专利名称：一种鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种生物技术，具体涉及的是采用生物技术手段制备鱼鳞胶原蛋白肽的方法。
(二)
背景技术：
胶原蛋白肽是一种重要的功能性蛋白质，它是胶原蛋白的水解产物，具有分子量低，易 吸收，低粘度等物理特性，它与细胞增生、分化、运动、免疫、关节润滑、伤口愈合等密切 相关，具有很强的生物活性。由于胶原蛋白肽的特殊功能，其提取物己被广泛应用于医药、 食品、日用化工、生物合成等工业领域。目前生产胶原蛋白制品的原料基本上是猪、牛等陆 生动物的皮和骨，由于陆生动物的生存环境恶化导致疯牛病等流行病的发生，使得从陆生动 物的皮、骨中提取的胶原蛋白的危险性增大，从而使其制品的使用受到限制。不少发达国家 已经禁止使用从牛皮和牛骨中提取的胶原蛋白。因此，从水生动物中提取安全、卫生、无害 的胶原蛋白成为这几年各国研究的一项热门课题。
近年来，随着养殖规模的日益扩大和养殖技术的不断完善，养殖鱼类的产量提高很快， 而鱼鳞中所含有的丰富胶原蛋白却未被利用。为充分利用我国现有的丰富的淡水鱼资源，提 高其商业价值，降低水产品食品的生产成本，最大限度地提高经济效益，本项目以鱼鳞为原 料，经高温蒸煮后进行胶体磨磨浆预处理，采用生物法进行水解，膜分离精致后，再经浓縮、 干燥制得胶原蛋白肽粉末。目前，传统的鱼加工业己不能实现鱼类资源的充分利用，大量的 鱼副产物被抛弃或作为粗饲料，鱼经屠宰、采肉后，出肉率仅为30%左右，而有60%以上为下 脚料，如果废弃掉这部分下脚料将是很大的浪费。我国对鱼鳞这一重要的鱼副产物的利用还 只是处于初级阶段，因此，开展低值淡水鱼的深加工的研究，提高副产品的附加值成为但今 研究热点。
(三)
发明内容
本发明目的在于提供一种制备工艺过程相对其他方法简单、制备的胶原蛋白肽可完全溶 解于水冷水，水溶液低粘度，在的高浓度下也有流动性，耐酸性能好，在酸、碱的情况下均 无沉淀耐高温性能好，IO(TC加热亦无沉淀的鱼鳞胶原蛋白肽制备方法。
本发明的目的是这样实现的
(1) 发酵种子培养基的制备1%大豆蛋白胨，0.5%牛肉粉，0.5%葡萄糖，0. 1%氯化钠， 0.01%磷酸二氢钾，其余为蒸馏水，12rC高温灭菌20分钟，冷却后备用；
(2) 发酵种子的制备以枯草芽孢杆菌CICC10071为出发菌株，接种于发酵种子培养基中， 35°C，摇床180r/m，培养48小时，发酵液中枯草芽孢杆菌〉l(f个/ml此时视同为发酵种子 培养成熟；(3) 鱼鳞处理过程将新鲜鱼鳞洗净、除杂，加入8倍鱼鳞重量的纯净水，经IO(TC蒸煮 30分钟，冷却至45。C一50'C，进入胶体磨超微粉碎，浆液透过60目筛网，然后进入发酵罐 121'C高温灭菌30分钟后冷却至35'C等待接种发酵；
(4) 保温发酵按发酵液体积的5%接种成熟种子，保温通风发酵60小时；
(5) 分离发酵结束后12rC灭菌10分钟，冷却至45'C — 5(TC分离除渣，取上清液准备精
致；
(6) 精致上清液经膜系统分离，将分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下 的小分子液体；
(7) 干燥将精致液进行真空浓縮至浓度40%左右，然后喷雾干燥得鱼鳞胶原蛋白肽粉末 成品。
本发明采用生物技术手段制备鱼鳞胶原蛋白肽，具体的说利用枯草芽孢杆菌发酵龟鳞然
后提取胶原蛋白肽的方法。胶原蛋白肽营养及生理功能主要有以下几方面1)蛋白质营养效 果，其消化吸收率几乎达100%; 2)保护胃粘膜以及抗溃疡作用；3)抑制血压上升作用；4) 促进骨形成作用；5)促进皮肤胶原代谢作用；6)其它还有对关节炎等胶原病具有很好的预 防及治疗作用。微生物发酵法生产鱼鳞胶原蛋白肽与酶法相比具有很大的优越性首先微生 物可以产生水解酶系作用于底物蛋白，分别切割多种肽键，使产物分子量现对较小，而酶法 只能作用于一种肽键，而使产物分子量较大，产品中肽的种类比较单一；其次微生物可以定 向修复由于疏水键暴露而产生的苦味集团，而酶法无论如何也达不到该项功能；另外微生物 发酵法与酶法相比可以大大降低水解成本。本发明所采用的菌种和水解工艺可以生产出质量
