专利名称：25-羟基-维生素d3用于影响人肌肉生理学的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及25-羟基维生素D3(麦角钙化固醇(CalCifediOl)，25-0HD3)用于提 高肌肉强度、肌肉功能或二者的用途。维生素D (胆钙化固醇(cholecalciferol)和/或麦 角钙化醇(ergocalciferol))可任选地与25-0H D3—起使用。
背景技术：
维生素D (例如麦角钙化醇和胆钙化固醇)是由其生物活性定义的一组脂溶性化 合物。维生素D缺乏在儿童中引起佝偻病，在成年人中引起骨软化症。但是，在数月慢性摄 入多于100倍推荐每日允许量(即5-15μg或200-600IU维生素D)后可能发生毒性。对维 生素D而言，“毒性阈值是每日500到600mcg/kg体重。通常，成年人不应长期消耗多于RDA 的三倍，，(Garrison & Somer, The Nutrition Desk Reference, Third Ed. , McGraw-Hill, pg. 82，1997)。在大于375nmol/L 25-羟基维生素D的血浓度下可发生血钙过多。更近来地， 安全的维生素D上限水平被鉴定为至少250 μ g/天(10，000IU) (Hathcock等，Am. J Clin. Nutr. 85 6-18,2007)。这样的膳食补充剂的摄入已显示导致约200nmol/L 25-羟基维生素 D3的血浓度。维生素D是一种激素原，其必须在肝中被羟基化，产生25-羟基维生素D (麦角钙 化固醇，25-0H维生素D ;25-0H D)，其随后在肾和其它组织中经历另外的羟基化，产生维生 素D的活性激素形式——1，25- 二羟基维生素D。1，25- 二羟基维生素D被释放进血液中， 与维生素D结合蛋白(DBP)结合，并被转运至目标组织。1，25-二羟基维生素D和维生素D 受体之间的结合允许复合物在细胞核中发挥转录因子的作用。维生素D缺乏可促进骨的再吸收。其也可调控心血管、免疫和肌肉系统的功能。流 行病学研究发现了维生素D摄入及其对血压或葡萄糖代谢影响之间的关联。维生素D的活 性受甲状旁腺激素的负反馈控制。维生素D和25-0H D3 二者过去均作为药物被施用。维生素D当然是可广泛获得 的，25-0H D3之前在美国由Organon USA以名称〃 CALDER0L"出售，但是现在在FDA的停 止供应的药品(discontinued drug)列表上。其为含有玉米油和25-0H D3的明胶胶囊。25-0H D3的液体形式目前在西班牙由FAES Farma以名称〃 HIDR0FER0L"在油性 溶液中出售。维生素D和25-0H D3的组合已经在动物饲料中使用。用于饲料中的25-0H D3可 以从DSM以名称〃 R0VIMIX HY-D"商业获得。Tritsch等(US 2003/0170324)公开了一种饲料预混物组合物，其至少包含以5% 和50% (wt/wt)之间的量溶于油中的25-0H D3，和抗氧化剂、包封25-0H D3和油微滴的试 剂，和营养添加剂(例如维生素D3)。预混物可以被添加至家禽、猪、狗或猫的食物。该组合 物使25-0H D3稳定化以抵挡氧化。Simoes-Nunes等(US 2005/0064018)公开了向动物饲料添加25-0H维生素D3和 维生素D3的组合。具体地，向猪饲料中添加约10 μ g/kg到约100 μ g/kg的25-0H维生素 D3和约200IU/kg到约4，000IU/kg的维生素D3。这种添加促进猪的骨强度。
