、300g番茄汁、150g苹果汁、30g含乳-IgG浓缩乳清蛋白((株)アオテアロア)中添加作为其它免疫活化成分的20g蘑菇萃取物、混合。此时的糖含量为4.3％质量。将其在60℃下加热灭菌30分钟，得到含抗体的蔬菜果汁饮料。在该1g含抗体蔬菜果汁饮料中包含2.4mg来自乳的抗体，抗体的残存率为52％。
(含抗体的豆乳饮料)向市售的1升豆乳饮料中添加100gサンラクトN-5(太阳化学(株))，充分搅拌时糖含量为4.5％质量。将其在65℃下进行30分钟的加热灭菌，得到含抗体的豆乳饮料。在该1g含抗体豆乳饮料中包含3.2mg来自乳的抗体，抗体的残存率为89％。
(含抗体的巧克力)将900g切碎的巧克力(含有糖56％质量)加热至90℃溶解，冷却至品温为70℃，加入100g乳清蛋白、ミラクテ-ル80(森永乳业(株))均匀混合，得到含抗体的巧克力。在该1g含抗体巧克力中包含3.6mg来自乳的抗体，抗体的残存率为93％。
(含抗体的冰淇淋)将2个卵黄与40g精制细砂糖充分混合，向其中添加150ml鲜奶油、50ml市售的超高温加热灭菌的牛乳、50ml水、15g乳清蛋白、ALACEN 392(フオンテラジヤパン(株))充分混合。此时的糖含量为13％质量。将其在60℃下加热灭菌30分钟，均匀添加香草精油、冷却后，在冰淇淋制造厂(东芝(株))成型。所得到的1g含抗体冰淇淋中包含1.7mg来自乳的抗体，抗体的残存率为97％。
(含抗体的果冻)将200ml市售的超高温加热灭菌的牛乳加热至60℃，添加50g砂糖和5g加少量水浸泡的明胶，进一步加热至95℃完全溶解。将其冷却至60℃，添加25g乳清蛋白TATUA 902(タツアジヤパン(株))，在不产生气泡的前提下快速搅拌，分注到果冻容器中。此时糖含量达到20％质量。之后，60℃的状态保持30分钟、灭菌，然后冷却至5℃，得到含抗体的果冻。在该1g含抗体果冻中包含3.2mg来自乳的抗体，抗体的残存率为92％。
(含抗体的加工干酪)将1kg天然干酪(切达干酪)细切，添加30g多磷酸钠和100g水，在80℃下加热10分钟使其熔融。冷却至品温为65℃，添加100g乳清蛋白サンラクトN-5(太阳化学(株)，充分混捏后装入容器进行成型。此时糖含量为1.4％质量。将其在60℃下加热灭菌30分钟，得到含抗体的加工干酪。在该1g含抗体加工干酪中包含3.2mg来自乳的抗体，抗体的残存率为96％。
(含抗体的可可饮料)使40g可可粉末、70g砂糖、25g赤藓糖醇、120g乳清蛋白ミラクテ-ル80(森永乳业(株))溶解在1升水中。此时糖含量为7.6％质量。在70℃下进行30分钟加热灭菌，得到含抗体的可可饮料。在该1g含抗体可可饮料中包含1.9mg来自乳的抗体，抗体的残存率为52％。
按下述表14-1所示配比制备6种类的乳清蛋白食品。表14-1中，Proliant(注册商标)8000为乳清蛋白(WPC，James Farrell & Co.制备)。另外，抹茶使用岛本(株)制备、芦荟粉末使用芦荟食品(株)制备的“キダチ芦荟粉末”、郁金粉末使用(株)冲绳市场制备的“秋郁金粉末”、南瓜粉末使用天然素材(株)制备、红葡萄果汁粉末使用アサマ化成(株)制备、番茄粉末使用サンブライト(株)制备的产品。
表14-1


(风味改善的评价)将制备的各5质量份乳清蛋白食品添加到市售的95质量份原味酸乳酪中，使其均匀，和添加到市售的95质量份超高温灭菌牛乳(以下简称为“牛乳”)中，使其均匀，通过10名专业评味者按照5分法进行官能评价。其平均分如表14-2所示。分数高的表示风味良好。实施例均为高得分，即，6种类的乳清蛋白食品均为乳清蛋白的风味得到改善的食品。
表14-2

本实施例中，将添加了抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末、番茄粉末的乳清蛋白食品加入到酸乳酪中用于食用时，与乳清蛋白单独的粉末相比均不容易形成“面疙瘩”状态，吸水性得到了改善。
通过喷雾造粒法将实施例14-1、实施例14-3中所示配比的乳清蛋白食品制成颗粒状乳清蛋白食品。将5质量份这些颗粒状乳清蛋白食品加入到95质量份牛乳中时可以迅速吸水沉降、分散在牛乳中。
实施例15与实施例4同样。
权利要求
1.功能性组合物，该组合物含有抗体和免疫活化物质作为有效成分。
2.权利要求1的功能性组合物，其中抗体为来自乳的抗体。
3.权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为乳酸菌、双歧杆菌以外的不产生毒素的细菌的菌体或菌体成分。
