专利名称：维生素d和25-羟基维生素d3的组合的制作方法
技术领域：
本发明涉及包含维生素D (胆钙化固醇(cholecalciferol)和/或麦角钙化醇 (ergocalciferol))和25-羟基维生素D3 (麦角钙化固醇(calcifediol))的组合物，和所 述组合物用于至少影响维生素D的浓度、生物利用度、代谢或效力的用途。
背景技术：
维生素D (例如麦角钙化醇和胆钙化固醇)是由其生物活性定义的一组脂溶性化 合物。维生素D缺乏在儿童中引起佝偻病，在成年人中引起骨软化症。但是，在数月慢性摄 入多于100倍推荐每日允许量(即5-15iig或200-600IU维生素D)后可能发生毒性。对维 生素D而言，“毒性阈值是每日500到600mcg/kg体重。通常，成年人不应长期消耗多于RDA 的三倍，，(Garrison & Somer, The Nutrition Desk Reference, Third Ed. , McGraw-Hill, pg. 82，1997)。在大于375nmol/L 25-羟基维生素D的血浓度下可发生血钙过多。更近来地， 安全的维生素D上限水平被鉴定为至少250 ii g/天(10，000IU) (Hathcock等，Am. J Clin. Nutr. 85 =6-18,2007)。这样的膳食补充剂的摄入已显示导致约200nmol/L 25-羟基维生素 D3的血浓度。维生素D是一种激素原，其必须在肝中被羟基化，产生25-羟基维生素D(麦角钙 化固醇，25-0H维生素D ;25-0H D)，其随后在肾和其它组织中经历另外的羟基化，产生维生 素D的活性激素形式——1，25- 二羟基维生素D。1，25- 二羟基维生素D被释放进血液中， 与维生素D结合蛋白(DBP)结合，并被转运至目标组织。1，25-二羟基维生素D和维生素D 受体之间的结合允许复合物在细胞核中发挥转录因子的作用。维生素D缺乏可促进骨的再吸收。其也可调控心血管、免疫和肌肉系统的功能。流 行病学研究发现了维生素D摄入及其对血压或葡萄糖代谢影响之间的关联。维生素D的活 性受甲状旁腺激素的负反馈控制。维生素D和25-0H D3 二者过去均作为药物被施用。维生素D当然是可广泛获得 的，25-0H D3之前在美国由Organon USA以名称〃 CALDER0L"出售，但是现在在FDA的停 止供应的药品(discontinued drug)列表上。其为含有玉米油和25-0H D3的明胶胶囊。25-0H D3的液体形式目前在西班牙由FAES Farma以名称〃 HIDR0FER0L"在油性 溶液中出售。维生素D和25-0H D3的组合已经在动物饲料中使用。用于饲料中的25-0H D3可 以从DSM以名称〃 R0VIMIX HY-D"商业获得。Tritsch等(US 2003/0170324)公开了一种饲料预混物组合物，其至少包含以5% 和50% (wt/wt)之间的量溶于油中的25-0H D3，和抗氧化剂、包封25-0H D3和油微滴的试 剂，和营养添加剂(例如维生素D3)。预混物可以被添加至家禽、猪、狗或猫的食物。该组合 物使25-0H D3稳定化以抵挡氧化。Simoes-Nunes等(US 2005/0064018)公开了向动物饲料添加25-0H维生素D3和 维生素D3的组合。具体地，向猪饲料中添加约10 u g/kg到约100 u g/kg的25-0H维生素 D3和约200IU/kg到约4，000IU/kg的维生素D3。这种添加促进猪的骨强度。