Stark等(US 5，695，794)公开了对家禽饲料添加25-0H维生素D3和维生素D3的 组合，来改善胫骨软骨发育不良的影响。Borenstein等US 5，043，170公开了维生素D3和1_ α -羟基胆钙化固醇或1 α， 25-羟基胆钙化固醇的组合用于在下蛋的母鸡和老母鸡中改善蛋强度和腿强度。Chung等，WO 2007/059960公开了用含维生素D3以及25-羟基维生素D3的膳食 饲喂的母猪(SOW)具有改善的一般健康状态、身体轮廓(body frame)、产仔数和健康和其 它生产参数。还公开了 25-0H D3人食物补充剂，但是其剂量范围(5-15微克/kg体重)非 常高，等于每人300-900微克的极高的每日剂量。PCT/EP08/006357公开了将小猪在出生前暴露于25-0H D3(通过饲喂怀孕的母 猪)增强了幼仔中的肌肉发育。就我们所知，现有技术没有教导或者暗示25-羟基维生素D3或25-0HD3与维生素 D的组合作为用于提高肌肉强度、肌肉功能或二者的人用药物的用途。其它优点和改进描述 于下文，或将从本文的公开内容明显得知。
发明内容
根据本发明已经发现，与消耗相同剂量的维生素D相比，每日或每周用25-0H D3 进行治疗令人惊讶地导致肌肉强度和/或功能的改善。因此，本发明的一个方面是使用25-0H D3作为药物来提高人的肌肉强度和/或功 能。药物可任选地还包含维生素D。人可以是任何年龄，包括儿童和青少年(juveniles)， 从出生开始到成年，和从18岁到80岁的年龄，或大于80岁的年龄。本发明还公开了药物 组合物的形式和剂量，以及用于制造药物的方法。本发明的另一方面是25-0H D3和维生素D的组合用于增强人肌肉强度和功能的 用途。任选地，维生素D3可以与25-0H D3—起施用或单独施用。它们可以每日一次、每 周一次或每月一次地施用。通常，施用持续时间至少为1个月，优选地大于2个月，更优选 地至少4个月，使得能够清楚地观察到肌肉强度的改变。可以使用本领域公认的测试，如膝 屈肌和伸肌强度测试来测量强度。在另一方面中提供了通过施用有效量的25-0H D3来提高肌肉功能的方法。任选 地，维生素D可以与25-0H D3—起施用或单独施用。它们可以每日一次、每周一次或每月 一次地施用。可以通过本领域公认的测试，如重复坐-立测试(r印eated sit-to-stand test)和计时的起立行走测试(timed up and go test)来评价肌肉功能。在另一方面中提供了适用于人的药物组合物，所述药物组合物以增强肌肉的量包 含维生素D3、25-0H D3、可药用载剂。另外，已经发现根据本发明，25-0H D3和维生素D的组合协同调节(上调或下调) 协同数量的维生素D应答骨骼肌基因，包括大量对独自存在的维生素D或25-0H D3任一不 应答的基因。这是令人惊讶的结果，因为目前的维生素D代谢模型不能解释，所述目前的维 生素D代谢模型假定事实上所有维生素D都首先被代谢成为25-0H D。根据本发明的组合提供了两个显著的优点1)其导致迅速且协同的25-0H D血浆应答
2)其导致出乎意料地显著和长期的血浆25-0H D水平平台期。这些是治疗由维生 素D缺乏导致的肌肉病症的特别重要的目标快速纠正非最适的维生素D状态和稳定的血 浆浓度，以确保对肌肉组织供应足量的25-0H。本发明的另一方面是适合维持人肌肉强度和功能的食物、功能性食物、食物补充 剂或营养药物，其包含25-0H D3，优选地包含维生素D和25-0H D3的组合。附图
