专利名称：一种产酶益生菌及其生产方法
技术领域：
本发明涉及一种益生菌及其生产方法，尤其是一种含有产酶益生菌及其生产方法。
背景技术：
随着集约化养殖业的发展，畜禽生产过程中会出现各种疾病，为了治疗和预防这些疾病都是通过在饲料添加剂中大量使用抗生素，但是抗生素的长期大量使用，导致了畜禽消化道正常菌群失调，产生抗药性和免疫功能下降以及畜产品药物残留等副作用，已被人们所认识。
近年来，饲料科技领域对作为词料添加剂的益生菌的研究与开发方欣未艾。益生菌是指以蜡样芽孢杆菌、消化球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌和某些链球菌等益生菌为主要成分的饲料添加剂。益生菌对维持畜、禽等动物肠道的正常微生物区系，增强消化酶系活性，提高动物机体免疫能力有重要作用。实践证明，在饲料中添加一定量的益生菌活菌体，可显著提高肉、蛋、奶的产量，降低发病率和死亡率，且不产生抗药性。目前国内外益生菌主要采用深层发酵工艺，即液体发酵。这种工艺设备投资大，产品成本高，另一方面，现有益生菌一般只含益生菌，多为单菌制剂，产品中益生菌细胞数仅有5X10S个/克，细胞存活时间短，使用效果不够理想。
发明内容
本发明的目的，为大幅度提高益生菌产品中益生菌的含量，并延长其存活时间，改善发酵菌种种类，提高产品中的营养成份，同时改进生产工艺，降低投资，减少生产成本。
本发明是通过以下技术方案实现的， 一种含有产酶益生菌及其生产方法，它是按照重量比基本组成为芽孢杆菌DS-1、 Nl、 DM423， 10-25份，酪酸菌KXL， 5-10份,乳酸菌LP5-15份，乳酸链球菌L-948， 5-15份，丝状真菌Xi-3，10-20份，丝状真菌A-7， 10-25份，酵母菌YBB， 5-15份。
本发明的具体实施步骤如下一、菌种的培养
本发明采用三种益生菌即芽孢杆菌、酵母菌、嗜酸乳酸菌，其菌种培养方法
(一) 芽孢杆菌培养基(斜面固体培养基)
1、 固体(固体种子生产)
(1) 蛋白胨 2g—15g
(2) 牛肉膏 0.5g—10g
(3) 氯化钠0.5g—10g
(4) 琼脂 5g—40g
(5) 蒸馏水 1000mlPH 7.2
2、 液体(液体种子生产)
(1) 葡萄糖 0.5g—5g
(2) 鱼粉 O.lg—3g
(3) 豆粕 10g—50g
(4) 玉米面 3g—15g
(5) 麸皮 3g—15g
(6) 磷酸二氢钾 0.1g—1.2g
(7) 磷酸氢二钾 0.5g—10g
(8) 碳酸钙 0.001g—0.05g
(9) 蒸馏水 1000ml
(二) 酵母菌培养基(斜面固体培养基)1、固体(固体种子生产)
(1) 葡萄糖 10g—45g
(2) 蛋白胨 lg—15g
5(3) 酵母汁粉0.5g—10g
(4) 琼脂 lg—15g
(5) 蒸馏水 1000ml 2、液体(液体种子生产)
(1) 葡萄糖 10g_45g
(2) 蛋白胨 lg—15g
(3) 酵母汁粉0.5g_10g
(4) 蒸馏水 1000ml
(三)嗜酸乳酸杆菌培养基(斜面固体培养基)
1、 固体(固体种子生产)
(1) 蛋白胨 10g_45g
(2) 酵母提取液lg—14g
(3) 碳酸钙 3g—13g
(4) 葡萄糖 lg—15g
(5) 琼脂 5g—30g
(6) 脱脂牛奶 3g—15g
(7) 水 1000ml
2、 液体(液体种子生产)
(1) 蛋白胨 5g—45g
(2) 酵母提取液lg—15g
(3) 葡萄糖 lg—15g
(4) 脱脂牛奶 5g—30g
(5) 蒸馏水 1000ml