Stark等(US 5，695，794)公开了对家禽饲料添加25-0H维生素D3和维生素D3的 组合，来改善胫骨软骨发育不良的影响。Borenstein等US 5，043，170公开了维生素D3和1_ a -羟基胆钙化固醇或1 a， 25-羟基胆钙化固醇的组合用于在下蛋的母鸡和老母鸡中改善蛋强度和腿强度。Chung等，W0 2007/059960公开了用含维生素D3以及25-羟基维生素D3的膳食 饲喂的母猪(SOW)具有改善的一般健康状态、身体轮廓(body frame)、产仔数和健康和其 它生产参数。还公开了 25-0H D3人食物补充剂，但是其剂量范围(5-15微克/kg体重)非 常高，等于每人300-900微克的极高的每日剂量。前述文件没有教导或者暗示维生素D和25-0H D3作为人用药物、实物或营养药物 的用途或其对人健康的作用。该组合物的形式和剂量为人对维生素D的使用(例如药物代 谢动力学)提供了期望的效果。据我们所知，以前没有研究过在人中用维生素D和25-0H D3 二者给药的动力学。其它优点和改进描述于下文，或将从本文的公开内容明显得知。发明详述惊讶地发现，对人施用维生素D和25-0H D3的组合时，血浆25-0HD的提高被协同 性地提高。这一效应被迅速观察到，并且约在最初6个小时后最为显著。然后，血浆水平的 提高被维持大约206个小时。因此，本发明包括用作人用药物的维生素D(胆钙化固醇和/ 或麦角钙化醇)和25-0H D3(麦角钙化固醇)的组合。这类组合物的一种可能的用途是作 为抗骨质疏松剂，尽管本发明的组合适用于涉及维生素D或25-0H D缺乏的任何适应征。还发现根据本发明，25-0H D3和维生素D的组合协同性地调节(上调或下调)协 同数量的维生素D应答基因，包括大量对单独存在的维生素D或25-0H D3不应答的基因。 这是令人惊讶的结果，因为目前的维生素D代谢模型不能解释，目前的维生素D代谢模型均 假定实质上所有维生素D都首先被代谢成为25-0H D。根据本发明的组合提供了两个显著的优点1)其导致迅速且协同的25-0H D血浆应答；2)其导致出乎意料地显著和长期的血浆25-0H D水平平台期。这些是治疗维生素 D缺乏的特别重要的目标快速纠正并非最适的维生素D状态和长期且稳定的血浆浓度，以 确保对所有缺乏维生素D的组织足量供应。本发明的另一方面是适合人消耗的食物、功能性食物、食物补充剂或营养药物，其 含有25-0H D3，优选地含有维生素D和25-0H D3的组合。附图
概述SI展示了对后肢去负荷(“HU组”)和处理组(维生素D3、25_0H D3或其组合) 而言，差异表达的鼠基因探针组的维恩图(Verm Diagram)。Ml展示了 25-0H D3处理组和使用25_0H D3+维生素D3组合的处理组之间差异 表达的基因探针组的维恩图。M3展示了维生素D3处理组和使用25-0H D3+维生素D3组合的处理组之间差异 表达的基因探针组的维恩图。Mi是在HU组和接受25-0H D3与维生素D3组合处理的组之间差异表达的基因 的1745个探针组的富集分析(用GeneGo MetaCore进行)。M5展示了在25-0H D3+维生素D3处理组中差异表达的探针组和所选择的骨骼肌基因的探针组的维恩图。S6展示了在25-羟基维生素D3处理组中差异表达的探针组和所选择的骨骼肌 基因的探针组的维恩图。图7展示了在维牛素D3处理组中差异表汰的探针组和所诜择的骨骼肌基因的探 针组的维恩图。在说明书和权利要求书通篇中使用时，术语“维生素D”表示维生素D3(胆钙化固 醇)和/或维生素D2 (麦角钙化醇)。人不能制造维生素D2 (麦角钙化醇)，但是能够使用 其作为维生素D的来源。维生素D2可以由多种植物合成，并且通常作为维生素D3的等同 物用于补充剂中的维生素D中。“维生素D代谢产物”表示除25-羟基维生素D3之外的任何其它维生素D代谢产 物。“25-0H D3”特指25-羟基维生素D3。"25-0H D”指维生素D2或维生素D3的25-羟基化的代谢产物，其为血浆中存在的