概述^！展示了对后肢去负荷(unloaded) ( "HU组”)和处理组(维生素D3、25_0H D3 或其组合)而言，差异表达的鼠基因探针组的维恩图(Verm Diagram)。Ml展示了 25-OH D3处理组和使用25-0H D3+维生素D3组合的处理组之间差异 表达的基因探针组的维恩图。M3展示了维生素D3处理组和使用25-OH D3+维生素D3组合的处理组之间差异 表达的基因探针组的维恩图。Mi是在HU组和接受25-OH D3与维生素D3组合处理的组之间差异表达的基因 的1745个探针组的富集分析(用GeneGo MetaCore进行)。S5展示了在25-OH D3+维生素D3处理组中差异表达的探针组和所选择的骨骼 肌基因的探针组的维恩图。S6展示了在25-羟基维生素D3处理组中差异表达的探针组和所选择的骨骼肌 基因的探针组的维恩图。图7展示了在维牛素D3处理组中差异表汰的探针组和所诜择的骨骼肌基因的探 针组的维恩图。在说明书和权利要求书通篇中使用时，适用以下定义“维生素D”表示维生素D3(胆钙化固醇)和/或维生素D2(麦角钙化醇)。人不 能制造维生素D2(麦角钙化醇)，但是能够使用其作为维生素D的来源。维生素D2可以由 多种植物合成，并且通常作为维生素D的等同物用于补充剂中的维生素D中。“维生素D代谢产物”表示除25-羟基维生素D3之外的任何其它维生素D代谢产 物。“25-OH D3”特指25-羟基维生素D3。"25-OH D”指维生素D2或维生素D3的25-羟基化的代谢产物，其为血浆中存在的
主要循环形式。“预防”意欲包括疾病的改善，症状严重性的减轻，早期干预，和疾病开始持续时间 的延长，其不旨在受限于下述情况，所述情况下患者不再能够染上疾病或经历任何症状。在另一实施方案中，提供了由与25-OH D3剂量一起的多个单独的维生素D或维生 素D3剂量组成的试剂盒。它们可以装在容器中，例如装在瓶、吸塑包装(blister pack)或 管架(vial rack)中。另外，试剂盒中提供了作为对人剂量施用组合物的说明书。在另一实施方案中，独自或与维生素D组合的25-OH D3是适用于人消耗的食物、 功能性食物、食物补充剂或营养药物中保持健康肌肉强度或功能的活性成分。25-0H和/或 D3的剂量可以与药物制品中存在的剂量相同，但是优选地倾向于较低的范围。食物补充剂 和营养药物可以是片剂、胶囊的形式或其它便利的剂型。食物可以是饮料或食物，需要时也 可含有其它营养上有效的化合物，如其它维生素、矿物质等等。
5
在老年人群和遭受与年龄无关的慢性固定在床(immobility)的人群中，维生素D 缺乏是特别流行的病症。这可能是一般性的缺少对阳光的暴露，身体制造维生素D或有效 代谢维生素D的能力减弱，或多种其它原因导致的。维生素D缺乏的一个后果是肌肉强度 和/或功能的损失。因此，本发明的一个方面是维生素D和25-0H D3的组合在老年人群中 维持健康肌肉强度和功能、防止其损失和/或重建健康肌肉强度和功能的用途。在本文通 篇中使用时，术语“老年”表示包括年龄超过65岁、优选地超过70岁、甚至超过80岁的个 体。在另一实施方案中，25-0H D3和维生素D的这一组合适用于在下述人中维持健康 肌肉强度和功能、防止其损失和/或重建健康肌肉强度和功能，所述人处于发生特征是维 生素D缺乏或不足的肌肉强度和/或功能病症的风险下。这可特别包括成年人，包括绝经 后女性(例如约45岁或更老)和约45岁或更老的男性。特别适用于不接受大量天然阳光 暴露的个体，例如传统上穿着长款衣物、不经常外出的人，或暴露于阳光时使用防晒霜或生 活在比赤道显著偏北或偏南的地理学区域(那里阳光较不强烈)的人。