三种益生菌分别按常规灭菌、消毒，接种进行二级菌种培养， 一级斜面培养， 在30。C环境下培养24小时，二级三角瓶(液体)培养，在25。C-3(TC环境下培 养24-36小时。
二、固体发酵营养料豆粕10%，玉米淀粉2%，麸皮38%，混均匀，然后装入袋子，高压 灭菌15磅35分钟;把液体种子溶入50%水中，混均匀后接种到灭菌后的料子中， 然后装入发酵罐中进行48小时发酵，发酵罐内应在通风和无菌情况下进行。
四、产品配制
三种益生菌固体发酵后的三种物料按芽胞杆菌、酵母菌、嗜酸乳酸杆菌=1: 1: 1的比例混合配制成产品。
本发明一种产酶益生菌的生产工艺流程菌种斜面培养一液体培养一扩大培 养一固体发酵一低温干燥一配制产品一质检一包装。
本发明的产品主要质量标准本品为深褐色粉末，有益生菌的特殊气味，水
份《13%，灰分《7.8%，粗蛋白》18%，砷《0. 5%mg/kg，铅《1. 0mg/kg,益发菌总 数(出厂时)》15X108个/g，活菌比例(出厂后一年内)>85%。 本发明的优点是
1、 提高动物的生长性能。畜禽胃肠道菌群是在长期进化过程中形成并与畜 禽保持相对平衡稳定状态的菌群，它对畜禽的生长发育和抵抗疾病的能力具有重 要意义。当畜禽肠道微生物平衡失调时，畜禽出现生产性能下降和疾病症状，而 本发明利用动物正常生理菌群，经过选种和人工繁殖，制成活菌制剂，然后再以 投入方式使其回到原来环境，发挥自然的生理作用。其中的枯草芽孢杆菌、酵母 杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌能保持肠道内微生态平衡，使动物的生长发育处 于理想状态，达到动物的最大生产力。
2、 提高动物对饲料的消化率。该益生菌活性制剂可生产复合菌群，如产元 酵母、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌，所以能产生足够的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶， 降解植物饲料中蛋白质、脂肪和较复杂的碳水化合物，提高动物对词料的利用率。
3、 提高动物对疾病的抵抗能力，促进动物健康发育。益生菌有增强畜禽免 疫功能和生物抵抗作用，益生益能合成细菌素、有机酸、溶菌酶、过氧化氢等物 质。这些物质对不利菌有拮抗作用，如芽孢杆菌产生的细菌素(多肽物质)对大 肠杆菌和沙门氏杆菌有显著的抑制作用，又如嗜酸乳杆菌产生的挥发脂肪酸、乳 酸和过氧化氢，能对大肠杆菌和沙门氏杆菌有杀灭作用，投入动物体后能通过改善动物肠道菌群生态平衡而发挥有益作用，达到提高动物的生产性能、健康水平 和健康佳态的作用。动物饲喂添加该益生菌活性制剂的混合伺料后，动物抗病能 力显著提高。
4、改善肉品品质。其中枯草芽孢杆菌等可明显改善肉品品质。
具体实施例方式
一、 试管种子的制备
(一) 营养肉汁琼脂取蛋白胨10g，牛肉膏6g，食盐10g，琼脂30g，加 蒸馏水1000ml，调到ph7.0-7.5;然后制成斜面；
(二) 麦芽汁琼脂培养基浆发啤酒原料稀释到IO帕林，加琼脂30g/L，融 化后分装试管；
取分装好的试管放入高压锅内，15磅灭菌30分钟制成斜成； 取上述斜面，无菌条件下接种，然后培养48小时。
二、 液体种子的制备上述两种配方去琼脂即可，方法同上； 分装一灭菌一接种一培养48小时
三、 生产种子的制备
营养料豆粕10%、玉米淀粉2%、麸皮38%、预混均匀，然后装入袋子，高 压灭菌15磅35分钟；把液体种子装入50%水中，混均后接种到灭菌后的料子中， 然后装入发酵灌中进行发酵48小时即可；发酵灌内进行通风无菌情况下进行操 作。
四、 发酵成的生产益生菌进行烘干、分装成品，注意防潮，防污染。