主要循环形式。在一个实施方案中，提供了适合人使用的药物组合物，其以片剂、胶囊或可注射形 式包含维生素D、25-0H D3和可药用抗氧化剂，和至少一种可药用载剂。本发明还涉及人用药物组合物，其中所述活性成分基本上由维生素D和25-0H D3 的组合组成；更优选地，所述活性成分基本上由维生素D和25-0H D3的组合组成。在另一实施方案中，本发明提供了由与25-0H D3剂量一起的多个单独的维生素 D或维生素D3剂量组成的试剂盒。它们可以装在容器中，例如装在瓶、吸塑包装(blister pack)或管架(vial rack)中。另外，试剂盒中提供了向人施用作为剂量的组合物的说明 书。在另一实施方案中，提供了适合人使用的组合物，所述组合物至少由经喷雾干燥 的25-0H D3配制物和可药用抗氧化剂组成。组合物也可由经喷雾干燥的维生素D或维生 素D3配制物组成。或者，组合物可以是维生素D或维生素D3和25-0H D3和可药用抗氧化 剂的混合物，从所述混合物制备经喷雾干燥的配制物。或者提供了由分开存在的以下组合 物组成的试剂盒至少含经喷雾干燥的维生素D或维生素D3配制物和可药用抗氧化剂的第 一组合物，和至少含经喷雾干燥的25-0H D3配制物的第二组合物。还在另一方面中，提供了用于制造经喷雾干燥的配制物的方法。至少将维生素D、 25-0H D3或二者溶于合适的油如中链甘油三酯、椰子油或棕榈油中，以提供非水性相。将非 水性相和水性相乳化。将乳液喷雾并干燥成粉末。或者，将维生素D或维生素D3和25-0H D3单独地喷雾干燥成粉末，然后彼此混合。在另一方面中，提供了向人施用维生素D和25-0H D3的方法。藉此，可以提高或 维持血、血浆或血清中25-0H D的浓度；可以在血、血浆或血清中达到25-0H D的稳态浓度； 可以提高25-0H D血浆或血清浓度的可预测性。通过这类施用达到的25-0H D的蜂浓度可以从30nmol/L到375nmol/L，优选地 从约120nmol/L到约300nmol/L。通过这类施用达到的25-0H D的稳态浓度优选地高于 60nmol/L。在另一实施方案中，独自或与维生素D组合的25-0H D3是适用于人消耗的食物、功能性食物、食物补充剂或营养药物中的活性成分。25-0H和/或D3的剂量可以与药物制 品中存在的剂量相同，但是优选地倾向于较低的范围。食物补充剂和营养药物可以是片剂、 胶囊的形式或其它便利的剂型。食物可以是饮料或食物，需要时也可含有其它营养上有效 的化合物，如其它维生素、矿物质等等。在老年人群和遭受与年龄无关的慢性固定在床(immobility)的人群中，维生素D 缺乏是特别流行的病症。这可能是一般性的缺少对阳光的暴露，身体制造维生素D或有效 代谢维生素D的能力减弱，或多种其它原因导致的。因此，本发明的一个方面是维生素D和 25-0H D3的组合在老年人群中的用途。在本文通篇中使用时，术语“老年”表示包括年龄超 过65岁、优选地超过70岁、甚至超过80岁的个体。在另一实施方案中，25-0H D3和维生素D的这一组合适用于下述人，所述人处于 发生特征是维生素D缺乏或不足的病症的风险下。这可特别包括成年人，包括绝经后女性 (例如约45岁或更老)和约45岁或更老的男性。特别适用于不接受大量天然阳光暴露的 个体，例如传统上穿着长款衣物、不经常外出的人，或暴露于阳光时使用防晒霜或生活在比 赤道显著偏北或偏南的地理学区域(那里阳光较不强烈)的人。