本发明的另一方面是通过施用维生素D和25-0H D3的组合，在患有吸收不良综合 征(例如受乳糜泻、斯泼卢腹泻或短肠综合征)从而处于维生素D缺乏风险下的人中，维持 健康肌肉强度和功能、防止其损失、和/或重建健康肌肉强度和功能的方法。本发明的另一方面是通过对人提供维生素D和25-羟基维生素D3的组合，在肝功 能受损的人中维持健康肌肉强度和功能、防止其损失、和/或重建健康肌肉强度和功能的 方法，其中所述人不能将维生素D有效地加工成25-羟基维生素D。本发明的组合物还有益于在老年(至多80岁)和非常老(80岁或以上)的人中， 尤其是在专门护理机构(例如医院、疗养院、康复诊所、老年人生活辅助所)中的人或患有 肌萎缩的人中保持肌肉量。本发明的另一实施方案是25-0H D3在老年人中维持肌肉强度或防止肌肉强度 损失的用途。肌肉强度的损失也是老年人受伤(falls)的一个主要原因，并可促成在医 院中发生的大量受伤。对于生理储备减少但仍然能够进行日常活动(例如行走、洗浴和 如厕行动)的老年人而言，如果独自行动，甚至在数天卧床后肌肉强度的加速损失也可导 致延长的损失。即便该损失最终被逆转，康复也需要广泛和昂贵的干涉，因为肌肉的修复 (reconditioning)比恶化(deconditioning)过程耗时长得多。本发明的组合物也有益于在下述人中保持和/或提高肌肉量，所述人可能并不年 老，但是因为另一病症导致的固定在床而损失肌肉量。如Merck Manual of Geriatrics, 2nd Ed:(p316-318)所解释的完全不活动时，肌肉强度每天降低5%。即便是卧床休息的年轻 人，也以每天1.0%到1.5% (或每周约10%)的速率损失肌肉强度。因此，本发明的组合物对由于活动减少而遭受肌肉量损失的人，或者甚至不活动 的人而言是有益的。在本发明的实践中活动减少的原因并不重要，因为本文的目的是保护 肌肉量免受损失。例如，行动力的损失可来自创伤、中风、在石膏模中(being in a cast)、 Parkinson' s病、多发性硬化、重症肌无力，或甚至Creutzfeldt-Jacobs病。因此，本发明 的另一方面是对截瘫或四肢瘫痪的个体施用本发明的化合物。 本发明的化合物还有益于患有恶病质或老年性肌肉萎缩的个体。恶病质是与癌症 和AIDS复合病变的一种“身体_消耗”综合征。可诱导骨骼肌萎缩的其它综合征是冠心病、慢性阻塞性肺病、肝病、饥饿、烧伤等。老年性肌肉萎缩是涉及年龄相关的肌肉功能降低的 另一种病症(与恶病质和萎缩不同)。确切的原因是未知的。本发明还涉及对肌肉虚弱的人有益。肌肉虚弱是疲劳(医学)的身体部分。肌肉 虚弱的位置是中央、神经和外周。中央肌肉虚弱是整个身体的总体衰竭，而外周虚弱是个别 肌肉的衰竭。神经虚弱在二者之间某处。肌肉虚弱可归因于神经供应的问题或肌肉自身的问题。后一范畴包括多肌炎和其 它肌肉病症，例如肌萎缩性侧索硬化症、肉毒中毒、中央核肌病、肌管性肌病、自主神经功能 异常、沙-马-图病(Charcot-Marie-Tooth)、低钾血症、运动神经元疾病、肌营养不良、强直 性肌营养不良、重症肌无力、进行性肌萎缩、脊髓性肌萎缩、大脑性瘫痪、传染性单核细胞增 多症、带状疱疹、维生素D缺乏症、纤维肌痛、乳糜泻、皮质醇增多症(Cushing’ s综合征)、 肾上腺皮质功能减退(Addison’ s病)、原发性高醛固酮症(Conn’ s综合征)和腹泻。鍾维生素D和25-0H D3可得自任何来源，可以使用便利的技术来制备其组合物。