4.权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为霉菌·酵母的菌体或菌体成分。
5.权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为菇类的菌体或菌体成分。
6.权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为选自细菌、霉菌·酵母和菇类的菌类的菌体酶分解物。
7.权利要求1或2的功能性组合物，其中免疫活化物质为SOD。
8.类风湿性关节炎治疗剂组合物，该组合物以具有抗类风湿作用的抗体作为有效成分。
9.权利要求8的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中具有抗类风湿作用的抗体为抗II型胶原抗体。
10.权利要求9的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中抗II型胶原抗体为抗鸡II型胶原抗体、抗牛II型胶原抗体、抗猪II型胶原抗体的至少任一种。
11.权利要求8的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中具有抗类风湿作用的抗体为抗细菌内毒素抗体。
12.权利要求8的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中具有抗类风湿作用的抗体为将抗II型胶原抗体与抗细菌内毒素抗体以任意比例混合而得到的抗体。
13.权利要求8的类风湿性关节炎治疗剂组合物，其中该组合物含有抗II型胶原抗体和抗细菌内毒素抗体的至少任一种，总抗体量含有0.1％质量以上。
14.含有抗体的发酵食品的制造方法，其特征在于该方法无需将牛或牛以外的哺乳动物的鲜乳加热至63℃以上，在上述鲜乳中添加乳酸菌或双歧杆菌的一种或两种以上，使之发酵。
15.权利要求14的含有抗体的发酵食品的制造方法，该方法是在上述鲜乳中事先添加有机酸使pH值在5.8以下，然后添加乳酸菌或双歧杆菌的一种或两种以上。
16.权利要求14或15的含有抗体的发酵食品的制造方法，该方法为使上述鲜乳脱脂并发酵。
17.含有抗体的发酵食品，该食品是通过权利要求14～16的制备方法而得到的。
18.含有抗体的食品，其特征在于该食品含有1.5mg/g以上抗体和107/g以上选自乳酸菌和双歧杆菌的一种或两种以上的菌。
19.权利要求18的含有抗体的食品，该食品含有3mg/g以上抗体。
20.权利要求18或19的含有抗体的食品，其中抗体为乳清蛋白中的抗体。
21.权利要求18～20中任一项的含有抗体的食品，其中抗体为初乳中的抗体。
22.权利要求18～21中任一项的含有抗体的食品，该食品还含有具有其它免疫活化功能的成分。
23.含有抗体的明确的食品，其特征在于该明确的食品含有1.5mg/g以上来自乳的抗体，但是不含有107/g以上乳酸菌和双歧杆菌类。
24.权利要求23的含有抗体的明确的食品，该明确的食品含有3mg/g以上来自乳的抗体。
25.权利要求23的含有抗体的明确的食品，该明确的食品含有10mg/g以上来自乳的抗体。
26.权利要求23～25中任一项的含有抗体的明确的食品，其中来自乳的抗体为乳清蛋白中的抗体。
27.权利要求23～26中任一项的含有抗体的明确的食品，该明确的食品还含有来自乳的抗体以外的具有免疫活化功能的成分。
28.权利要求23～27中任一项的含有抗体的明确的食品，其中含有抗体的明确的食品为乳制品或冰点心。
29.权利要求28的含抗体的明确的食品的制造方法，其特征在于该方法为在50％以上抗体残存的条件下对含有来自乳的抗体的明确的食品或者该明确的食品的含有来自乳的抗体的部分进行加热灭菌。
30.权利要求29的含抗体的明确的食品的制造方法，该方法为使含有抗体部分的糖含量调节为7.5％质量以上进行加热灭菌。
31.乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白与糖、可可粉末、粉末状非凝固性不溶物、抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末、番茄粉末、越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末或草莓粉末。
32.权利要求31的乳清蛋白食品，该食品含有乳清蛋白和糖，其中糖相对于100质量份乳清蛋白为5～1000质量份。
33.权利要求32的乳清蛋白食品，其中糖为一种或两种以上的难消化性糖类。