维生素D与25-0H D3的组合可以每日一次、每周一次或每月一次地施用。惊讶地 发现，根据本发明，通过递送维生素D和25-0H D3的组合，25-0H D的血浆水平协同提高。 这一效应被迅速观察到，并且约在最初6个小时后最为显著。然后，血浆水平的提高被维持 (尽管更低，但是仍然是临床有效的水平)至少大约206个小时。因此，本发明提供了优于 单一维生素D形式的现有治疗的两个不同的优点快速效应提供了急性生物利用度，而保 持提高的血浆水平确保延长的生物利用度。还在另一方面中，提供了通过施用给人使用经喷雾干燥的至少含25-0H D3的配制 物的方法。本发明的另一方面是通过施用维生素D和25-0H D3的组合，对患有吸收不良综合 征(例如受乳糜泻、斯泼卢腹泻或短肠综合征影响)的人提供维生素D或其代谢产物的方法。本发明的另一方面是通过对人提供维生素D和25-羟基维生素D3的组合，对肝 功能受损的人提供维生素D代谢产物的方法，其中所述人不能将维生素D有效地加工成 25-羟基维生素D。维生素D和25-0H D3可得自任何来源，可以使用便利的技术来制备其组合物。通 常，通过加热和搅动将维生素D、25-0H D3的晶体或二者(单独或一起)溶于油中。优选地， 将油转移进管中并加热。之后向管中添加维生素D、25-0H D3或二者，同时保持油的温度或 使其随时间提高。搅动组合物以溶解维生素D、25-0H D3或二者的晶体。在向油中添加之 前，可以通过研磨和/或过筛使晶体尺寸减小，从而增强溶解。可以通过搅拌、管旋转、混 合、勻化、再循环或超声处理搅动组合物。优选地，可以在管中将油加热至约80°C到约85°C 的温度，将大小经处理的晶体(sized crystal)引入管中，搅拌内含物，以将晶体溶于油中。“油”可以是任何合适的可食用油、脂质或脂肪例如巴巴苏油(babassu oil)、椰 子油、羽叶棕榈油(cohune oil)、murumyru油脂、棕榈仁油(palm kernel oil)或星实榈油 (tucum oil)。油可以是天然的、合成的、半合成的或其任何组合。天然油可来自于任何来源 (例如动物、植物、真菌、海产(marine))；合成或半合成的油可通过便利的技术生产。优选地，油是植物中链甘油三酯(主要是辛酸酯和癸酸酯)的混合物，或棕榈油或椰子油或其混 合物。组合物可任选地含有一种或多种其它的合适成分，例如可药用的抗氧化剂、防腐剂、 溶出剂(dissolution agent)、表面活性剂、pH调节剂或缓冲剂、致湿剂(humectants)及其 任何组合。前述是可药用载剂的例子。合适的抗氧化剂包括生育酚，混合的生育酚，来自天然或合成来源的生育酚，丁基 化的羟基甲苯(BHT)，丁基化的羟基茴香醚(BHA)，天然的抗氧化剂例如迷迭香提取物，没 食子酸丙酯和人用药物制造中使用的任何其它抗氧化剂。优选地，抗氧化剂是生育酚。合 适的防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、山梨酸钾、苯甲酸钠、苯甲酸及其 任何组合。合适的溶出剂包括无机或有机溶剂例如醇、含氯烃及其任何组合。合适的表面 活性剂可以是阴离子、阳离子或非离子的，例如棕榈酸抗坏血酸酯、聚山梨酯、聚乙二醇、及 其任何组合。合适的PH调节剂或缓冲剂包括柠檬酸-柠檬酸钠、磷酸-磷酸钠、乙酸-乙 酸钠及其任何组合。合适的致湿剂包括甘油、山梨醇、聚乙二醇、丙二醇及其任何组合。一旦形成，可以将油性组合物加入多种其它有用的组合物中，其中一些组合物在 下文讨论。例如，可以形成乳液，所述乳液可以任选地被包封或喷雾干燥。可以通过将上述 非水性组合物与水性组合物组合来制备多种乳液。乳液可以是任何类型的。