通 常，通过加热和搅动将维生素D3、25-0H D3的晶体或二者(单独或一起)溶于油中。优选 地，将油转移进管中并加热。之后向管中添加维生素D3、25-0H D3或二者，同时保持油的温 度或使其随时间提高。搅动组合物以溶解维生素D3、25-0H D3或二者的晶体。在向油中 添加之前，可以通过研磨和/或过筛使晶体尺寸减小，从而增强溶解。可以通过搅拌、管旋 转、混合、勻化、再循环或超声处理搅动组合物。优选地，可以在管中将油加热至约80°C到约 85°C的温度，将大小经处理的晶体(sized crystal)引入管中，搅拌内含物，以将晶体溶于 油中。“油”可以是任何可食用的油、脂质或脂肪例如巴巴苏油(babassu oil)、椰子油、 羽叶棕榈油(cohune oil)、腿rumyru油脂、棕榈仁油(palm kernel oil)或星实榈油(tucum oil)。油可以是天然的、合成的、半合成的或其任何组合。天然油可来自于任何来源(例如 动物、植物、真菌、海产(marine))；合成或半合成的油可通过便利的技术生产。优选地，油 是植物中链甘油三酯(主要是辛酸酯和癸酸酯)的混合物。组合物可任选地含有一种或多 种其它的合适成分，例如可药用的抗氧化剂、防腐剂、溶出剂(dissolution agent)、表面活 性剂、PH调节剂或缓冲剂、致湿剂(humectants)及其任何组合。前述是可药用载剂的例子。合适的抗氧化剂包括生育酚，混合的生育酚，来自天然或合成来源的生育酚，丁基 化的羟基甲苯(BHT)，丁基化的羟基茴香醚(BHA)，天然的抗氧化剂例如迷迭香提取物，没 食子酸丙酯和人用药物制造中使用的任何其它抗氧化剂。优选地，抗氧化剂是生育酚。合 适的防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、山梨酸钾、苯甲酸钠、苯甲酸及其 任何组合。合适的溶出剂包括无机或有机溶剂例如醇、含氯烃及其任何组合。合适的表面 活性剂可以是阴离子、阳离子或非离子的，例如棕榈酸抗坏血酸酯、聚山梨酯、聚乙二醇、及 其任何组合。合适的PH调节剂或缓冲剂包括柠檬酸-柠檬酸钠、磷酸-磷酸钠、乙酸-乙 酸钠及其任何组合。合适的致湿剂包括甘油、山梨醇、聚乙二醇、丙二醇及其任何组合。一旦形成，可以将油性组合物加入多种其它有用的组合物中，其中一些组合物在 下文讨论。例如，可以形成乳液，所述乳液可以任选地被包封或喷雾干燥。可以通过将上述 非水性组合物与水性组合物组合来制备多种乳液。乳液可以是任何类型的。合适的乳液包 括水包油乳液、油包水乳液、无水乳液、固体乳液和微乳液。可以通过任何便利的技术制备
7乳液。乳液含有水性组合物和非水性(例如油性)组合物，其中后者包含以基于油性组合物 总重按重量计约3%和约50%之间的用量溶于油中的维生素D3、25-0H D3或二者(单独或 一起)。在本文中，“水性组合物”和“水相”可互换使用。通常，乳液可含有从约20%到约 95 %的水性组合物和从约5 %到约80 %的非水性组合物。然而优选地，乳液含有从约85 % 到约95% (体积/体积)的水性组合物和从约5%到约15% (体积/体积)的非水性组合 物。便利地，非水性组合物可以作为微滴分散于水性组合物中。例如，水性组合物中的微滴 可具有小于约500nm的平均直径。便利地，微滴具有约150nm和约300nm之间的平均直径。在一个尤其有利的实施方案中，乳液含有包封剂，其有助于在(例如通过喷雾干 燥)将乳液进一步加工后包封油性组合物。包封剂可以是能够包封油性组合物的任何可食 用的物质。