稳定，效果明显的鱼鳞胶原蛋白肽。
本发明制备的胶原蛋白肽可完全溶解于水冷水，水溶液低粘度，在的高浓度K也有流动 性，耐酸性能好，在酸、碱的情况下均无沉淀耐高温性能好，IOO'C加热亦无沉淀，由于其分 子量较小，所以更易被人体吸收。胶原多肽与植物性蛋白质相比，其吸收利用率更高。胶原 蛋白肽的多种些生理调节功能，使其在食品、化工、医疗、化妆品行业具有广泛的应用。综 上所述，胶原蛋白是动物体内含量最大的一种蛋白质，近年来因疯牛病恐慌以及穆斯林信仰 者的需求，寻找猪、牛皮和骨以外的胶原蛋白原料成为当务之急，而水产加工废弃物鱼鳞是 理想的替代原料。鱼鳞胶原蛋白肽的研究成功将对水产及水产品加工业的发展提供广阔的前 景。
(四)
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更详细的描述 实施例
1) 将枯草芽孢杆菌CICC10071进行扩大培养，待种子液中菌体含量108个/ml，视同为种
子成熟。
2) 将鱼鳞洗净、除杂后，加入8倍重量的纯净水10(TC蒸煮30分钟，然后进入胶体磨 粉浆，浆液透过60目筛网后进入发酵罐12rC、 30分钟高温灭菌，冷却后准备接种发酵。
3) 将成熟种子按鱼鳞浆液体积的5%接种，35'C保温发酵60小时后，12rC灭菌灭菌10 分钟，冷却至45'C—5(TC分离除渣，取上清液准备精致。
4)上清液经膜系统分离，将分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下的小 分子液体进行真空浓縮至浓度40%左右，然后喷雾干燥得鱼鳞胶原蛋白肽粉末成品。
权利要求
1、一种鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于(1)发酵种子培养基的制备1％大豆蛋白胨，0.5％牛肉粉，0.5％葡萄糖，0.1％氯化钠，0.01％磷酸二氢钾，其余为蒸馏水，121℃高温灭菌20分钟，冷却后备用；(2)发酵种子的制备以枯草芽孢杆菌为出发菌株，接种于发酵种子培养基中，35℃，摇床180r/m，培养48小时，发酵液中枯草芽孢杆菌＞108个/ml此时视同为发酵种子培养成熟；(3)鱼鳞处理过程将新鲜鱼鳞洗净、除杂，加入8倍鱼鳞重量的纯净水，经100℃蒸煮30分钟，冷却至45℃-50℃，进入胶体磨超微粉碎，浆液透过60目筛网，然后进入发酵罐121℃高温灭菌30分钟后冷却至35℃等待接种发酵；(4)保温发酵按发酵液体积的5％接种成熟种子，保温通风发酵60小时；(5)分离发酵结束后121℃灭菌10分钟，冷却至45℃-50℃分离除渣，取上清液准备精致；(6)精致上清液经膜系统分离，将分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下的小分子液体；(7)干燥将精致液进行真空浓缩至浓度40％左右，然后喷雾干燥得鱼鳞胶原蛋白肽粉末成品。
全文摘要
本发明提供了一种鱼鳞胶原蛋白肽制备方法。它是这样实现的(1)发酵种子培养基的制备；(2)发酵种子的制备；(3)鱼鳞处理过程；(4)保温发酵；(5)分离；(6)精致；(7)干燥，得鱼鳞胶原蛋白肽粉末成品。本发明的制备工艺过程相对其他方法简单、制备的胶原蛋白肽可完全溶解于水冷水，水溶液低粘度，在的高浓度下也有流动性，耐酸性能好，在酸、碱的情况下均无沉淀耐高温性能好，100℃加热亦无沉淀。
文档编号C12R1/125GK101240313SQ20081006407
公开日2008年8月13日 申请日期2008年3月7日 优先权日2008年3月7日
发明者滕春红, 成 陈 申请人:成 陈