合适的乳液包 括水包油乳液、油包水乳液、无水乳液、固体乳液和微乳液。可以通过任何便利的技术制备乳液。乳液含有水性组合物和非水性(例如油性) 组合物，其中后者包含以基于油性组合物总重按重量计约3%和约50%之间的用量溶于油 中的维生素D、25-0H D3或二者(单独或一起)。在本文中，“水性组合物”和“水相”可互换 使用。通常，乳液可含有从约20 %到约95 %的水性组合物和从约5 %到约80 %的非水性组 合物。然而优选地，乳液含有从约85%到约95% (体积/体积)的水性组合物和从约5% 到约15% (体积/体积)的非水性组合物。便利地，非水性组合物可以作为微滴分散于水 性组合物中。例如，水性组合物中的微滴可具有小于约500nm的平均直径。便利地，微滴具 有约150nm和约300nm之间的平均直径。在一个尤其有利的实施方案中，乳液含有包封剂，其有助于在(例如通过喷雾干 燥)将乳液进一步加工后包封油性组合物。包封剂可以是能够包封油性组合物的任何可食 用的物质。优选地，包封剂主要是胶体材料。这类材料包括淀粉、来自动物来源的蛋白质 (包括明胶)、来自植物来源的蛋白质、酪蛋白、果胶、藻酸盐、琼脂、麦芽糖糊精、磺酸木质 素、纤维素衍生物、糖、糖类、山梨醇、胶质及其任何组合。合适的淀粉包括植物淀粉(例如来自National Starch & Chemical Corp.，New York, NY的CAPSUL⑧或HI-CAP )，其它改性的食物淀粉及其任何组合。优选地，淀粉是 CAPSUL 改性的植物淀粉。来自动物来源的合适的蛋白质包括明胶(例如牛明胶、具有 不同Bloom数量的猪明胶(A型或B型)、鱼明胶)、脱脂奶蛋白质、酪蛋白酸盐及其任何组 合。优选地，动物蛋白质是明胶。来自植物来源的合适蛋白质包括马铃薯蛋白(例如来自 Roquette Preres Societe Anonyme, Lestrem， 法国的ALBUREX )、豌豆蛋白、大豆蛋白及 其任何组合。优选地，植物蛋白质是ALBUREX 马铃薯蛋白。具有不同葡糖当量的合适的 麦芽糖糊精包括麦芽糖糊精5、麦芽糖糊精10、麦芽糖糊精15、麦芽糖糊精20、麦芽糖糊精 25及其任何组合。优选地，麦芽糖糊精是麦芽糖糊精15。合适的纤维素衍生物包括乙基 纤维素、甲基乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素及其任何组合。合适的糖类包括乳糖、蔗糖或其任何组合。优选地，糖类是蔗糖。合适的胶质包括阿拉伯 胶、刺槐豆胶(locust bean)、角叉菜胶及其任何组合。优选地，胶质是阿拉伯胶。当乳液含有包封剂时，包封剂可通过任何便利的技术分散于水中，形成水相。水 相可以是溶液或混合物，这取决于选择的组分的特性。所选择的组分可以通过任何便利的 技术分散，所述技术包括勻化、混合、乳化、再循环、静态混合、超声、搅拌、加热或其任何组 合。然后可以根据，需要通过添加水，来调节得到的水相的粘度。乳液的水性组合物可任选 地含有任何其它合适的材料，这包括但不限于上文关于非水性组合物所讨论的材料。优选 地，水性组合物可包括包封剂、成膜剂、增塑剂、防腐剂、抗氧化剂或其任何组合。合适的防 腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、抗坏血酸、山梨酸钾、苯甲酸钠及其任何 组合。合适的抗氧化剂包括抗坏血酸钠、抗坏血酸、柠檬酸及其任何组合。优选地，水相含有改性的食物淀粉，例如辛烯基琥珀酰淀粉(CAPSUL )、麦芽糖糊 精、和抗坏血酸钠。另一种优选的水相含有马铃薯蛋白(ALBUREX )、麦芽糖糊精20和抗 坏血酸钠。可以通过任何便利的技术(优选搅拌)将选择的组分溶于水中。