优选地，包封剂主要是胶体材料。这类材料包括淀粉、来自动物来源的蛋白质 (包括明胶)、来自植物来源的蛋白质、酪蛋白、果胶、藻酸盐、琼脂、麦芽糖糊精、磺酸木质 素、纤维素衍生物、糖、糖类、山梨醇、胶质及其任何组合。合适的淀粉包括植物淀粉(例如来自National Starch & Chemical Corp.，New York, NY的CAPSUL⑧或HI-CAP )，其它改性的食物淀粉及其任何组合。优选地，淀粉是 CAPSUL 改性的植物淀粉。来自动物来源的合适的蛋白质包括明胶(例如牛明胶、具有 不同Bloom数量的猪明胶(A型或B型)、鱼明胶)、脱脂奶蛋白质、酪蛋白酸盐及其任何组 合。优选地，动物蛋白质是明胶。来自植物来源的合适蛋白质包括马铃薯蛋白(例如来自 Roquette Preres Societe Anonyme, Lestrem, 法国的ALBUREX )、豌豆蛋白、大豆蛋白及 其任何组合。优选地，植物蛋白质是ALBUREX 马铃薯蛋白。具有不同葡糖当量的合适的 麦芽糖糊精包括麦芽糖糊精5、麦芽糖糊精10、麦芽糖糊精15、麦芽糖糊精20、麦芽糖糊精 25及其任何组合。优选地，麦芽糖糊精是麦芽糖糊精15。合适的纤维素衍生物包括乙基 纤维素、甲基乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素及其任何组合。 合适的糖类包括乳糖、蔗糖或其任何组合。优选地，糖类是蔗糖。合适的胶质包括阿拉伯 胶、刺槐豆胶(locust bean)、角叉菜胶及其任何组合。优选地，胶质是阿拉伯胶。当乳液含有包封剂时，包封剂可通过任何便利的技术分散于水中，形成水相。水 相可以是溶液或混合物，这取决于选择的组分的特性。所选择的组分可以通过任何便利的 技术分散，所述技术包括勻化、混合、乳化、再循环、静态混合、超声、搅拌、加热或其任何组 合。然后可以根据，需要通过添加水，来调节得到的水相的粘度。乳液的水性组合物可任选 地含有任何其它合适的材料，这包括但不限于上文关于非水性组合物所讨论的材料。优选 地，水性组合物可包括包封剂、成膜剂、增塑剂、防腐剂、抗氧化剂或其任何组合。合适的防 腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、抗坏血酸、山梨酸钾、苯甲酸钠及其任何 组合。合适的抗氧化剂包括抗坏血酸钠、抗坏血酸、柠檬酸及其任何组合。优选地，水相含有改性的食物淀粉，例如辛烯基琥珀酰淀粉(CAPSUL )、麦芽糖 糊精、和抗坏血酸钠。另一种优选的水相含有马铃薯蛋白(ALBUREX )、麦芽糖糊精20和 抗坏血酸钠。可以通过任何便利的技术(优选搅拌)将选择的组分溶于水中。优选地勻化 混合物，直至其均一并且没有团块。优选地，勻化在约50°C和约75°C之间的温度下进行。 可以将得到的水相的最终粘度调节至期望的粘度，优选地约250cp到约450cp，更优选地约 300cp到约400cp，进一步更优选地约385cp。可以通过任何手段(包括勻化、转子_定子剪切、高压剪切和气蚀(cavitation)、