34.权利要求32的乳清蛋白食品，其中难消化性糖类选自果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖。
35.权利要求31的乳清蛋白食品，该食品含有乳清蛋白和一种或多种选自果低聚糖、乳果低聚糖(乳蔗糖)、乳果糖、异麦芽低聚糖、不含α-半乳糖基键的半乳低聚糖的低聚糖，其中低聚糖相对于100质量份乳清蛋白为5～900质量份。
36.权利要求32～34中任一项的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
37.权利要求32～34中任一项的乳清蛋白食品，其中抗体或来自乳的抗体含量为5mg/g以上。
38.权利要求32～34中任一项的乳清蛋白食品，其特征在于抗体或来自乳的抗体含量为10mg/g以上。
39.权利要求32～34中任一项的乳清蛋白食品，其特征在于抗体或来自乳的抗体含量为50mg/g以上。
40.权利要求32～34中任一项的乳清蛋白食品，其中乳清蛋白为颗粒状，糖为粉末。
41.权利要求32～34中任一项的乳清蛋白食品，其中糖相对于100质量份乳清蛋白为30质量份以上。
42.便臭改善剂，其特征在于该便臭改善剂含有乳清蛋白。
43.权利要求42的便臭改善剂，该便臭改善剂以乳清蛋白中的抗体为有效成分。
44.权利要求42或43的便臭改善剂，该便臭改善剂包含0.5％质量以上的抗体。
45.权利要求42～44中任一项的便臭改善剂，该便臭改善剂还含有难消化性糖类。
46.权利要求31的乳清蛋白食品，该食品含有乳清蛋白和可可粉末，其中可可粉末相对于100质量份乳清蛋白为1～10000质量份。
47.权利要求46的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
48.权利要求31的乳清蛋白食品，该食品含有乳清蛋白和一种或多种选自越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末、草莓粉末的粉末，其中上述粉末相对于100质量份乳清蛋白为1～900质量份。
49.权利要求48的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
50.水分散性优异的蛋白组合物，其特征在于该组合物含有来自乳的粉末或颗粒状蛋白和粉末状非凝固性不溶解物。
51.权利要求50的蛋白组合物，其中上述粉末状非凝固性不溶解物为纤维素类。
52.权利要求50或51的蛋白组合物，其中上述来自乳的粉末或颗粒状蛋白为乳清蛋白。
53.权利要求50～52中任一项的蛋白组合物，该组合物还含有难消化性糖类。
54.乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白、低聚糖和水溶性食物纤维。
55.权利要求54的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
56.权利要求31的乳清蛋白食品，该食品含有乳清蛋白和选自抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末、番茄粉末的粉末，其中上述粉末相对于100质量份乳清蛋白为1～900质量份。
57.权利要求56的乳清蛋白食品，其中形状为颗粒状。
58.乳清蛋白的制备方法，其特征在于该方法通过在乳清蛋白制备工序中的至少一个环节添加糖，提高抗体的残存率。
59.权利要求58的乳清蛋白的制备方法，该方法在鲜乳的加热灭菌前添加糖。
60.权利要求58的乳清蛋白的制备方法，该方法在乳清加热前添加糖。
61.权利要求59或60的乳清蛋白的制备方法，其中糖为乳糖。
62.权利要求58的乳清蛋白的制备方法，该方法在乳清蛋白干燥前添加糖。
63.权利要求62的乳清蛋白的制备方法，其中糖为难消化性糖类。
64.权利要求58～63的乳清蛋白的制备方法，其中抗体的残存率为原料鲜乳中所含抗体的70％以上。
全文摘要
含有乳清蛋白、来自乳的抗体或抗体的功能性组合物或食品；乳清蛋白食品，其特征在于该食品含有乳清蛋白与糖、可可粉末、粉末状非凝固性不溶物、抹茶、芦荟粉末、郁金粉末、南瓜粉末、红葡萄果汁粉末、番茄粉末、越橘粉末、木莓粉末、乌饭树粉末或草莓粉末。
文档编号A23G1/00GK101052418SQ20058003256
公开日2007年10月10日 申请日期2005年9月27日 优先权日2004年9月29日
发明者矢岛瑞夫, 岩附聪, 盐野谷博, 寺户国昭, 赤松裕久, 铃木秀歌, 加藤雅通 申请人:浅间化成株式会社, 静冈县政府