优选地勻化混 合物，直至其均一并且没有团块。优选地，勻化在50°C和80°C之间的温度下进行。可以将 得到的水相的最终粘度调节至期望的粘度，优选地约250mPa s到约450mPa s，更优选地 约300mPa s到约400mPa s，进一步更优选地约385mPa s，对珠粒生产而言，或60mPa s 到300mPa s，对喷雾干燥配制物而言。可以通过任何手段(包括勻化、转子_定子剪切、高压剪切和气蚀(cavitation)、 高速“cowles”或剪力搅动及其任何组合)来乳化非水性组合物和水相，形成乳液。优选地， 可以在乳化后通过添加水来调节乳液的体积和粘度。优选地，通过勻化，来乳化非水性和水 性组合物。优选地，乳液应当不含有任何矿物质、过渡金属或过氧化物。如上文所述，可以在生产其它有用的组合物，特别是经包封的油(例如喷雾干燥 的粉末)时加入或使用乳液。通常，经包封的油包含油性组合物和包封所述油性组合物的 包封剂，其中所述油性组合物含有以基于油性组合物总重按重量计约5%和约50%之间的 用量溶于油中的维生素D、25-0H D3或二者。可以通过任何便利的技术生产经包封的油，例 如通过任何常规技术干燥上述乳液，所述常规技术包括喷雾干燥、冷冻干燥、流化床干燥、 托盘干燥(tray drying)、吸附及其任何组合。优选地，通过将下述乳液喷雾干燥生产经包 封的油，所述乳液具有上文含有包封剂的水相；喷雾干燥参数由最终经包封的油中期望的 物理特性决定。这类物理参数包括颗粒大小、粉末形状和流动，以及水含量。优选地，基于 经包封的油总重，按重量计，油的用量小于约30%，小于约20%，小于约10%或小于约5%。 经包封的油应当具有良好的流动性，并且维生素D和/或25-0H D3应当均勻分布于组合物 各处。便利地，经包封的油是粉末。可以向经包封的油中添加任何其它合适的添加剂。一 种这类添加剂可以是提高经包封的油的流动性的流动剂，例如二氧化硅。组合物可以以片剂、胶囊(例如硬胶囊或软胶囊)的形式提供，或者以注射(例如 油或乳液)的形式提供。它们可以按单份每日剂量包装。MS每日。其中两种活性成分要独自施用的根据本发明的组合物以从约lyg到约 50 u g、优选地约5 u g和约25 y g的用量含有维生素D或25-0HD3。或者，具有维生素D和 25-0H D3 二者的单一每日剂量以从约1 P g到约50 u g、优选地约5 y g和25 y g的用量含有每种活性成分。维生素D与25-0H D3的剂量比例可以从约50 1到约1 50，更优选地从约 25 1到约1 25，进一步更优选地从约6 1到约1 6。可以在单一试剂盒(或容器)中包装多个单独的剂量。例如，试剂盒可由单独(即 60个单独剂量)或组合(即含有两种活性成分的30个剂量)的两种活性剂的三十个单独 的每日剂量组成。试剂盒中可包括对人施用剂量的说明书。每周。单周剂量以从约7 u g到约350 u g、优选地从约35 ii g到175 u g的用量含 有维生素D或25-0H D3。或者，单周剂量可含有维生素D和25-0H D3 二者，每种的用量从 约7 ii g到约350 u g,优选地从约35 ii g到175 u g。维生素D与25-0H D3的剂量比可以从 约50 1到约1 50，更优选地从约25 1到约1 25，进一步更优选地从约6 1到 约 1 6。每月。单月剂量以从约30 ii g到约1500 u g、优选地约75 ii g到约500 u g的用量 含有维生素D或25-0H D3。或者，单月剂量可含有维生素D和25-0H D3 二者，每种的用量 从约30 u g到约1500 u g,优选地约75 u g到约500 u g。