8高速“cowles”或剪力搅动及其任何组合)来乳化非水性组合物和水相，形成乳液。优选地， 可以在乳化后通过添加水来调节乳液的体积和粘度。优选地，通过勻化，来乳化非水性和水 性组合物。优选地，乳液应当不含有任何矿物质、过渡金属或过氧化物。如上文所述，可以在生产其它有用的组合物，特别是经包封的油(例如喷雾干燥 的粉末)时加入或使用乳液。通常，经包封的油包含油性组合物和包封所述油性组合物的 包封剂，其中所述油性组合物含有以基于油性组合物总重按重量计约3%和约50%之间的 用量溶于油中的维生素D3、25-0H D3或二者。可以通过任何便利的技术生产经包封的油，例 如通过任何常规技术干燥上述乳液，所述常规技术包括喷雾干燥、冷冻干燥、流化床干燥、 托盘干燥(tray drying)、吸附及其任何组合。优选地，通过将下述乳液喷雾干燥生产经包 封的油，所述乳液具有上文含有包封剂的水相；喷雾干燥参数由最终经包封的油中期望的 物理特性决定。这类物理参数包括颗粒大小、粉末形状和流动，以及水含量。优选地，基于 经包封的油总重，按重量计，油的用量小于约30 %，小于约20 %，小于约10 %或小于约5 %。 经包封的油应当具有良好的流动性，并且维生素D3和/或25-0H D3应当均勻分布于组合物 各处。便利地，经包封的油是粉末。可以向经包封的油中添加任何其它合适的添加剂。一 种这类添加剂可以是提高经包封的油的流动性的流动剂，例如二氧化硅。组合物可以以片剂、胶囊(例如硬胶囊或软胶囊)的形式提供，或者以注射(例如 油或乳液)的形式提供。它们可以按单份每日剂量包装。Mfi每日。其中两种活性成分要单独施用的根据本发明的组合物以从约Iyg到约 50 μ g、优选地约5 μ g和约25 μ g的用量含有维生素D或25-0HD3。或者，具有维生素D和 25-0H D3 二者的单一每日剂量以从约1 μ g到约50 μ g、优选地约5 μ g和25 μ g的用量含 有每种活性成分。维生素D与25-0H D3的剂量比例可以从约50 1到约1 50，更优选地从约 25 1到约1 25，进一步更优选地从约6 1到约1 6。可以在单一试剂盒(或容器)中包装多个单独的剂量。例如，试剂盒可由单独(即 60个单独剂量)或组合(即含有两种活性成分的30个剂量)的两种活性剂的三十个单独 的每日剂量组成。试剂盒中可包括对人施用剂量的说明书。每周。单周剂量以从约7 μ g到约350 μ g、优选地从约35 μ g到175 μ g的用量含 有维生素D或25-0H D3。或者，单周剂量可含有维生素D和25-0H D3 二者，每种的用量从 约7 μ g到约350 μ g,优选地从约35 μ g到175 μ g。维生素D与25-0H D3的剂量比可以从 约50 1到约1 50，更优选地从约25 1到约1 25，进一步更优选地从约6 1到 约 1 6。每月。单月剂量以从约30 μ g到约1500 μ g、优选地约75 μ g到约500 μ g的用量 含有维生素D或25-0H D3。或者，单月剂量可含有维生素D和25-0H D3 二者，每种的用量 从约30 μ g到约1500 μ g,优选地约75 μ g到约500 μ g。试剂盒可包含1、2、3、4、5、6、7、8、 9、10、11或12个每周或每月剂量。维生素D与25-0H D3的剂量比例可以从约50 1到约1 50，更优选地从约 25 1到约1 25，进一步更优选地从约6 1到约1 6。基因分析
为了证明组合的提高的生物活性，对暴露于维生素D、25_0H D3及其组合的肌肉组 织进行基因芯片分析。细节在实施例2中给出，所述实施例2使用鼠后腿去负荷模型。可 以看出，与个别施用时相比，递送二者的组合时被活化或调节(上调或下调)的基因数量显 著增加。因为目前认为的，摄入后大部分维生素D被转化为25-0H D并在肝中加工，因此这 是一个令人惊讶的结果。因此，本发明的另一方面是活化或调节维生素D和25-0H D应答性人肌肉相关基 因的方法，所述方法包括对人施用维生素D和25-0H D3的组合。提供以下非限制性实施例来更好地阐述本发明。