权利要求
1、一种含有产酶益生菌及其生产方法，它是按照重量比基本组成为芽孢杆菌DS-1、N1、DM423，10-25份，酪酸菌K×L，5-10份，乳酸菌LP5-15份，乳酸链球菌L-948，5-15份，丝状真菌Xi-3，10-20份，丝状真菌A-7，10-25份，酵母菌YBB，5-15份。
2、 根据权利要求1所述的一种含有产酶益生菌及其生产方法，其生产方法是(1)菌种的培养本发明采用三种益生菌即芽孢杆菌、酵母菌、嗜酸乳酸菌，其菌种培养方法A、芽孢杆菌培养基(斜面固体培养基) a、固体(固体种子生产),① 蛋白胨② 牛肉膏③ 氯化钠④ 琼脂 蒸馏水PH,2g—15g 0.5g_10g 0.5g—10g 5g—40g 1000ml 7.2b、液体(液体种子生产)① 葡萄糖② 鱼粉③ 豆粕④ 玉米面 麸皮 ⑥磷酸二氢钾,0.5g—5g O.lg—3g 10g_50g,3g—15g.O.lg—1.2g⑦ 磷酸氢二钾0.5g—10g⑧ 碳酸钙 0.001g—0.05g⑨ 蒸馏水 1000mlB、酵母菌培养基(斜面固体培养基):a、固体(固体种子生产)① 葡萄糖② 蛋白胨③ 酵母汁粉 琼脂 蒸馏水.10g—45g lg—15g 0.5g—10g lg—15g 1000mlb、液体(液体种子生产)① 葡萄糖 10g—45g② 蛋白胨 lg—15g③ 酵母汁粉0.5g—10g④ 蒸馏水 1000mlC、 嗜酸乳酸杆菌培养基(斜面固体培养基)a、 固体(固体种子生产)① 蛋白胨 10g—45g② 酵母提取液lg—14g③ 碳酸钙 3g—13g 葡萄糖 lg—15g 琼脂 5g—30g⑥ 脱脂牛奶 3g—15g⑦ 水 1000mlb、 液体(液体种子生产)① 蛋白胨 5g—45g② 酵母提取液lg—15g③ 葡萄糖 lg—15g④ 脱脂牛奶 5g—30g⑤ 蒸馏水 1000mlD、 三种益生菌分别按常规灭菌、消毒，接种进行二级菌种培养， 一级斜面 培养，在30。C环境下培养24小时，二级三角瓶(液体)培养，在25。C-3(TC环 境下培养24-36小时；(2) 固体发酵营养料豆粕10%，玉米淀粉2%，麸皮38%，预均匀，然后装入袋子，高压 灭菌15磅35分钟；把液体种子溶入50%水中，混均匀后接种到灭菌后的料子中， 然后装入发酵罐中进行48小时发酵，发酵罐内应在通风和无菌情况下进行；(3) 产品配制三种益生菌固体发酵后的三种物料按芽胞杆菌、酵母菌、嗜酸乳酸杆菌=1: 1: 1的比例混合配制成产品。
3、根据权利要求1所述。的一种含有产酶益生菌及其生产方法，本发明的产品主要质量标准是本品为深褐色粉末，有益生菌的特殊气味，水份《13%，灰分《7.8%，粗蛋白》18%，砷《0. 5%mg/kg，铅《1. 0mg/kg，益发菌总数^15X 108 个/g。
全文摘要
一种含有产酶益生菌及其生产方法，它是按照重量比基本组成为芽孢杆菌DS-1、N1、DM423，10-25份，酪酸菌K×L，5-10份，乳酸菌LP5-15份，乳酸链球菌L-948，5-15份，丝状真菌Xi-3，10-20份，丝状真菌A-7，10-25份，酵母菌YBB，5-15份，本发明生产工艺流程菌种斜面培养→液体培养→扩大培养→固体发酵→低温干燥→配制产品→质检→包装，本发明的优点是它能够提高动物的生长性能，提高动物对饲料的消化率，提高动物对疾病的抵抗能力，促进动物健康发育，改善肉品品质。
文档编号C12R1/23GK101597586SQ200910144110
公开日2009年12月9日 申请日期2009年7月12日 优先权日2009年7月12日
发明者臧春云 申请人:阜阳市大北农饲料有限责任公司