试剂盒可包含1、2、3、4、5、6、7、8、 9、10、11或12个每周或每月剂量。维生素D与25-0H D3的剂量比例可以从约50 1到约1 50，更优选地从约 25 1到约1 25，进一步更优选地从约6 1到约1 6。已经发现，约1 6的25-0H D3比D3的剂量比例在快速(即在数小时内)提高 血浆25-0H D水平和维持提高的平台期水平中尤其有益。因此，本发明的另一方面是通过施用维生素D和25-0H D3的组合，将延长的25-0H D血浆水平维持高于基线水平至少60nmol/L的方法。优选地，所述维生素D是维生素D3。在本申请和权利要求通篇中使用时，“延长的”表示在摄入维生素D和25-0H D3后 四小时起始，并延长至至少12个小时的时间段。本发明的另一方面是通过施用25-0H D3和维生素D的组合，将高于基线水平至少 30nmol/L的提高的25-0H D血浆水平维持至少一周的方法。优选地，所述维生素D是维生 素D3。本发明的另一方面是下述方法，所述方法将25-0H D血浆水平急性(即在施用 25-0H D3和维生素D的组合后2小时内)提高至高于基线至少30nmol/L，并将高于基线至 少30nmol/L的血浆水平维持至少一周。优选地，所述维生素D是维生素D3。可以理解，施用25-0H D3和维生素D(优选维生素D3) 二者的优点之一是循环的 25-0H D量迅速提高，并且该提高被维持。如果施用较低剂量，例如每日方案推荐的剂量，则 血浆中的绝对提高当然会比实施例中更高剂量所示提高更低，即所述提高会小于30nmol/ 1。然而，总体应答模式是相同的，即存在迅速提高和长期平台，所述长期平台中维持高于基 线的提高。尽管应答等级较低，但是仍然存在血浆水平整天稳定的优点。因此，所有组织被 最佳地供应了 25-0H D。本发明的另一优点是通过施用维生素D和25-0H D3(优选维生素D3) 二者，循环 的25-0H D水平可更容易地达到预定的水平，并且能够将该预定的水平保持预定的时间长 度。因此可以最小化不应答维生素D疗法的个体的数量。例如，肝功能受损或患有类似病 症的个体现在可具有更标准化的25-0H D水平。
基因分析为了证明组合的提高的生物活性，对暴露于维生素D、25_0H D3及其组合的肌肉组 织进行基因芯片分析。细节在实施例2中给出，所述实施例2使用鼠后腿去负荷模型。可 以看出，与个别施用时相比，递送二者的组合时被活化或调节(上调或下调)的基因数量显 著增加。因为目前认为的，摄入后大部分维生素D被转化为25-0H D并在肝中加工，因此这 是一个令人惊讶的结果。因此，本发明的另一方面是活化或调节维生素D和25-0H D应答性人基因的方法， 所述方法包括对人施用维生素D和25-0H D3的组合。提供以下非限制性实施例来更好地阐述本发明。
实施例实施例1配制物&临床试骑配制物材料和方法提供作为粉末的25-0H D3经喷雾干燥的配制物。简言之，将25-0HD3和DL_ a -生 育酚溶于中链甘油三酯的油中，然后乳化进改性淀粉、蔗糖和抗坏血酸钠的水性溶液中。在 存在二氧化硅时将所述乳液在喷雾干燥器中雾化。在水含量(L0D)小于4%时收集得到的 粉末，并通过400 y m过筛。将其包装并密封在铝袋中，然后在低于15 °C的干燥处储存，并在 其制造后12个月以内使用。制造了独立的三组。详细地，通过在70°C真空下，在具有锚搅拌器(anchor stirrer)的FRYMIX加工单元中混合120分钟生产由以下组成的混合物 17. 300kg 水(WBI) 13. 460kg 改性的食物淀粉(CAPSUL HS) 3. 270kg 蔗糖 0. 730kg抗坏血酸钠通过在82°C下在具有螺旋桨搅拌器的双壁管中混合35分钟，制备由以下组成的 油相 0. 550kg BERGABEST MCT 油 60/40 0. 049kg 麦角钙化固醇(HY-D USP)