实施例实施例1临床试骑配制物材料和方法提供作为粉末的25-0H D3经喷雾干燥的配制物。简言之，将25-0HD3和DL- α -生 育酚溶于中链甘油三酯的油中，然后乳化进改性淀粉、蔗糖和抗坏血酸钠的水性溶液中。在 存在二氧化硅时将所述乳液在喷雾干燥器中雾化。在水含量(LDO)小于4%时收集得到的 粉末，并通过400 μ m过筛。将其包装并密封在铝袋中，然后在低于15 °C的干燥处储存，并在 其制造后12个月以内使用。制造了独立的三组。详细地，通过在70°C真空下，在具有锚搅拌器(anchor stirrer)的FRYMIX加工单元中混合120分钟生产由以下组成的混合物· 17. 300kg 水(WBI)· 13. 460kg 改性的食物淀粉(CAPSUL HS)· 3. 270kg 蔗糖· 0. 730kg抗坏血酸钠通过在82°C下在具有螺旋桨搅拌器的双壁管中混合35分钟，制备由以下组成的 油相· 0. 550kg BERGABEST MCT 油 60/40· 0. 049kg 麦角钙化固醇(HY-D USP)· 0. 183kg DL- α -生育酚将油相转移至FRYMIX加工单元内的基质中，并用内部胶体磨预乳化(60分钟， 70°C )。预乳液通过高压勻化器(20min)流通。将在70°C下粘度为60mPa · s到90mPa · s 的乳液通过高压泵转移至喷嘴。向塔中加入二氧化硅(SIPERNAT 320DS)作为流化剂。喷 雾和干燥参数在下文列出
权利要求
在人中提高或维持肌肉强度或肌肉功能，或在人中预防肌肉强度或肌肉功能损失的方法，所述方法包括以足以提高肌肉强度、肌肉功能或二者的用量向所述人施用25 OH D3。
2.根据权利要求1的方法，所述方法还包括施用维生素D3。
3.根据权利要求1或权利要求2的方法，其中所述人是成年人或老年人。
4.药物、营养药物、食物补充剂或食物组合物，其以足以提高或维持人肌肉功能或肌肉 强度或预防所述肌肉功能或肌肉强度损失的用量包含25-0H D3。
5.根据权利要求4的组合物，其中所述用量足以在患有肌肉疾病或选自下组的病症的 患者中提高肌肉强度，所述组由以下组成癌症或AIDS相关的恶病质、由继发性病症如中 风引起的固定在床、萎缩、肌肉虚弱、多肌炎、肌萎缩性侧索硬化症、肉毒中毒、中央核肌病、 肌管性肌病、自主神经功能异常、沙-马-图病、低钾血症、运动神经元疾病、肌营养不良、强 直性肌营养不良、重症肌无力、进行性肌萎缩、脊髓性肌萎缩、大脑性瘫痪、传染性单核细胞 增多症、带状疱疹、维生素D缺乏症、纤维肌痛、乳糜泻、皮质醇增多症(Cushing's综合征)、 肾上腺皮质功能减退(Addison’ s病)、原发性高醛固酮症(Conn’ s综合征)和腹泻。
6.25-0H D3和任选的维生素D在制造用于提高或维持人肌肉功能或肌肉强度或预防 所述肌肉功能或肌肉强度损失的药物、营养药物、食物补充剂或食物组合物中的用途。
全文摘要
本发明公开了25-OH D3(麦角钙化固醇)提高肌肉强度、肌肉功能或二者的用途。维生素D3(胆钙化固醇)可任选地与25-OH D3一起使用。本发明还公开了药物组合物的形式和剂量，以及用于制造药物的方法。
文档编号A23L1/303GK101951916SQ200980105249
公开日2011年1月19日 申请日期2009年2月12日 优先权日2008年2月13日
发明者伊丽莎白·斯达克林, 凯·尔本, 尼尔·罗伯特·巴克, 布鲁诺·H·勒安伯格, 斯文·沃尔夫拉姆, 沃特·克雷豪 申请人:帝斯曼知识产权资产管理有限公司