0. 183kg DL- a -生育酚将油相转移至FRYMIX加工单元内的基质中，并用内部胶体磨预乳化(60分钟， 70°C )。预乳液通过高压勻化器(20min)流通。将在70°C下粘度为60mPa s到90mPa s 的乳液通过高压泵转移至喷嘴。向塔中加入二氧化硅(SIPERNAT 320DS)作为流化剂，但是 预计其他二氧化硅形式也可以是合适的。喷雾和干燥参数在下文列出
权利要求
适合人使用的药物组合物，所述组合物包含维生素D和25 OHD3。
2.根据权利要求1的组合物，所述组合物还以片剂、胶囊或可注射的形式包含可药用 抗氧化剂和至少一种可药用载剂。
3.经喷雾干燥或包封的根据权利要求1或的珠粒组合物。
4.25-0H D3和维生素D用于制造用于减轻与25-0H D缺乏相关症状的人用药物的用途。
5.包含25-0H维生素D3的适用于人的营养药物、食物补充剂或食物。
6.根据权利要求5的营养药物、食物补充剂或食物，其还包含维生素D。
7.试剂盒，其包含多个单独剂量的a)维生素D和b)25-0HD3。
8.根据权利要求7的试剂盒，所述试剂盒还包含选自下组的至少一个成员容器、施用 作为对人的剂量的所述组合物的说明书。
9.根据权利要求7-8中任一项的试剂盒，其中存在至少七份多个单独剂量。
10.根据权利要求9的的试剂盒，其中存在至少30份单独剂量。
11.在人血、血清或血浆中提高或维持25-0HD浓度，或在人血、血清或血浆中达到 25-0H D浓度期望的稳态浓度，或提高在人血、血清或血浆中的25-0H D可预测性的方法，所 述方法包括向人施用维生素D和25-0H D3。
12.根据权利要求11的方法，其中所述维生素D和25-0HD3作为单独剂型被施用。
13.根据权利要求11的方法，其中所述维生素D和25-0HD3在相同剂型中被施用。
14.将人的延长的25-0HD血浆水平维持在基线以上至少60nmol/L的方法，所述方法 包括施用维生素D和25-0H D3的组合。
15.将人的25-0HD的血浆水平提高至基线以上至少30nmol/L的方法，所述方法包括 将25-0H D3和维生素D的组合施用至少一周。
16.在2小时内迅速提高人的25-0HD血浆水平的方法，所述方法包括施用25-0H D3 和维生素D的组合。
17.根据权利要求11-16中任一项的方法，其中所述人是老年人。
18.根据权利要求11-16中任一项的方法，其中所述人患有吸收不良综合征(例如受乳 糜泻、斯泼卢腹泻或短肠综合征的影响)。
19.根据权利要求11-16中任一项的方法，其中所述人的肝功能受损。
20.用于活化或调节维生素D和25-0HD应答型的人基因的方法，所述方法包括向人施 用维生素D和25-0H D3的组合。
全文摘要
本发明公开了包含维生素D(胆钙化固醇和/或麦角钙化醇)和25-OHD3(麦角钙化固醇)的组合物，以及这种组合物用于至少影响人中的维生素D的浓度、生物利用度、代谢或效力的用途。本发明还公开了所述组合物的形式和剂量，以及制造喷雾干燥的配制物的方法。
文档编号A23L1/303GK101951920SQ200980105261
公开日2011年1月19日 申请日期2009年2月12日 优先权日2008年2月13日
发明者伊丽莎白·斯达克林, 凯·尔本, 尼尔·罗伯特·巴克, 布鲁诺·H·勒安伯格, 斯文·沃尔夫拉姆, 沃特·克雷豪 申请人:帝斯曼知识产权资产管理有限公司